橘籽中柠檬苦素的提取工艺研究【毕业论文】

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1、本科毕业论文（20届）橘籽中柠檬苦素的提取工艺研究专业：应用化学摘要：本论文采用高效液相色谱法(HPLC)利用正交设计实验来确定橘籽中提取柠檬苦素的最佳工艺条件。结果显示：最大限量提取柠檬苦素的最佳实验条件是：反应温度为70℃，提取时间为4小时，液料比为1g：80mL。 关键词：高效液相色谱法(HPLC)；橘籽；正交设计；柠檬苦素TheextractionprocessoflimoninfromorangeseedsAbstract:Inthisstudy,weusedtheorthogonalexperimental

2、design,usinghighperformanceliquidchromatography(HPLC)todeterminesomeofthebestconditionsofextractionofLimoninbriefly.Basedontheexperimentaldata,wecanobtainthatthetemperatureofextractioncanbecontrolledataround70℃,thetimecanbecontrolledin5hours,andliquidratiocanbec

3、ontrolledin1:80(g/mL).Keywords:highperformanceliquidchromatography(HPLC);orangeseeds;limonin;orthogonal目录1引言11.1柠檬苦素的简介11.2柠檬苦素的作用21.2.1柠檬苦素的抗癌作用21.2.2柠檬苦素在柑桔化学分类上的作用21.3柠檬苦素的检测方法22.实验部分32.1仪器与试剂32.1.1实验仪器32.1.2实验试剂32.2实验原理32.3实验步骤32.3.1绘制柠檬苦素标准曲线32.3.2设计正交实验表32

4、.3.3柠檬苦素的提取42.3.4柠檬苦素的检测43.结果与分析53.1柠檬苦素标准品高效液相色谱图53.2标准曲线图的绘制53.3实验样品的HPLC检测63.4数据处理123.5结果分析144展望14致谢161引言1.1柠檬苦素的简介柠檬苦素类化合物主要存在于芸香科植物果实中，如枳实（脐橙、柑桔、香橙）柚等中。以果核（种子）中含量较高，果皮中含量较少（约万分之一至十万分之五）。柑桔中的类柠檬苦素存在两种形式，一种为类柠檬苦素配基化合物，已分离鉴定出37种[1]，另一种为类柠檬苦素葡萄搪苷化合物，已分离鉴定出21种[2

5、]。柠檬苦素的分子式：C26H30O8；分子结构如图1-1所示：图1-1柠檬苦素的分子结构最新研究表明柑橘中的三萜类物质在抗肿瘤方面有相当好的成效，柠檬苦素(1imonin)及其类似物就是其中一类重要组分[3]。柠檬苦素及其类似物在抗肿瘤、镇痛、抗炎、改善睡眠、抗病毒、抗菌、利尿、抗焦虑，调节体内胆固醇含量、防止动脉粥样硬化和除虫等方面都具有显著效果[4]。日本、美国已报道了柠檬苦素类物质制作功能性食品和饮料的专利[5]，柠檬苦素的应用前景极为可观。目前，柠檬苦素主要采用热提取、浸泡提取及超临界萃取等提取方法从天然植物

6、中提取，研究人员已经成功从芸香科和楝科的多种植物中提取出柠檬苦素及其类似物[6]。由于热提取和浸泡提取柠檬苦素，需要耗费大量的时间和不必要的溶剂浪费，而且，在提取柠檬苦素的过程当中，脱脂和提取过程中所需要的溶剂对人体健康又有影响，而对于用超临界萃取的提取方法来说，节省了时间与溶剂的用量，并且无污染。然而，对于现阶段的科技发展，超临界萃取的方法，无法得到广泛的应用。因此，对于如何在最有效的时间，用最合适的溶剂和溶剂用量及尽最大限度来控制提取过程中溶剂对人体健康的影响的研究，显得越来越重要。1.2柠檬苦素的作用1.2.1柠

7、檬苦素的抗癌作用1989年Lam[7]14等用柑桔类柠檬苦素在小鼠上做试验，发现类柠檬苦素能诱导GST（谷胱甘肽转移酶）的活性，能抑制化学致癌物诱导的肿瘤的发生。其中诺米林在肝脏和小肠粘膜的诱导性最高，柠碱的诱导作用较弱。柠碱和诺米林对BP诱导ICR4Ia小鼠前胃癌的抑制作用试验，结果表明，诺米林剂量为10mg时，其肿瘤数量减少50%，诺米林抗癌效果优于柠碱。Miller[8]等研究发现，口服柠碱(2.5%)的田鼠，可使DMBA诱导TPA促进的口腔癌肿瘤数量减少20%，重量减少50%。诺米林对DMBA诱导的癌症的抑制作

8、用不如柠碱。他们还发现，柠碱在皮肤癌促进期的抑制作用优于诺米林，而诺米林恰好相反，在起始阶段抑制作用强。Miller[9]等发现葡萄糖苷有相同的化学抑制活性，对DMBA诱导的田鼠皮肤癌有抑制作用，柠碱葡萄糖苷3.5%浓度下表现出对动物平均肿瘤负担下降55%，并且高于诺米林葡萄糖苷和诺米林酸葡萄糖苷，类柠檬苦素抗癌的机理还在进一步探