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1、磷脂酶D高效产生菌的筛选及鉴定代书玲'张江'商军彳(1.上海农林职业技术学院,上海松江:201600;2.上海市兽跖饲料检测所,上海:201103)摘要:采用蛋黄平板法,从河南某香油作坊附近土样中筛选到两株降解磷脂的菌株X2和X10,产物分析和酶活测定表明,X2所产磷脂酶主要为磷脂酶D,隠活3.2U/mL,X10除产少量磷脂酶D外,可能还产礴脂酶A。根据形态观察、/理心化特征和BIOLOGH动微牛物分析系统的鉴定,初步判定X2为蜡状芽他^(Bacilluscereus)^X10为嗜麦芽糖寡养单胞菌(SlenolrophomonasmaltophiliaA
2、关键词:磷脂酚D;菌株筛选;鉴定ScreeningandIdentificationoftheHighPhospholipaseD-producingStrainsDaiShuling,ZhangJiang,ShangJun"(1.ShanghaiVocationalandTechnicalCollegeofAgricultureandForestry,Songjiang,Shanghai,201600;2.ShanghaiInstituteforVeterinaryDrug&Feedscontrol,Shanghai,201103)Abstract:T
3、heresearchaimedtoscreenandidentifyhighproducingstrainsofPhospholipaseD・StrainswereisolatedfromsoilnearasesameoilworkshopinHenanbythemethodofeggyolkplateandidentifiedaccordingtotheirshapes,physiologicalandbiochemicalcharacteristics,aswellasBIOLOGautomaticmicrobiologyanalysissystem
4、.TwodegradatingphospholipidsstrainsX2andXI0wereobtained.TheanalysesofthedegradationproductsandPhospholipaseDactivityshowedthatstrainX2mainlyproducedphospholipaseDandtheactivitywasupto3.2U/mL.whileX10producedotherphospholipaseinadditiontoasmallamountofphospholipaseD.Accordingtothe
5、resultofidentificationstrainsX2andX10werePreliminarilyidentifiedasBacilluscereusandStenotrophomonasmaltophiliarespectively.PhospholipaseDproducedstrainswereisolatedandX2wasascertainedasthefurtherexperimentalstrainofproducingphospholipaseD.Keywords:phospholipaseD,strainsscreening,
6、identification磷脂酶D(phospholipaseD),简称PLD,是一•类特殊的酯键水解酶,它能催化水解磷脂分子中的磷酸和拜基化合物(如胆碱、乙醇胺等)的轻基成酯的P-0键,水解产物为磷脂酸和轻基化合物。除水解作用外,在特定条件下,还能催化-些含轻基的化合物结合到磷脂的酰基上,形成新的磷脂,这一特性称为PLD的磷脂酰基转移特性,通常也称作碱基交换反应。因此,利用PLI)能够在休外成功的对磷脂进行改性⑴,特别是PI,D催化的碱基交换反应为制备单一磷脂和稀冇磷脂捉供了方便的途径2铁PLD广泛存在于各种植物中,在动物和微生物中也有分布。微生物P
7、LD是本世纪60年代发现的,至今已报道的产PLD的微牛物种类主要有链霉菌l^(streptomyces)^棒状杆菌属(corynebacterium丿、人肠杆菌属(Escherichia)、假单胞菌属(Pseudomonas)沙门氏杆菌属(Salmonella)>副流感嗜血-杆菌(Haemophilusparainfluenzae)等国外所筛选的产PLD的菌株以链霉菌属的微生物居多,且具有较高的转磷酯酰基活性,但链霉菌生长周期长(近7d);国内目前所报道的产PLD的微生物主要有链霉菌属、假单胞菌属及作为布主细胞的大肠杆菌等,但活力普遍不高,离产业化生产还
8、有一定距离。本文通过人量筛选,以期获得高产PLD的细菌。1材料与方法1」材料1.