血细胞研究仪血小板异常结果时血涂片重要性

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1、血细胞研究仪血小板异常结果时血涂片重要性摘要:目的探讨血细胞分析仪测定血小板异常时血涂片的重要性。方法SYSMEXXT-18001血细胞计数仪检测血小板异常结果(增高>500X109/L,减少500X109/L100例,年龄8月〜45岁,其中内科100例,儿科150例。1.2仪器与试剂SYSMEX-1800i全自动血细胞分析仪,双筒显微镜,原装配套试剂、质控物,瑞氏染色液。1.3方法1.3.1患者静脉采血,2ml血加入含有EDTA-K3抗凝真空管中,充分混匀,在lh内上机完成,每份标本测定3次,取平均值。1.3.2对250例血小板结

2、果异常的标本,同时进行血涂片复检,仪器计数相符合的标本(片中无血小板聚集现象,散在分布,与涂片观察相符)200例,其中50例为假性血小板减少和增加。1.3.3诊断血小板假性减少的标准。当血小板计数低于50X109/L时,多是显著性减少,而且此时并没有浅表皮肤及黏膜出血;显微镜检查发现血小板聚集成堆,在排除标本采集中不慎发生的凝集现象,这时可诊断为血小板假性减少。1.3.4血涂片法将血液标本推片、染色后,油镜下进行读片。血涂片法血小板数(X109/L)二涂片计数血小板的数X血液细胞分析仪白细胞数(X109/L)/涂片计数血小板时所能见

3、到白细胞数。2结果2.1排除了50例血小板假性增加和假性减少后,其余200例血细胞计数血小板增加或减少时与涂片法比较,符合率为(70/100)70%、(130/150)87%。2.250例血小板假性增加和假性减少仪器法与血涂片法比较,见表lo3讨论采血是否顺利是造成血小板偏低的一个重要影响因素,采集手指末梢血时,因进针浅,出血慢,挤压采血部位,使组织液渗入血液中,造成血小板减少,采集静脉血,若采血过程不顺利,血流不畅,静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时,因组织损伤,导致组织凝血因子混入血标本,产生肉眼看不见的微小凝块,造成血小板

4、减少,这是造成血细胞计数测定血小板结果偏低的常见的原因。因此,在阅片时应特别注意血小板减少患者阅片,如果必要应重新采血复查。血液标本放置的时间过短也能造成血小板结果偏低。在实际的工作中,在采取血液标本后都是立即开始检测,这时常常会出现血小板计数假性减少现象。究其原因,是因为血小板离体后,血小板的形态发生了变化,血小板外膜形成的微小管的游离端向外扩展,这使得在血小板周围形成一些丝状伪足,这些血小板伪足相互作用,形成了血小板可逆聚集体。这种血小板因为很难被溶血剂溶解,这使得血小板计数会暂时减少,随着时间的慢慢推移,这种假性聚集会发生一定

5、程度的解聚。因此,为了提高准确性,建议在采血后放置15〜20min再测定可得到准确结果。自动化的血液分析仪,无论是阻抗法还是光散射法,对于血小板数及形态正常的标本,结果一般比较可靠。但是,对于血小板明显减少或血小板形态异常者来讲,用自动化的血液分析仪来分析计数误差较大,甚至有时很难计数。主要原因是阻抗法和光散射法基本上都是按照细胞的大小来区分和计数的,但是正常人的血小板体积相差较大,而且体积分布的直方图并不是对称分布,而是明显向右延伸,也就是是说存在一些大的血小板。在病理的情况下,会更多地增加一些大血小板。因为多数血液分析仪较难区分

6、出小红细胞与大血小板,这使得很多大血小板被认为是红细胞而未计入血小板总数中,这也使得血小板计数结果明显偏低。大量的输入血液时会引起血小板减少。这种情况多在4〜6d后恢复正常。此外,某些患者在输血后的lw左右时间内,会出现血小板计数明显减少的现象。有些治疗方法对血小板的计数也会产生较大影响,如血液经光量子血疗仪照射后,血小板计数明显减少,经电镜观察发现,照射后的血小板形态不完整,形成大量的伪足及血小板碎片。EDTA盐是全自动血细胞计数仪常用的抗凝剂,它能保持细胞形态和防止血小板聚集,而有极少数人血小板在EDTA盐抗凝后,反而使PLT聚

7、集,EDTA(EthyleneDiamineTetraaceticAcid)依赖性血小板减少症(EDTA-dependentpseudothrombocytopenia,PTCP)是因为EDTA盐抗凝血中EDTA诱导血小板中的特殊蛋白使得血小板发生了凝集,而且当在全自动血细胞计数仪上检测时,血小板计数会发生假性减少的现象,血细胞分析仪不能计数凝集的血小板,因此导致本应在正常计数范围内的血小板可能计数为20X109/L[l]o当标本中血小板小于20X109/L时,仪器法可信度较差,不能很好地反映血小板的真实数量,也不能保证检测结果的准

8、确性,采用血涂片间接计数血小板,可较直观地反映患者血小板数量的多少,尤其对于血小板减少者。但是在某些情况下,假性血小板减少隐藏着真实的血小板减少或者血小板增多[2],由于血小板生理特性,易粘附、聚集,在PLT20%,血小板直方图异常,

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