《遗传学》实验指导

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1、《遗传学》实验指导福建农林大学作物科学学院遗传育种教研室刖吞遗传学诞生至今，已冇一百多年的历史，已是当今生命科学中发展最快的一门前沿学科，它涉及生命科学的各个领域，引领生命科学从各个水平探讨生命的奥秘。而H.,遗传学与农、林、牧、渔、工业发酵、医药、优牛优育等密切相关，是动物、植物、微牛物育种实践的理论基础，具有很强的实践性,因此，遗传学实验课是遗传学教学屮的重耍环节0通过实验验证遗传学基本规律、掌握遗传学试验技术、分析遗传学试验结果，从而加深理解遗传学理论知识，初步掌握遗传学研究的棊本实验技能。本实验教材适合本科牛物技术、牛物科学专业和农业院校的

2、农学、植物保护等专业。随着生命科学的发展，在棊木遗传学实验棊础上，增加群体遗传学实验内容。实验共分为五大部分：第一部分：遗传的细胞学基础第二部分：染色休变异第三部分：验证遗传规律笫四部分：数量遗传笫五部分：群体遗传生物技术专业和牛物科学专业遗传学实验课为18学时，开设6次实验，每一部分内容为1・2次实验，并结合多媒体示范实验。农学专业遗传实验课为15学时，开设5次实验，内容为第一，三、四、五部分，同时也结合多媒体示范实验。植物保护专业遗传实验为9学时，开设了3次实验，内容为第一、三、四个部分。实验分组进行，每组30-40人。刖S一、遗传的细胞学某础

3、实验一：冇丝分裂制片技术及显微观察3实验二：染色体核型分析5实验三：染色体显带技术和带型分析8实验四：减数分裂制片技术及显微观察11二、染色体变异实验五：染色体结构变异13实验六：染色体数H变异14三、验证遗传规律实验七：分离规律的验证15实验八：独立分配规律的验证19四、数量遗传实验九：概率和统计原理在遗传研究中的应用22实验十：数虽性状的遗传分析24实验十一：杂种优势表现的观察分析27五、群体遗传：实验十二：人类ABO血型的测定与分析28实验十三：同工酶遗传标记分析29实验十四：人类性状的遗传分析33实验一有丝分裂制片技术和显微观察一、实验目的

4、通过対植物组织的収材、预处理、解离、染色、压片等制片步骤的学习，掌握植物制片技术，奠定细胞遗传学的研究技术；通过対植物根尖细胞的观察，掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。二、实验原理有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程屮，核内染色休准确地复制，并有规律地、均匀地分配到两个了细胞中去，使了细胞和母细胞的遗传组成一样，保证了植物细胞的遗传性状的—•致。各种生长旺盛的植物组织屮，如根尖纽织、茎尖组织、居间分牛组织、愈伤组织等，常进行着剧烈的细胞有丝分裂。在细胞分裂的适当(分裂旺盛期)时候取材，进行预处理，固定、解离、染色和涂抹压片等方

5、法，使细胞、染色体分散，便于在显微镜卜-观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色休计数。三、实验材料蚕豆(Wda/bba,2n=12)干种了洋葱(Alliumcepa,2n=16)鳞茎四、实验仪器及用具多媒体显微演示系统、显微镜、培养箱、分析天平、水浴锅、酒精灯、的刀(或刀片)、镀子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、标签纸、胶水、棕色瓶等。五、药品和试剂秋水仙碱、8—拜基峰麻、苏木精、水合三氯乙醛、铁矶[铁钾矶KFe(SO4)2*12H2O或铁钱矶NH4Fe(SO4)2-12H2O]＞无水酒精、冰醋酸、1N盐酸、50%丙酸六、实验步骤(一)材料

6、准备：1.蚕豆根尖：选収新鲜无病斑的蚕豆T•种子，经FI晒后，放在烧杯内，室温下清水浸泡一昼栈。种子吸水膨胀后，放在搪瓷盘上20°C左右保湿培养(双层纱布覆盖)，待根长1〜2cm时，于上午9:00〜10:30或卞午14:00-16:00进剪下根尖备用。2.洋葱根尖：通过休眠的洋葱鳞茎，经FI晒后，置于盛有清水的小烧杯上，根部与水接触，20〜25°C光照条件下培养2〜3天，待根长l~2cm时，于上午9:00-11:00剪下根尖备用。（二）预处理为了获得较多屮期分裂相的细胞，同时使染色体缩短和分散，可对根尖进行预处理，处理方法如下：1.0.05%〜0.

7、2%的秋水仙碱水溶液处理2〜4小时。2.0.002M的8〜梵基咳I林溶液处理3〜4小时。3.根尖浸在蒸憎水中于在1〜4°C低温下处理24小时。（三）固定：用蒸係水洗净材料，再用卡诺氏（冰醋酸:无水酒精=1:3）固定液（川量应为材料体积的15倍以±）室温下固定30〜60分钟。固定的材料如暂不制片，可经90%酒精一80%酒精一70%酒精（各半小时）浸泡进行转换，最后置于70%酒精内放入0〜4°C冰箱，约口J保存半年。如保存时间太长，需重新固定后再用。（四）解离：根尖、茎尖等体细胞需经处理，除去细胞间的果胶层，并使细胞撰软化，才便于压片。这种处理过程称为

8、解离，解离时间的长短依植物材料和解离液的不同而不同。时间短细胞不易压散，时间过长，细胞被压破，且影响染色效果。方法1：固定