利用糖蜜发酵生产丁醇菌株的分离、筛选及鉴定

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1、利用糖蜜发酵生产丁醇菌株的分离、筛选及鉴定裴建新I左文朴I庞浩I黄志民I黎贞崇I韦宇拓2黄日波「2,(1广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,南宁530007;2广西大学微生物及植物遗传工程教育部重点实验室,南宁530003)摘要:高效利用糖蜜产生丁醇的菌株是低成本生产丁醇的基础。本研究从自然环境(牛粪,沼气池,土壤)中筛选具有强利用糖蜜产生丁醇的菌株。采样通过玉米培养基富集初筛分离获得12株生产丁醇能力鮫强的菌株。用8锤度糖蜜发酵复筛有2株菌株丁醇产量较高,分别为&57g/L和&45g/L,丁醇比高达75%。将菌株分别命名为gxzp-5和gxz

2、p-9,然后对这两株发酵性能优良的菌株进行了分子鉴定,经过16SrDNA基因序列同源性分析初步鉴定都为拜氏梭菌(ClosEdiumbeijerinckM)。两菌株为下一步的菌种基因改造工作提供了研究基础,也为国内拜氏梭菌的工业应用及基础研究奠定了理论基础。关键词:糖蜜生物丁醇鉴定拜氏梭菌StrainsScreeningandIdentificationforProducingbutanolbymolasses-FermentingPeiJian-xin1ZuoWen-pu1PangHao1HuangZhi-min1LiZhen-chong1WeiYu-t

3、uo2HuangRi-bo1,2基金项目:桂科攻0992022-1,桂科转09321071,广西大学开放课题J0804,科学院基本业务费09YJ17SW05作者简介:裴建新(1982-),男,硕士,研究方向:微生物学;E-mail:peijianxin282@163.com通讯作者:黄日波,教授,博士生导师:Tel:0771-3270336;E-mail:rbhuang@163.com(1.NationalEngineeringResearchCenterforNon-foodBiorefinery,GuangxiAcademyofScience,Nan

4、ning530003,Guangxi;2.KeyLaboratoryofMicrobialandPlantGeneticEngineeringofMinistryofEducation,GuangxiUniversity,Nanning530005,Guangxi)Abstract:Inordertoobtainefficientmolasses-fermentationstrains,samplesweregotfromcowdung,methanetankandsoil,andthen12strainswerescreenedbyenrichment

5、oncornmedium,whichcaneffectivelyproducebutanol.Twostrainsre-screenedby8BXmolassescanconvertmolassesintobutanolmoreeffectivelytheyieldofwhichis8.57g/Land8.45g/Lrespectively,andtherateofbutanol/totalsolventreached75%・Thesetwostrainswerenamedgxzp-5andgxzp-9・TheywereidentifiedasClost

6、ridiumbeijerinckiithrough16SrDNAsequenceanalysis,whichcouldbeusednotonlyasorginalslrainsforfurthergenicaltenitionwork,butalsoastheorybaseforindustrialapplicationandbasicresearchofClostridiumbeijerinckiiinourcountiy•Keywords:molassesbiobutanolidentificationClostridiumbeijerinckii随

7、着石化资源的枯竭,石汕价格的不断攀升,微生物发酵生产丁醇受到了人们的普遍关注。丁醇是-种重要的有机化工原料,主要应用于溶剂、抗氧剂、增塑剂、合成药物精细化工等⑴。而在能源危机日益凸显的今天,由于丁醇具有能量密度高,亲水性低,蒸汽压低,辛烷值高等特点,被认为是最有发展潜力的新型液体燃料之一⑵。国内生产生物丁醇(ABE发酵)主要是以玉米为原料,利用丙酮丁醇梭菌(Clostridiumacetobutylicum)发酵。这个发酵过程的生产成木为每吨生物J醇8000〜1()000元人民币左右,过高的成本约束了生物丁醇作为燃料的推广使用,而其中原料成本占了总成本的

8、75%⑶。从2006年起我国已经开始限制利用粮食来生产生物能源,鼓励发展非粮的生

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