关于酶的特性的实验

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1、实验十：酶的特性实验目的：加深对酶的性质的认识。实验内容：温度对酶活力的影响pH对酶活力的影响酶的激活及抑制剂酶的专一性温度对酶活力的影响一、原理：酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37－40℃，植物酶的最适温度为50－60℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显改变，但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。二、器材：试管及试管架恒温水浴冰浴沸水浴三、试剂和材料：含0.2﹪淀粉的0.3％Na

2、Cl溶液150ml，需新鲜配制稀释200倍的唾液50ml：用蒸馏水漱口，以清除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释200倍，混匀备用。KI－碘溶液50ml：将KI20g及碘10g溶于100ml水中。使用前稀释10倍。四、操作方法：淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。取三支试管，编号后按下表加入试剂：管号123淀粉溶液（ml）1.51.51.5稀释

3、唾液（ml）11－煮沸过的稀释唾液（ml）－－－摇匀后，将1号、3号两试管放入37℃恒温水浴中，2号试管放入冰中，10min后去处，（将2号管内液体分为两半）用KI－碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10min后，再用碘液实验，结果如何？pH对酶活性的影响一、原理酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。二、器材试管及试管架吸管滴管50ml锥形瓶恒温水浴三、试剂和

4、材料新配制的溶于0.3％NaCl的0.5％淀粉溶液250ml稀释200倍的新鲜唾液100ml0.2mol/L磷酸氢二钠溶液600ml0.1mol/L柠檬酸溶液400mlKI－碘溶液50mlpH试纸：pH=5、pH=5.8、pH=6.8、pH=8四种四、操作方法：取四个标有号码的50ml锥形瓶。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以制备pH5.0－8.0的四种缓冲液。从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml，分别注入4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5％淀粉溶液2ml和稀释200倍的唾液2ml。向各试

5、管中加入稀释唾液的时间间隔各为1min。将各试管内容物混匀，并依次置于37℃恒温水浴中保温。第四管加入唾液2min后，每隔1min由第3管取出一滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴KI－碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时，向所有试管依次添加1－2滴KI－碘溶液。添加KI－碘溶液的时间间隔从第一管起，亦均为1min。观察各试管内容物呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。锥形瓶号码0.2mol/L磷酸氢二钠（ml）0.1mol/L柠檬酸（ml）pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.

6、849.720.288.0唾液淀粉酶的活化和抑制一、原理酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。二、器材：恒温水浴试管及试管架三、试剂和材料：0.1％的淀粉溶液150ml稀释200倍的新鲜唾液150ml1％NaCl溶液50ml1％硫酸铜溶液50ml1％硫酸钠溶液50mlKI－碘溶液100ml四、操作方法：管号12340.1％的淀粉溶液（ml）1.51.51.51.5稀释唾液（ml）0.50.50.50.51％硫酸铜溶液（ml）0.5－－－1％NaCl溶液（ml）－0.5－－1％硫酸钠溶液（m

7、l）－－0.5－蒸馏水（ml）－－－0.537℃恒温水浴、保温10minKI－碘溶液（滴）2－32－32－32－3现象注：保温时间可根据各人唾液淀粉酶活力调整解释说明，说明本实验第3管的意义酶的专一性一、原理酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶的作用为例，来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成由还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。二、器材：恒温水浴沸水浴试管及试管架三、试剂和材料：2％蔗糖溶液

8、150ml溶于0.3％NaCl的1％淀粉溶液（需新鲜配制）150ml稀释200倍的新鲜唾液100ml蔗糖酶溶液100ml将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤2－3次（离心），然后放在滤纸上自然干燥。取干酵母100g，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙，用力研磨，提取约1h