男性不育患者抗精子抗体检测及临床应用

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1、男性不育患者抗精子抗体检测及临床应用男性不育患者抗精子抗体检测及临床应用世界卫生组织（WHO）在不育夫妇标准检查与诊断手册中，将免疫学病因列为男性不育诊断分类之一，男性不育患者抗精子抗体（AsAb）临床检测阳性率10%〜30%。2009年对183例精液分析显示有精子凝集、精子不活动或精子畸形率高的不育患者，进行抗精子抗体检测，结果报告如下。资料与方法2010年门诊收治183例不育患者，精液分析显示精子凝集、精子不活动或精子畸形率＞30%,年龄23〜35岁，病史2~7年。方法：①手淫法采集被检者全份精液标本，置37°C水浴箱完全

2、液化，500Xg离心10分钟,备用。②蒸憾水按20:1的比例将浓缩洗涤液稀释备用，同时配制含5%小牛血清的样品稀释液。③按待检标本取相应的抗原包被微孔板，同时取3个微孔板分别作为空白对照、阴性对照、阳性对照。除阴、阳性对照孔外,每孔加样品稀释液50ul,待检精浆50ulo阴、阳性对照孔分別加阴、阳性对照液100ul混匀。用封膜覆盖反应板，置37°C温育40分钟。④用配好的洗涤液洗板4次，每次300u1/孔，每次3分钟，拍干。⑤每孔加酶结合物2滴，充分混匀后，用封膜覆盖，置37°C温育30分钟。⑥甩净孔内液体加洗涤液洗板，洗涤方

3、法同步骤4。⑦每孔加显色剂A、B各50ul,混匀后室温下避光反应10分钟。⑧每孔加终止液50u1,终止反应。⑨结果判定：以空白对照孔调零，测450nm吸光度值。P/N（待测样本0D值/阴性对照0D值）22.1为阳性。统计学处理：将所得实验数据采用SPSS11.5统计软件进行统计分析。组间比较采用t检验，方差不齐时采用t检验。结果以PV0.05为差异有统计学意义。结果183例检测样本中，AsAb阳性77例，阳性率42.1%。近年报道^[1〜3],不育患者AsAb阳性率10.2%〜32.6%,检测结果高于报道，

4、其差异有统计学意义(P<0.01)o讨论精子作为…种独特的抗原与机体免疫系统接触后，可引起自身或同种免疫反应而产生抗精子抗体，人类精子抗原分固有抗原和附着抗原，固有抗原为精子发生过程中产生的，而附着抗原为精子进入附睾或精浆吋，一些蛋口质吸附在精子膜上形成的，这两类抗原都能诱发机体产生抗精了抗体。正常情况下，由于血睾屏障的存在，机体免疫系统并不会对精子产生免疫反应，但如果生殖系统有炎症、外伤、手术等损伤了这一屏障，可导致精了或其可溶性抗原漏出并被局部吞噬细胞吞噬，进而致敏淋巴细胞发&免疫反应，从而产&抗精了抗体。对于育龄期妇夫而

5、言，一旦抗精子抗体在体内出现，就可能引起不育。抗精子抗体影响生育的主要途径有以下儿个方面：①抗精了抗体，尤其是IgM抗体可以与精子结合，导致精子的凝集，凝集的精子活动受到影响，不能与卵子结合；②抗精子抗体可以与精子的尾部发生反应，影响精子的运动；③抗精子抗体的Fc段与宫颈黏液糖蛋口结合，干扰精子穿过排卵期宫颈黏液；④在多核中性粒细胞和巨噬细胞的表面存在抗精子抗体的Fc段受体，它们结合后可以激活补体系统，从而破坏精子的膜结构和导致精子的活动丧失：⑤抗精子抗体与精了头部结合后可以干扰精卵结合，阻止精了穿透卵细胞。临床上如何判断患者

6、是否需要进行抗精子抗体检测，戴继灿对体检测的指征总结如下^[4]：①精液分析显示精了出现凝集现象、精了不活动或者精了形态异常增加；②怀疑梗阻引起精子计数下降或无精子时，抗精子抗体检测有助于诊断;③不明原因的不育;④性交后6~12小吋内宫颈黏液中出现不动或摇摆运动的精了；⑤输精管结扎后复通的患者；⑥配偶因为生育问题打算进行侵入性检查;⑦准备进行体外授精选择治疗方案前。我屮心正是选择性的进行抗精了抗体检测，因而阳性率较高。对于抗精了抗体阳性患者，治疗可选择类固醇激素约物，如强的松或甲基强的松，其机理为抑制新的抗

7、体产生和促进已经产牛的抗体退变，治疗的成功率存在个体差异，主要与抗体降解速度和类固醇激素的代谢速度有关。一般而言，类I古I醇激素使用2周后，抗体可降低到最低水平，但也有研究者认为类固醇激素可以降低顶体酶的活性,影响精卵结合能力，这些潜在的不良反应也为药物治疗带来隐患。除药物治疗外，还可以选择辅助牛殖技术进行治疗：①宫腔内人工授精(IUI):通过IUI进行治疗，可以使更多的精子避开宫颈黏液对运动的干扰到达子宫，治疗的成功率与抗精子抗体的滴度有关；②体外授精(IVF)、IVF可以使精子完全避开女性生殖道内免疫因素的干扰,在体外直接

8、与精了结合，IVF治疗成功率高于IUI,它适合女方血清或宫颈黏液中存在抗精子抗体，或精子与抗精子抗体结合比例〈50%的患者；③卵胞浆内单精了注射(ICSI),ICSI是解决抗精子抗体导致不育问题最有效的方法，ICSI可以解决各种环境中抗精了抗体的不良影响。尽管抗精了抗体影响生