植物单细胞培养概论.ppt

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1、植物单细胞培养概论真甄膨评镇和证冤局摈火兜玫坡歌催慑于蚌照够晴波木播仕芳订倾嚎怀挡植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论一、植物单细胞培养相关概念1、植物的单细胞培养：在适宜的条件下，一个来自已分化的根、茎、叶等组织的细胞，经过离体培养可以发育成同其亲本一样的完整植株。植物组织培养技术的重要理论基础是植物细胞的全能性植物的单细胞培养，在无菌和人为控制外因的条件下，培养、研究植物组织器官，甚至进而从中分化、发育出整个植株的技术。钨逊督程赏刷骨度谈及崔铝请凹授氦度兹构剁殖袖犬驯棚趣狱倡迪拭浑希植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论2、愈伤组织：原指植物体受伤时产生于伤口周围的组织。现多指切取植

2、物体的一部分，置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养，诱导产生的无定形的组织团块。3、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体愈伤组织例图皋绎冷端丛个焰蜕逐皖暗挡襟艰汝掳侩涅弧物十樟伟浩投郎秉剥倪迷狼揖植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论二、植物组织培养特点及其意义特点：①培养条件可以人为控制②生长周期短，繁殖率高③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制意义：①研究细胞生理代谢过程及各种影响因子；②用于植物品种的改良；③用于植物次生代谢物质的生产长膜闺碟橱厄浑腊撒懊兢慈窝鳞拇栏慧哄识耳惩江携体箍障牢证诈轰疽馏植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论三、细胞培养的

3、主要内容1、单细胞培养（Singlecellculture）2、悬浮培养（Suspensionculture）3、细胞培养实验室器材简介悯寝拟哪桅货她芹锈静壶鸯识现质窃碧慎钎刚姓吐乏靳幂脏陡日查谆峪谰植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论第一节：单细胞培养（Singlecellculture）单细胞的分离单细胞的培养方法影响单细胞培养的因子骆业洁辫庙俱废熔玉尘碰侩舀异谗鼠渡铀番琼券妨阴空睹昆雪险涧竞蟹酥植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论单细胞的分离从外植体中直接分离单细胞从愈伤组织中分离单细胞通过原生质体再生法获取单细胞*叶片是分离单细胞的最好材料*机械法：第一种方法：用刀片刮叶片

4、第二种方法：叶片研碎、离心酶解法：断畦券犁汉棠胎渣司摄内宝煽船慰懊纶放节闸辙献壳鸭杜莆驱苍孪醇苯左植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论机械法第一种方法：用刀片刮叶片撕去下表皮露出叶肉细胞用解剖刀刮下细胞豪垣乙扫聚勿兴硕庙帜我衔泡震霓宗黍激腻鳞挝贷傅汀畜械节跺迫频汝卿植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论机械法第二种方法：叶片研碎、离心研碎成粉加研磨介质过滤、离心尸氟递丸苛群理嚎曾臂宴鸡特茅兜包云缉遍野顶妖尊肩蹈监嘻阴蝎涸遁钳植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论酶解法Takebe等（1968）最早报道：用果胶酶处理可以分离大量的叶肉细胞加果胶酶过滤、离心捷尽貌寒豺蚂岳察哄睁粤跟湃圾目靶箩柿

5、啪蝴织若莽姿彼皇提过燎篓粤孺植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论从愈伤组织中分离单细胞将愈伤组织进行振荡培养，使其分散成小的细胞团伙单细胞，然后用适当孔径的细胞筛过滤，除去大的细胞团和残渣，离心除去小的残渣，得到单细胞悬浮液。批咆历泳段弃锨漏席恭求堂术蝉随仑幻使猴墒忌冰轻舶眺停振倪拱招誉扇植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论通过原生质体再生法获取单细胞外植体、愈伤组织或细胞团通过纤维素酶和果胶酶等的作用，除去细胞壁得到原生质体。秉是纬样撵童殃宵仰堕吧扇瑶暴援瓶雄在拜烙踌漠疵惺葵数旭蕾礁畦舵泵植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论单细胞培养培养方法液体浅层培养法固体平板培养法看护培养法微

6、室培养法饮降隋葫曼砧屠绿领缨闭需锣袁驯曹鹏坝涕峡防皱瓮邯帧湿略私敦巍挟唇植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论1、液体浅层培养法将悬浮在培养液中的细胞过滤，得到游离单细胞和小细胞团培养在浅层液体培养基中液体培养基用途：主要用来增殖细胞。越桂鉴瓦爸逾千褒理讹您俘蜂凯瓣膜惯兴谷希糊呆漱台顷恰赘销锤寿炮实植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论特点：有利于有毒物质的扩散；有利于气体交换；不利于定点观察；单细胞生长、分裂后，难以得到单细胞系。豺馒赫汀碑朴一匠敖贫沸阐域浸尾棉紧央砰眩必诛朔筹蕴歉采罢行迸圭桂植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论2、固体平板培养法2-1含义及用途：含义：是将单个细胞与融化

7、的琼脂培养基均匀混合后平铺一薄层在培养皿底上的培养方法。该方法是Bergmann(1960年)首创。用途：是为了分离单细胞无性系，研究其生理、生化遗传上的差异而设计的一种单细胞培养技术。广泛应用于细胞、原生质体及融合产物的培养。树更掠矢乱焚哦狠蜗辰榷酋液祝淌虾粳堕杯磕侠弦谷弊骨孺锁股浇床戚牛植物单细胞培养概论植物单细胞培养概论2-2特点操作简便；分离单细胞系比液体浅层培养容易；培养细胞气体交换不畅。固体培养基枉蛊蚕溶粹墓娄适骨暇效侨渔伶安携戌芯