食品卫生微生物检验的质量控制

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1、食品卫生微生物检验的质量控制实验室质量控制规范-食品微生物检测BG/T27405-2008实验室的质量控制包括的内容：--人、机、料、法、环。人员技术专业培训；生物安全培训；检验技能的客观评估(内部质量控制、能力验证或标准菌株测试、新方法使用前的操作技能评估)。仪器设备普通玻璃器皿的灭菌、消毒；测量设备、定容器具的校准与维护；特殊设备的验证与性能评估(标准菌株、实验室间的比对)。试剂与材料培养基的制备与性能测试；标准试剂、标准培养物的保存(可追溯性、有效期限、老化、退化或变异、污染)。检验方法与质量控制规范管理体系、质量体系的运行；标准方法的有效性；非标方法的确认与验证；实验室内部质量

2、控制与外部质量评估；不确定度的测量。实验室环境监测总体布局(满足工作量、对样品无污染、对人员无伤害可能)；不同的工作区域划分；温度、湿度、照度、噪声、洁净度符合检验与生物安全要求；食品卫生微生物学检验的培养基质量控制原则培养基的起源与发展微生物培养基(CultureMedia)，是指由人工方法配制而成，用于微生物培养、分离、鉴别、保存、药敏试验等的混合营养物制品。十九世纪未，德国著名细菌学家科赫(RoberKock，1843~1910)成功地制备固体培养基，并发明了玻璃培养皿，极大地推动了细菌的分离、培养和鉴别。美国Difco公司至今已有100多年历史，早在1895年就开始生产胃酶、胰

3、酶制品，1917年生产脱水培养基。英国Oxid公司1950年开始商品化生产干燥培养基。Difco和Oxid的产品被全球微生物实验室广泛接受，产品达400多种。我国1958年开始研制干燥培养基，目前已有50多个生产厂家，商品干粉培养基达200多种。培养基质量控制的意义培养基的质量直接关系到样品的检验结果。微生物的检验与研究是否成功，在很大程度上取决于培养基的质量。培养基质量是保证实验结果的准确性、科学性、公正性的根本。高质量的培养基可提高工作效率、降低使用成本。国际通用的培养基质控标准目前国际上通用的培养基质控标准：ISO/TS1113-1：2000；ISO/TS1113-2：2003。食

4、品和动物饲料-培养基制备指南-实验室培养基制备质量保证通则。食品和动物饲料-培养基制备指南-培养基性能测试实用指南。国内现行的培养基质控标准SN/T1538.1-2005；SN/T1538.2-2007。培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南WS/T232-2002商业性微生物培养基质量检验规程。卫生部1993年颁布的“食品卫生微生物检验用干燥培养基生产质控和质量标准”。培养基实验室配制的基本程序检查与称量测定及矫正PH溶化(水化)无菌检验、性能检验分装灭菌密封性、日期、说明、配方蒸馏水、加热惰性容器、＜500mL25℃,灭菌后

5、pH±0.21MNaOHor1MHCl121℃,15min.一般用NaOH调节时，灭菌后pH会下降0.1~0.2，用NaHCO3调节时，灭菌后pH会上升0.1。干粉培养基不需调节pH。培养基制备前的准备实验室收到培养基后，建立实验室检查记录单：--培养基的名称和批号；--接收日期及有效期；--包装及其完整性。贮存时，建立实验室保存有效培养基的目录清单：--贮存条件(温度、时间)；--容器密闭性复查；--首次开封日期；--内容物的感观检查(粉未的流动性、均匀性、色泽、结块)。培养基实验室制备通则水--配制培养基应使用蒸馏水或相同质量的水，以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物质。--如果

6、蒸馏水是用氯消毒的水制备的，在蒸馏前应先对氯进行中和。--为保证蒸馏水的质量，蒸馏水的电阻率最少应达到3000000Ωcm。--采用离子交换器（去离子）生产的去离子水，微生物含量较高，这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水，而应使用蒸馏水。--盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的（如中性玻璃，聚乙烯等），在初次使用前要确认容器中不含有任何抑制因子。称重和复水--操作人员的自我防护：注意缓慢操作，必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末。--严格按产品说明书准确称量。--称量所需量的脱水培养基，先加入适量

7、的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量。--尽量在湿度较低的房间中称量，以避免培养基受潮。溶解和分装--脱水培养基加水后适当加热，并不停搅拌使其快速溶解，必要时重新溶解。--含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。--用各种成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中，并充分溶解，然后再加水至所需的量。pH值的测定和调整--培养基灭菌冷却到25℃时，pH的变化不应超过0.2个单位。--用稀酸或稀碱（1mol的NaOH