浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方.doc

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1、浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方马铃薯:(Solanumtuberosum)为茄科茄属作物.是全球重要的粮菜兼用作物。马铃薯具有牛长期短、产量高、适应性强、营养丰富、耐储运的特点，因此深受牛产和消费者的喜爱。但在马铃薯牛产屮普遍存在种性退化的问题，而病毒侵染是马铃薯退化的根源。由于马铃薯是无性繁殖作物，所以病毒侵染后会世代相传,危害逐年加重。H前，ttt界丄公认的解决马铃薯病毒危害，防止品种退化的有效途径是茎尖离体培养。通过茎尖离体培养培育脱毒基础苗，再通过建立合理的良种繁育体系牛产优良种薯是马铃薯高产、稳产、优质的可靠保证。一脱毒种薯繁育工艺流程马铃薯脱毒种薯繁育丁艺流程如图所乩原原种

2、杆插于訪虫网内繁苗BL图471马铃99脱毒种曹緊育工艺流程二脱毒技术2.1脱毒方法2.1.1外植体选择及处理外植体的选择途径一般有3条:①在牛长季节从田间挖取植株种植在无菌的盆土屮，温室内栽培，取其新长成枝条的芽；②从出间切取枝条，插入营养液屮牛长，取新抽牛枝条上的芽；③块茎在室内发芽，芽经热处理(38°C)2周后再取芽。另外，定期给植株喷施内吸杀菌剂，如0.1%多菌灵和0.1%链霉素的混合液，可以有效提高灭菌效果。经过上述处理之后，要比直接取自田间枝条污染少得多。再加上茎尖分牛组织又被彼此重叠的叶原基保护.只要仔细剥取，无须再进行消毒，就能得到无菌的外植体。但为保险起见，在切取外植体之

3、前，可以先进行简单的表面消毒，一般在5%次氯酸钠屮处理8〜10min即可。虽然顶芽和腋芽都能作为外植体，但顶芽的茎尖牛长要比腋芽的快，成活率也高，所以一般取顶芽作为外植体。2.1.2剥离茎尖和接种在超净台上的解剖镜(8〜40倍)下进行茎尖剥离。解剖吋必须注意使茎尖眾露的吋间越短越好.以免超净台的气流风干茎尖。在材料下垫上一•块湿润的无菌滤纸也可达到保持茎尖新鲜的H的°在解剖镜下用解剖针将叶片和叶原基剥掉，直到露出圆亮的茎尖牛长点。将带有I〜2个叶原基的茎尖切下.接种到培养基上。要注意防止交叉污染，尤其是当芽未曾进行过表面灭菌吋更要谨慎。2.1.3培养对马铃薯茎尖培养来说，MS和white

4、基本培养基都是较好的培养基，而且附加少量(0.1〜0.5mg/L)的NAA或BA或二者都加，培养效果更好。只有牛长点的极小茎尖的培养最好采用液体培养，多放在滤纸桥上培养。脳微信号:XBL-LED茎尖培养初期的最适光照强度为1000IX,4周后增加到2000lx,6周后增加到4000lxo培养温度21〜25°C,光照吋间以16h/d为宜。1个刀左右茎尖再牛成有可见小叶的小植株，保存部分原苗，准备扩繁用；另一部分用于病毒检测。茎尖培养时需要注意以下3个问题：①茎尖接种后基部无明显膨大，茎尖变绿，成绿色小点，这是激素浓度或温度偏低造成的；②接种后茎尖明显膨大，3〜5d可见淡绿色愈伤组织，这是由

5、于激素浓度或温度偏高，光照偏弱造成的。③培养基添加0.8mg/L的GA有利于茎尖的成活和促长，但不要浓度过高或作用吋间过长，否则会使茎尖不易转绿，导致叶原基迅速伸长，牛长点并不牛长，整个茎尖变褐而死。2.2脱毒效果检测马铃薯经过茎尖培养脱毒后，只有部分植株是脱病毒植株。因此，在用作脱病毒原种苗之前，必须进行病毒检测证明无病毒后才能推广。在繁殖屮还要不断重复检测，以防重新感染。常用的病毒鉴定方法有指示植物测定法、血清学方法和电子显微镜法。脳微信号：XBL-LED三脱毒苗快繁技术3.1继代培殖与牛根培养将经鉴定无毒的马铃薯脱毒苗，釆用固体与液体培养基相结合的方法进行继代增殖培养效果好。取试管

6、苗单节切段抒插在MS固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右便可发育成5〜10cm高的小植株，然后进行切段繁殖。此法速度快，每月可繁殖5〜8倍。如果多茎节的试管苗接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养，则比固体培养基牛根快，长得粗壮。便于栽植，同吋省去大量琼脂，降低了牛产成木，同吋提高了试管苗成活率。培养基可选用MS培养基，其屮的烟酸、肌醇都可以减去，琼脂浓度也可降低。在25〜28°C、光照强度3000~4000lx、连续光照的条件下，切段繁殖速度很快，一般每刀能增加7〜8倍。另夕卜，也可将1〜2cm高的苗转人MS、IAA0.1〜0.5mg/L,活性炭0.1〜0.2g/L的牛

7、根培养基屮培养，7〜10d牛根。3.2驯化移栽为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力，移植前对试管苗要进行光、温锻炼。具体方法是：移植前7d左右，将长有3〜5片叶、高2〜3cm的试管苗瓶摆放在温室内的驯化畦内，畦内浇丄水，畦上方半遮阳进行驯化，以防止强光、高温灼伤试管苗和维持试管苗周围的温度。移至温室的试管苗，尽管仍处于封口的瓶内，但由于封口膜透气性好，瓶内的湿度下降，使试管苗的茎叶变破，加上光照增强，茎秆变粗，叶片肥厚浓绿，有效地