实验十五:需氧革兰阳性杆菌

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1、实验十五:需氧革兰阳性杆菌实验目的掌握炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的形态、菌落特点和常用鉴定试验。掌握白喉棒状杆菌的培养特点及形态特征,熟悉常用染色方法(ALBERT染色法)。实验内容炭疽杆菌:1、GS:+大杆菌,呈矩形,短链状或竹节状,陈旧培养物上可见芽孢.2、菌落形态:粗糙,灰白色,边缘不整齐,低倍镜下直接观察卷发状菌落,或看卷发状菌落示教片。3、串珠试验:将新鲜炭疽杆菌肉汤培养物用棉签均匀涂布于血平板上,干后贴5-6张青霉素药敏纸片,,35°C孵育2小时左右,用接种环在纸片周边盲目刮取培养物(注意不可刮到琼脂)进行涂片,注意涂

2、片范围小些,尽量涂厚些,涂片固定后进行GS,可见炭疽杆菌因细胞壁受损,菌体膨大形成串珠样。蜡样芽孢杆菌1、GS:+大杆菌,两端钝圆.6小时后可见小于菌体的圆形芽孢.2、菌落形态:直接观察在卵黄琼脂平板上的菌落,圆形突起,表面粗糙有蜡光,不透明。3、乳光反应:蜡样芽孢杆菌能产生卵磷脂酶,在有钙离子存在时,能迅速分解培养基中的卵磷脂,生成甘油酯和水溶性磷脂酰胆碱,在菌落周围出现乳白色混浊环,称乳光反应或卵黄反应。一般3小时即可观察结果。白喉棒状杆菌1、观察白喉棒状杆菌在鸡蛋斜面上的菌落表现。2、GS3、Albert染色:最为常用的异染

3、颗粒染色法。涂片干燥固定后,滴加甲液染10分钟,水洗,滴加乙液染5分钟,水洗,吸干水分后油镜下观察,可见菌体呈草绿色,异染颗粒呈蓝紫色。白喉棒状杆菌小结

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