《药品检验》ppt课件

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1、药品质量检测技术第六章仪器分析教学目标1.掌握紫外分光光度法及可见分光光度法的基本原理2.掌握色谱法基本理论3.了解分光光度法和色谱法在工业生产和科学研究中的应用知识要点1.吸收光谱与物质结构的关系和光吸收基本定律2.色谱法基本理论技能要点1.紫外-可见分光光度计的应用2.GC、HPLC、TLC的基本应用学习目标第一节分光光度法一、概述二、紫外-可见分光光度法三、红外分光光度法一、概述分光光度法：测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内对光的吸收度，对物质进行定性、定量分析的方法称为分光光度法。主要包括:紫外分光光度（电子光谱）法：吸收光波长范围200～400nm，可用于物

2、质的定性和定量分析。可见分光光度（电子光谱）法：吸收光波长范围400～760nm，主要用于有色物质的定性和定量分析。二者合称为紫外-可见分光光度法即UV-ViS红外分光光度法（IR，分子振-转光谱）：利用红外吸收光谱对物质进行分析的方法，吸收光波长范围2.5—1000m，主要用于已知结构的有机化合物鉴别（定性）二、紫外-可见分光光度法光的基本特性物质对光的选择性吸收吸收定律紫外吸收光谱的应用紫外-可见分光光度计光的基本特性光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长、频率、光速c、波数（cm-1）等参数来描述：=c；波数=1/=/c光是由光子流组成，光子

3、的能量：E=h=hc/（Planck常数：h=6.626×10-34J×S)光的波长越短（频率越高），其能量越大。单色光：单波长的光（由具有相同能量的光子组成）白光（太阳光）：由各种单色光组成的复合光如果把适当颜色的两种光按一定强度比例混合，也可成为白光，这两种颜色的光称为互补色光。白光绿500-580橙600-650黄580-600红650-780紫400-450蓝450-480青蓝480-490青490-500光的互补色示意图物质对光的选择性吸收物质的颜色是基于物质对光有选择性吸收的结果而物质呈现的颜色则是被物质吸收光的互补色。物质的吸收光谱曲线：将不同波长的光依次

4、通过某一固定浓度和厚度的有色溶液，分别测出它们对各种波长光的吸收程度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，画出曲线，此曲线即称为该物质的光吸收曲线（或吸收光谱曲线）-胡罗卜素咖啡因阿斯匹林丙酮几种有机化合物的分子吸收光谱图吸收定律吸光度：单色光通过溶液时被吸收的程度，用A表示。朗伯（Lambert）和比耳（beer）分别于1760年和1852年研究了光的吸收与有色溶液按液层的厚度及溶液浓度的定量关系，奠定了分光光度分析法的理论基础。如果同时考虑溶液的浓度和液层的厚度都变化，都影响物质对光的吸收，则上述两个定律可合并为朗伯-比耳定律，得到：A=Kbc此式为光吸收定律的数学

5、表达式。式中A称为吸光度；K是比例常数，与入射光的波长、物质的性质和溶液的温度等因素有关。吸收系数A=Kbc中比例常数K称为吸收系数；物理意义：单位浓度的溶液液层厚度为1cm时，在一定波长下测得的吸光度。在药品检验的实际工作中，通常有两种表示方法：质量吸收系数a当c的单位为g/L，b的单位为cm时，K用a表示，称为质量吸收系数这时朗伯-比耳定律为：A＝abc。在药品检验中经常使用的是百分吸收系数，用（E1%1cm）表示。物理意义:当吸光物质溶液浓度为1%(1g/100mL)，液层厚度为1cm时，在一定条件下的吸收度。摩尔吸收系数ε当式中浓度c的单位为mol/L，液层厚度的单

6、位为cm时，则用另一符号ε表示，称为摩尔吸收系数，它表示物质的浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。其单位为L/mol·cm。这时朗伯-比耳定律就变为：A＝εbc紫外吸收光谱的应用鉴别：同一物质在相同条件下，测得的紫外-可见吸收光谱应具有完全相同的特征。对比吸收光谱特征参数比较吸收度比值的一致性对比吸收光谱的一致性杂质检查：药物与杂质的吸收光谱有明显差别含量测定：朗伯-比耳定律对照品比较法吸收系数法计算分光光度法紫外-可见分光光度计仪器的基本组成部件单色器吸收池检测器显示光源一般由光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示器（数据处理系统）五部分组成。光源钨灯或

7、卤钨灯——可见光源，325～2500nm氢灯或氘灯——紫外光源，185～375nm单色器（分光系统）包括狭缝、透镜系统（准直镜）和色散元件吸收池（比色皿）玻璃—能吸收紫外光，仅适用于可见光区；石英—不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区；要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）为了消除误差提高测量的准确度，两只比色皿应配套使用检测器（又叫接受器、光电转化器）光电池光电管光电倍增管（检测弱光常用）二极管阵列检测器信号显示器早期使用的是检流计、微安表、电位计、数字电压表、自动记录仪等。现代的分光光度计广泛采用数字电压表、函