安琪活性干酵母的富硒研究

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1、安琪活性干酵母的富硒研究Studiesonseleniumrichabilityofangelactivedryyeast柴丽红苗丹CHAILi-hongMIAO-Dan（长安大学环境科学与工程学院，陕西西安710064）（EnvironmentalScienceandEngineeringCollegeofChang’anUniversity,Xi’an,Shaanxi710064,China）摘要：以安琪活性干酵母为菌种，分析了硒添加量、培养时间、接种量等发酵条件对其生长及富硒性能的影响，并通过正交试验初步确定了发酵条件的最优方案。Abstract:Inth

2、isresearch,theseleniumrichabilityofangelactivedryyeastanditsinitialoptimizedcultivationconditionwerestudiedbyorthogonalexperiment.关键词：活性干酵母；硒；发酵条件Keywords:Activedryyeast；Selenium；Cultivationcondition硒（Selenium,Se）是人体内必需的微量元素之一，具有诸多的生物学功[1，2]能，缺硒则会导致多种疾病的发生。人体内的硒大多来源于食物，但食物中[3]硒含量通常很低

3、，难以满足机体的需要。以无机硒作为硒源补充硒营养不足，储存在一定的毒性外，其生物利用率也低。而利用生物转化法，将无机硒转化成有机硒，则可以提高硒的利用率，是开发新型硒源的一条安全有效的途径。酵母对多种微量元素都具有较强的富集作用，同时其还具有易生长，发酵周期短，自身含有丰富的营养成分等优点，是将无机硒转化为有机硒的理想载体[4～6]。关于富硒酵母的研制，国内外均有报导，所用菌种大多局限于啤酒酵母，对其它酵母菌的富硒性能及发酵条件则缺少较深入的研究。1材料与方法1.1实验材料及试剂安琪活性干酵母：湖北安琪酵母股份有限公司；活化培养基：蔗糖1g，蒸馏水80mL；发酵

4、培养基：YEPS培养基，即酵母粉（YE）10g/L，蛋白胨（P）10g/L，蔗糖（S）40g/L，pH自然；亚硒酸钠、DAB（3，3´-二氨基联苯胺）、已二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）等。1.2实验仪器721可见分光光度计,HHSyZI-Ni4电恒温水浴锅,HY-2调速多用振荡器等。————————————作者简介：柴丽红（1975-），女，长安大学环境科学与工程学院讲师。E-mail:lhchaiwhy@yahoo.com.cn收稿日期：2005-08-011.3实验方法1.3.1干酵母活化方法称取2g活性干酵母，加入到预先灭菌过的活化培养基中，30℃静置

5、活化2h。1.3.2培养方法将活化后的菌种按试验要求接种到发酵培养基中，30℃，200r/min摇床培养，其它条件由发酵实验具体而定。1.3.3培养条件初步优化分析不同硒添加量、接种量、培养时间及装液量对活性干酵母生物量和硒含量的影响，确定合适的发酵条件。1.3.4正交试验设计选取L9（34）正交试验表，进一步确认各影响因素的显著性及多因素对实验结果的综合影响。1.3.5酵母生物量的测定将发酵液5000r/min离心10min，收集菌体，蒸馏水洗涤2次，收集新鲜酵母，60～70℃烘干至恒重即可得酵母生物量，以g/L表示。[7]1.3.6酵母中硒含量的测定可见分光

6、光度法。硒总含量（μg/L）=硒含量（μg/g）×生物量（g/L）2结果与讨论2.1硒添加量对酵母生物量和硒含量的影响配制硒添加量不同的培养基，采用接种量10%，装液量50mL/250mL三角瓶，于30℃，200r/min培养30h。结果见图1。实验结果表明，随着硒添加量的增加，富硒酵母的生物量呈下降趋势，酵母中硒含量及硒总含量均呈上升趋势。说明安琪活性干酵母具有较强的耐硒和富硒能力，但随着硒添加量的增加会抑制酵母的生长，而在一定范围内，酵母的硒含量与发酵液中的硒浓度成正相关关系。当发酵培养基中的硒添加量≤20mg/L时，对酵母生长的抑制作用较小，同时硒含量也较

7、低；硒添加量≥30mg/L时，对酵母生长产生强烈的抑制作用，硒含量仍比较平缓的增加。但在实验中发现，当硒添加量大于20mg/L时，硒酵母已呈现明显的红色，这是因为在代谢过程中，酵母能把亚硒酸钠还原成红色单质Se，而且培养基中亚硒酸钠的浓度越大，它被还原而生成单质硒也就越多，说明酵母将无机硒转化为有机硒的能力是有一定限度的，当达到这一限度后，随着培养基中亚硒酸钠浓度的增加，[8]有机硒的含量不再增加反而会下降，而单质硒的量却增加了，这种单质硒与硒酵母混在一起，很难用物理方法分开，当硒添加量大于20mg/L时，虽然酵母的硒含量较高，但因其中混有较多的单质硒，因此实际

8、转化无机硒的量并不高，可