泽漆总黄酮提取纯化工艺的研究-结题报告

泽漆总黄酮提取纯化工艺的研究-结题报告

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时间:2019-10-23

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1、泽漆总黄酮提取纯化工艺的研究-结题报告申请人:林水汉指导教师:陈可第一部分:[课题提出的背景及意义]泽漆是大戟屈植物泽漆的干燥全草,别名猫儿眼睛草、五风灵芝等。长期以来泽漆一直作为民间草药,味苦,性微寒,有毒,归肺、小肠、大肠经。据《本草纲目》记载,泽漆冇利水消肿、消痰退热、散结杀虫等功效。临床用于治疗腹水、水肿、肺结核、颈淋巴结核、痰多喘咳、癣疮,民间还用于治疗官颈癌、食道癌等,并具有一定疗效,因此泽漆是一味很冇研究开发价值的药材。泽漆主要含二菇酯类、黄酮类化合物,黄酮类化合物是泽漆的主要药理活性成分,另外还

2、含冇三砧、當醇、多酚类、氨基酸、天然油脂类化合物等多种成分。本研究拟根据黄酮类化合物的提取规律,采用有机溶剂提取法,建立泽漆中总黄酮的提取工艺,并应用大孔树脂对泽漆总黄酮的分离纯化工艺进行研究,建立系统的泽漆总黄酮的提取分离工艺。第二部分:[研究的主要内容和目标]建立泽漆总黄酮的醇提工艺和大孔树脂纯化工艺。第三部分:[研究方法]1.采用A1C1.3比色法测定总黄酮的含量2.设计止交试验采用回流法进行提取工艺的研究。第四部分:[研究工作的组织与实施]曹纬国、陈可老师作为指导,木研究小组讨论提岀研究方案,通过预实验

3、确定了泽漆屮总黃酮的含量,经过修改完善,确定研究方案。研究的阶段分为实验准备阶段,泽漆样品的购买鉴定,泽漆总黄酮含量测定方法的研究,泽漆总黄酮捉取工艺的研究三个阶段。第五部分:[研究结论与成果]本研究首先确定了泽漆总黄酮的含量测定方法,然后根据黄酮类化合物的提取规律,采用有机溶剂提取法,设计止交试验,建立泽漆中总黄酮的提取工艺。该工艺稳定可靠,具有一定的应用价值,可用于泽漆资源的开发。第六部分:[质量与效果分析]对研究结果进行分析:通过合理的实验设计,正确的实验操作,根据黃酮类化合物的提取规律,采用回流提取法,

4、设计正交试验,建立泽漆中总黄酮的提取工艺,基木完成研究口标;为泽漆资源的开发利用提供了基木数据。研究的口我评价:泽漆为双子叶植物大戟科植物,作为一种民间常用药物,冇化痰、逐水、消肿、散结、杀虫等功效,用于水肿,肝硬化腹水,细菌性痢疾;外用治淋巴结结核,结核性痿管,神经性皮炎,全国各地均有分布,资源十分丰富。据文献报道泽漆主要冇效成分为黄酮类化合物,目前没冇见到关于泽漆总黄酮提取分离工艺的研究报道。收获与体会:通过这个研究同学们学习了中药提取物的基本提取方法,以及提取的试验设计。第七部分:[进一步要研究的问题]附

5、:实验报告等。1.泽漆中总黄酮的含量测定1.1材料木实验泽漆样站购口重庆药材市场,样站经木校中药教研宗工刚副教授鉴定为泽漆。1.2主要仪器与试剂仪器:龙尼柯UV-2102PC紫外可见分光光度计,赛多利斯万分Z—电了分析天平。试剂:芦丁对照品由上海融禾提供,水为重蒸水,其余所用试剂均为分析纯。1・3总黄酮的含量测定1.3.1芦丁对照品溶液的制备精密称取120C减压干燥至恒重的芦J*12.5mg,置于50mL容量瓶中,加无水乙醇定容至刻度,摇匀即得。1.3.2供试品溶液的制备精密称取泽漆细粉2g,置索氏提取器中,加

6、石油M50mL,加热回流至提取液无色,弃去石油瞇提取液。药渣挥干石油瞇后置烘箱中60°CT燥lh,然后转移至具塞锥形瓶屮,精密加入80%乙醇50mL,密塞,称定重暈,冷浸过夜,超声提取60min,放冷后再称定重量,用80%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液20n)L作为供试站溶液。1.3.3测定波长的选择取芦丁对照品溶液和供试品溶液各ImL,分别置于25mL容量瓶中,分别加入0.linol・广三氯化铝溶液8mL,再加入pH值为5・5的醋酸-醋酸钠缓冲液4n)L,再加入80%乙醇至刻度,摇匀,放置40min

7、显色,在200〜600nni波长范围内扫描。结果表明,芦丁对照品和泽漆样品溶液均在413mn处有最人吸收,因此选413nm为测定波长。1.3.4线性关系考察精密量取芦丁对照品溶液0,0.3,0.6,1.0,1.5,2.0,3.OmL,分别置于25讥容量瓶中,分别加入0.lmol・L三氯化铝溶液8mL,再加入pH值为5.5的醋酸-醋酸钠缓冲液4皿,再加入80%乙醇至刻度,摇匀,放置40min显色,以第1瓶溶液作为空白,在413nm处测定各溶液的吸光度,以吸光度A为纵坐标,芦丁对照品物质的量M(mg)为横坐标,得回

8、归方程:A二1.328M+0.131,r二0.9995,表明芦丁在0.075〜0.75mg范围内呈良好线性关系。1.3.5精密度试验粕密吸収同一对照站溶液6份,各ImL,分别置于25mL容量瓶中,按“2.1.4”项下方法显色,在413nm处测定吸光度,结果测得吸光度的RSD二1.76%。1.3.6重复性试验取同一批泽漆样殆细粉6份,每份2g,分别按照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液

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