实验一-遗传学实验指导

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1、实验一、显微镜的使用与维护—、显微镜的组成（仿Olympus）1.机械部分镜头转换器；粗、细准焦螺旋；载物台；亥iJ度尺；镜臂；镜座2.光学部分⑴放人系统物镜（三个）；甘镜；镜筒放人锂目镜碱X㈱倍数（2）集光系统光栅；聚光镜；反光镜；开关二、使用1•开关：动作要轻、慢，不使用时要及时关闭。2.调焦距：先用粗准伐螺旋，再用细准焦螺旋。3.安指iHl加拿人树胶、头发4.观察：低倍镜T高倍镜三、维护工作1.擦镜头时，用双层镜头纸对折，从中间向周围擦，不能用滤纸或英它物品代替镜头纸。每次实验完毕，镜身要用纱布擦干净。清洗液⑴乙瞇：无水乙醇=85:15（冬春季）或80:20（夏秋季）⑵二甲苯2.载物台上

2、的载玻丿¥和盖玻丿丫要清讣f,切勿污染物镜或北它部件。3歳微镜不可上锁，如不小心会损伤粗、细准焦螺旋。4.由低倍向高倍转换时，明肖微卜•降载物台，以免损伤显微镜。5.存放时，将娥物台降£幄低点，并把镜头移开。所需材料及药品接线板、乙醯:无水乙醇=80:20、牙签、加拿大树胶、镜头纸第一大实验细胞学实验实验一、细胞固定、染色原理与方法一、固定与固定液（一）固定：将新鲜的活组织从生物体取卜后立即投入固定剂中，借助化学药品的作用，使细胞保持原有开恣结构的一种手段。1•目的⑴迅速防」呦胞死门后的变化防止自溶、腐败，尽量保持牛长状态结构。⑵使细胞中的蛋口质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持牛前

3、的形态。(3)妙IL织内各种物质成分产牛不同的折光率，便于观察和鉴定。⑷使不同纽织成分对染料不同的亲和力，便于染色。⑸防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。2.10⑴有丝分裂：有丝分裂匸要发牛在槌長茎牛长点及幼叶等部位的分牛纟I织根尖取材容易，操作和鉴定方便。(2)减数分裂：选取适当人小的花蕾是观察花粉母细胞减数分裂的关键性的笫步。此I寸的植株形态及花蕾人小依植物的类别及品种有所不同。小麦：在植株开始挑旗，旗叶与卜•一叶的"I耳间距为34cm,花药长度人致在l・2mm左右，黄绿色时取材最好。如花药为绿色时则为时过早，花药为黄色，则过时。般上午&10点为取材最佳时间。玉米：•般夏玉米在7月

4、份取材，以上午7-8点为好。在米雌穗未抽出前的7・10大手摸植株上部(喇叭口卜:部)右松软感觉，表明雄花序即将抽出。川刀在顶叶近喇叭口处纵向划—•刀，切口长10-15cm,剥出雄花序，顶端花药长3・5mm,花药尚未变黄时取材。蚕豆：从现蕾开始，上午1411点川选取2・3mm大小的花蕾或一小段花序。蚕豆开花的次序是由下而上，由外而内。1.固定时的注意事项⑴固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既町以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。(3)固定的时间要合适：与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间矩；温度高则时间短，温度低则时间

5、长。经固定的材料如不及II寸使)IJ,可以经过畑酒精换到70%酒精屮各半小时，再换入一次70%酒粧在(M°C冰箱内可保存半年。经过较长时间保存的材料进行观察前吋以换新的固定液再处理一次，效果Wo(二)固定液固定液包括简单固定液和混合固定液两种。简单固定液就是川一种药帝作为固定液，如乙醇、甲醛、冰醋酸、升汞等。简单固定液只对细胞的某种成分固定效果较好，而不能将所有的成分都保存卜來。混合固定液是指两种或两种以上的化沖物质的混合液，如卡诺氏固定液等。1.固定液的条件⑴遞渗疋1织杀死原牛质。林死的短时期11「细邮态禅右所变化。⑵必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使纽织内外完全固定。⑶尽町自謳

6、免陋I［细翎做收缩。⑷使细胞内的成分凝固或沉淀。(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。⑹增加媒染作用和染色能力。⑺储II纟股硬，具有一定的磁。⑻固定以后自维到保存的作丿IJo⑼在凝固原牛质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原牛质变形。2制IJ的儿种固定液⑴酒粗有固定、硬化和脱水的作川。可以固定白蛋口、球蛋口、核蛋白，但对核蛋白固定效果较差（亲和力小且易自溶）。酒精固定的特点是杀死快，渗透力强，对纽织收缩较人（可I炊20%左右），可使材料变硬。酒精常川于混合固定液卩，但由于它本身是—种还原剂，很容易氧化成乙醛，戻至氧化成醋酸，因此最好不与三氧化銘、重馅酸钾及娥酸

7、等氧化剂配合使W。但与甲醛、醋酸或丙酸配合，丿IJ作固定效果很好。酒精能溶解脂肪及凝脂，故不宜用來固定月铁材料。（2）甲醛水溶液：甲醛在水屮的溶解度为3740%,渗透力强，固定均匀，对纽织收缩作用小，般丿IJ于固定大材料。市伟溶液屮含量下降，因形成三聚甲醛而失效。（3）冰醋纯醋酸在温度稍变低时即形成冰晶，所以乂称为冰醋酸。常川0.345%的浓度作为固定液。冰醋酸对材料有膨胀作用，对核蛋白固定好，可