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1、二、志贺氏菌的检验志贺氏菌的检验志贺氏菌属于肠杆菌科志贺氏菌属,根据生化特性不同将其分为四个群:A群--痢疾志贺氏菌;B群----福氏志贺氏菌C群--鲍氏志贺氏菌;D群----宋内氏志贺氏菌志贺氏菌属的细菌统称痢疾杆菌.临床上能引起痢疾症状的病原微生物很多,如志贺氏菌属、沙门氏菌属、变形杆菌属、埃希氏菌属等,还有阿米巴原虫及病毒等。其中以志贺氏菌属引起的细菌性痢疾最为常见,是细菌性痢疾的主要病原菌。通过食品和饮水传播,引起人的疾病。人对志贺氏菌的易感性很高,人是它的唯一宿主。所以在食物和饮用水的卫生检验时,常以是否含有志贺氏菌作为指标。志贺氏菌的检验一、实验目的了解志

2、贺氏菌生物学特性及原理掌握志贺氏菌检验方法检验志贺氏菌的方法很多,但食品卫生微生物检验具有法规性,检验必须采用国家标准规定的方法。近年来发展了许多快速检验的新方法,如技术等。我们下面介绍的方法即是国家标准规定的方法。要弄清检验原理,首先需要了解志贺氏菌的生物学特性。志贺氏菌的检验二、志贺氏菌的生物学特性1、形态与染色:革兰氏阴性无芽胞杆菌,无荚膜,无鞭毛,不运动,有菌毛。革兰氏阴性鲍氏志贺菌志贺氏菌的菌毛志贺氏菌扫描电镜照片志贺氏菌扫描电镜照片志贺氏菌的透射电镜照片二、志贺氏菌的生物学特性2、志贺氏菌的培养特性:需氧或兼性厌氧。营养要求不高,能在普通培养基上生长,最适

3、温度为37℃,最适pH为6.4-7.8。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐,直径约2mm,宋内氏菌菌落一般较大,较不透明,并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长,一般不形成沉淀,无菌膜形成。菌落形态学关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等,都是区分细菌的重要手段。福氏志贺氏菌的菌落特征宋内志贺菌乳糖迟发酵菌株在麦康凯平板上的菌落特征细菌在肉汤培养基中的生长均匀浑浊生长是什么意思?二、志贺氏菌的生物学特性3、志贺氏菌的生化特性:本菌属都能分解葡萄糖,产酸不产气。大多不发酵乳糖,仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛

4、基质产生不定,甲基红阳性,VP试验阴性,不分解尿素,不产生H2S。与肠杆菌科各属细菌相比较,志贺氏菌的主要鉴别特征为不运动,对各种糖的利用能力较差,并且在含糖的培养基内一般不形成可见气体。根据生化反应可进行初步分类。不发酵乳糖和发酵乳糖菌落二、志贺氏菌的生物学特性4、志贺氏菌的抗原构造与分型:志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原(O)及表面抗原(K)组成。主要抗原有三种:型特异性抗原、群特异性抗原、表面抗原(K抗原)。根据抗原构造的不同,按最新国际分类法,将本属细菌分为四个群、39个血清型(包括亚型)附:志贺氏菌抗原分类。附:志贺氏菌抗原分类抗原构造与分型:志贺氏菌属细

5、菌的抗原结构由菌体抗原(O)及表面抗原(K)组成。主要抗原有三种:型特异性抗原:型多糖抗原为菌体抗原的一种,是光滑型菌株所含有的重要抗原。当菌株变为粗糙型时,此抗原也常随之消失,各菌型所含的型抗原不同,可用于区别菌种的型别。群特异性抗原:为光滑型菌株的次要抗原,也是菌体抗原的一种。特异性较低,常在数种近似的菌内出现。在福氏菌株中,由于所含群抗原不同,可将某些菌型分为多种亚型,如福氏菌2型,根据群抗原不同,可分成2a、2b两个亚型。表面抗原(K抗原):在新分离的某些菌株菌体表面含有此种抗原。不耐热,加热100℃1小时即被破坏。具有此种抗原的菌株,可阻止菌体抗原与相应免疫

6、血清发生凝集。志贺氏菌属的四个群根据抗原构造的不同,按最新国际分类法,将本属细菌分为四个群、39个血清型(包括亚型)A群:也称志贺氏菌群,有10个血清型。不发酵甘露醇,无鸟氨酸脱羧酶,与其他各群细菌无血清学联系。B群:也称福氏菌群,已有13个血清型(包括亚型和变种)。最近又发现3个亚型(1c、4c、5b)。发酵甘露醇,无鸟氨酸脱羧酶。抗原结构较复杂,各型间有交叉凝集。每一福氏菌型具有二种抗原,即型特异性抗原和群抗原,前者只存在于同型菌株中,后者有许多种,存在于福氏各菌型中。例如福氏1b型除含有1型特异性抗原外,尚含有4、6群抗原。C群:也称鲍氏菌群,有15个血清型,分

7、解甘露醇,无鸟氨酸脱羧酶。各型内无交叉凝集。D群:也称宋内氏菌群,仅有一个血清型。分解甘露醇,有鸟氨酸脱羧酶,迟缓发酵乳糖。有Ⅰ(S相光滑菌落)、Ⅱ相(R粗糙菌落)之分。福氏志贺菌在HE琼脂平板上的菌落特征蓝绿色大肠埃希菌红色较大二、志贺氏菌的生物学特性5、志贺氏菌的抵抗力:志贺氏菌属与沙门氏菌属及其他肠道杆菌相比,对理化因素抵抗力较低,对酸较敏感,必须使用含有缓冲剂的培养基。在外界环境中的生存力,以宋内氏最强,福氏菌次之,痢疾志贺氏菌最弱。一般在潮湿土壤中能存活34天,37℃水中存活20天,在粪便内(室温)存活11天。日光直接照射30分钟,56-6

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