食品卫生微生物学检验-1.ppt

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1、食品卫生微生物学检验菌落总数测定大肠菌群测定粪大肠菌群测定实验分组（40人）俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。按从前到后从左到右顺序，编为1～5，6～10。两个小组编为一个大组：1+2,4+5,6+7,9+10,3+8。甲乙4丙丁甲乙3丙丁甲乙2丙丁甲乙1丙丁甲乙5丙丁甲乙8丙丁甲乙7丙丁甲乙6丙丁甲乙10丙丁甲乙9丙丁讲台左右食品卫生微生物学检验一实验准备培养基制备高压蒸汽灭菌器材预算刻度吸管的无菌操作方法培养基的制备（40人份）组号培养基称量g水量ml瓶数分装量ml★1+2+3+4乳糖胆盐发酵培养基8.752504瓶105营养琼脂51308瓶6氯化钠2225

2、9瓶6氯化钠0.91009瓶7、8伊红美蓝10.83003瓶7、8EC肉汤7.42001瓶5★加热时常摇动，煮至完全溶解→分装于带有倒放小倒管的试管中→试管筐内→罩上硫酸纸、牛皮纸，扎好→高压蒸汽灭菌15分钟1500W电炉▲安全警告1.电源插塞与电炉插孔接触良好→插头插入插座。2.如果培养基潽了，流入电炉；必须立即切断电源、拔除插头；以免触电，危及生命！东西两侧边台各一个电炉，每个电炉可同时放置3个500ml锥形瓶进行加热。培养基隔石棉网煮沸，使完全溶解。加热时,常摇动。沸腾时，不能摇动！称量纸置于左盘，游码移至标尺左端“0”点位置上，指针应对准中线，取得平衡。否则将杠杆两

3、端的调整螺母旋动调节平衡。秤物时“左物右码”，砝码在右盘，物品在左盘上，尽可能放在秤盘中心。天平保持干燥、清洁。用过的药勺要清洗干净。标准的分类根据适用范围分为国家标准、行业标准、地方标准和企业标准四级。根据法律的约束性分为强制性标准和推荐性标准。标准号:代号+序号+年份组成GB/T4789.2-2003代号GB表示国家标准，T指推荐性标准。序号4789指食品卫生微生物学检验，点2指该检验的第二部分（菌落总数测定）。2003是指该标准制定或修改的年份。食品卫生标准中的微生物指标指示菌概念:在常规安全卫生监测中，用以指示检样卫生状况及安全性的指示性微生物。项目：菌落总数、大肠

4、菌群、耐热大肠菌群、总大肠菌群。食源性致病菌及其毒素沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、单核细胞增生李斯特菌、阪崎肠杆菌、空肠弯曲菌、致病性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌等。霉菌、酵母菌及其毒素黄曲霉毒素B1、B2等。菌落总数菌落总数是指被检样品的单位重量(g)、容积(ml)、表面积(cm2)或体积(m3)内，所含有的能在某种固体培养基上,经一定条件、一定时间培养后长出的菌落数量。包括细菌、霉菌和酵母菌的菌落总数。菌落总数所用培养基、培养温度、培养时间的差异会影响到菌落计数的结果。因此，必须严格遵照国家规定的检验方法中的操作条件，以获得

5、始终可比的结果。菌落总数的食品卫生意义：判定检样被微生物污染的程度，预测食品存放的期限。大肠菌群大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而是指具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，是评价食品卫生质量的重要指标之一。大肠菌群在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯菌属和肠杆菌属等四个属的细菌。大肠菌群是作为粪便污染指示菌提出来的，该菌群的检出，可推测检样中存在着肠道致病菌污染的可能性。大肠菌群的食品卫生意义：作为

6、粪便污染食品的指示菌，作为肠道致病菌污染食品的指示菌。大肠菌群属代表种致病性埃希菌属(Escherichia）大肠埃希菌(E.coli)肠道外感染，急性腹泻。枸橼酸杆菌属(Citrobacter)弗劳地枸橼酸杆菌(C.freundii)条件致病菌，引起继发性感染。克雷伯菌属(Klebsiella)肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)肺炎，泌尿系、创伤感染、败血症等。肠杆菌属(Enterobacter)产气杆菌(E.aerogenes)很少引起原发性感染。实验预算编写实验预算必须仔细阅读操作步骤，确认器材。例如：P107.操作步骤7.1.1“以无菌操作将检样25g(ml)

7、剪碎放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液灭菌玻璃瓶内……。”取“25ml”联想到10ml无菌刻度吸管和洗牙球，无菌吸管应该怎样包装灭菌？“剪碎”固体样品需要无菌剪刀，如果是液体检品则不需要。“225ml灭菌生理盐水”，应该装在250ml的盐水瓶里，怎样配制生理盐水？需要什么物品和器材？考虑问题应该周到，设备、材料准备齐全，确保实验顺利进行。器材准备1.冰箱：0～4℃2.恒温培养箱：35～37℃3.恒温水浴箱：45～47℃4.灭菌1ml刻度吸管：3支×10组×2倍5.灭菌10ml刻度吸管：2支×10组×2倍6.