沙门氏菌和志贺氏菌的检测.ppt

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1、沙门氏菌和志贺菌检测熊长辉肠道感染细菌是通过粪-口传播途径进行传播的一类细菌。主要包括肠杆菌科细菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、幽门螺杆菌等。肠杆菌科中与医学有关的包括：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、变形杆菌属等。概述肠道感染细菌肠杆菌科共同特性相似的形态染色简单的培养条件活泼的生化反应G-小杆菌，有鞭毛(痢疾杆菌外)菌毛，某些有荚膜，无芽胞需氧或兼性厌氧，营养要求不高致病菌非致病菌乳糖发酵实验阴性阳性SS琼脂培养基（含胆盐、乳糖、中性红等）4、抗原构造复杂鞭毛抗原（H）IgG菌体抗原（O）IgMK或Vi抗原溶原性转换生化反应性变异通过耐药性变异毒力性变异转导接合5、抵抗力：不强6、易变异

2、：通过引起沙门菌检测美国细菌学家Salmon与Smith于1885年分离出猪霍乱沙门菌。1990年为纪念Salmon，定名这类细菌为沙门菌属。沙门菌是肠杆菌科的重要致病菌。包括伤寒、副伤寒甲、乙、丙型，肠炎，鼠伤寒等沙门菌，现今已发现2324个血清型。在世界各地的食物中毒中，沙门菌食物中毒常占首位或第二位。规定在药品和食品中不得检出沙门菌。美国每年报道病例45000个左右，实际数量可能多达200-300万。伤寒每年400-500例。生物学特性1.形态两端钝圆的革兰氏阴性杆菌，（0.4-0.9）µm×(1-3)µm，无芽孢，周生鞭毛，一般无荚膜，少数有包膜。光滑型的细菌大小均匀，粗糙型则

3、大小不一，长短不一。培养和生化反应兼性厌氧，最适生长温度35～37℃，最适生长PH为6.8～7.8.本菌属对营养的要求不高，在普通营养琼脂上生长的菌落为圆形、光滑、湿润，半透明，边缘整齐的菌落，有时可出现粗糙型的菌落。在肠道选择性培养基上菌落小至中等，透明或半透明，乳糖不发酵，与志贺菌的菌落相似，有些能产生硫化氢的菌株，在SS琼脂上形成中心黑色的菌落。抗原构造菌体抗原（o）：不被乙醇、0.1%石炭酸所破坏。与特异性抗血清呈颗粒状凝集，形成慢，不易摇散。现已知有50多种，多数沙门菌含有两种以上的O抗原，有的O抗原是一种菌独有的，有的是几种菌共有的，凡含有共同特异性抗原成分的血清型归为一个

4、群，可将沙门菌化分为42群，按A-Z排列，Z以后的顺序以O51-O67表示。引起人类沙门菌病的95%以上都在A-F6个群内。H抗原：为不稳定的蛋白质抗原，加热或用乙醇处理均被破坏。沙门菌H抗原有两个相,第一相特异性较高称特异相,用小写英文字母a、b、c表示，直至z，z以衙用z加阿拉伯数字表示，如z1、z2、z3等，第二相抗原为沙门菌共有，称非特异相，直接用1、2、3表示。同时有第一相和第二相H抗原的细菌称为双相菌，仅有一相者称单相菌。H抗原是定型的依据，其刺激机体产生的抗体以IgG为主，与相应的抗血清呈絮状反应。表面抗原：在沙门菌属中已被证实的表面抗原有Vi抗原、M抗原、5抗原三种Vi

5、抗原：是一种不耐热的酸性多糖聚合物，加热60℃30分钟或经石炭酸处理即被破坏，经人工培养基传代后也易失去。新分离的伤寒及副伤寒沙门菌常带有此抗原。Vi抗原位于菌体的最表层，有抗吞噬及保护细菌免受相应抗体和补体的溶菌作用。Vi抗原存在时可阻止O抗原与相应抗体发生凝集，故在沙门血清学鉴定时应加以注意，需事先加热破坏Vi抗原之后，O抗原才得以与相应的O抗血清发生凝集。带Vi抗原的沙门菌亦可用Vi噬菌体进行分型，有助于流行病学调查和追踪传染源。M抗原：粘液抗原，在菌型鉴定上无特殊意义。5抗原：4.抵抗力不强，加热60℃1h，或65℃15~20min即被杀死。在水中能存活2~3周，在粪便中可存活

6、1~2月。对胆盐和煌绿等染料有抵抗力。因此可用于制备沙门菌的选择培养基。5.变异性S-R变异:自临床标本初次分离的菌株一般都是光滑型，经人工培养，传代后可逐渐变民粗糙型菌落。此时菌体表面的特异多糖抗原丧失，在生理盐水中可出现自凝。H-O变异：是指有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异位相变异：具有双相H抗原的沙门菌变成只有其中某一相的单相菌，称位相变异。在沙门菌血清学分型时，如遇到单相菌，特别是只有第Ⅱ相（非特异相）抗原时，需反复分离和诱导出第Ⅰ相（特异相）抗原方可作出鉴定。V-W变异：是指沙门菌失去Vi抗原的变异。初次分离得到的具有Vi抗原、O抗原不凝集的沙门菌称V型菌；Vi抗原部分丧失，与O

7、抗原血清发生凝集又可与Vi抗血清凝集者称VW型菌。Vi抗原完全丧失，与O抗原血清发生凝集又与Vi抗血清不凝集者称W型菌。V-W变异的过程是V型菌经人工培养，逐渐丧失部分Vi抗原而成为VW型，进而丧失全部Vi抗原而成为W型菌。二、致病性与免疫性致病物质：1.侵袭力：菌毛帮助细菌黏附肠粘膜上皮细胞Vi抗原可阻断相应抗体和补体的作用，抵抗吞噬细胞的吞噬作用。内毒素：可激活补体系统、吸引白细胞，引起肠道炎症，吸收入血可引起全身中毒，发热、白细胞减少、中