猪传染性胃肠炎病毒M蛋白的表达与抗体制备.pdf

《猪传染性胃肠炎病毒M蛋白的表达与抗体制备.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、第45卷第4期东北农业大学学报45(4)：83~872014年4月JournalofNortheastAgriculturalUniversityApril2014网络出版时间2014—4—2113：25：02【URL]http：／／www．cnki．net／kems／detail／23．1391．S．20140421．1325．030．html猪传染性胃肠炎病毒M蛋白的表达与抗体制备任晓峰，邹昊，孙雪娇(东北农业大学动物医学学院，哈尔滨150030)摘要：文章表达猪传染性胃肠炎病毒TGEVM基因，制备抗M蛋白多克隆抗体。扩

2、增的基因~．BarnHI和EcoRI双酶切后克隆到原核表达载体PGEX一6P一1上，构建重组表达质粒PGEX一6P一1-TGEV—M，经IPTG诱导，获得以包含体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白作为免疫原免疫大白兔制备兔抗TGEV—M抗体，进行效价测定及生物活性检测。结果表明，多抗效价迭h262144；间接ELISA和间接免疫荧光试验说明，此多抗可与TGEV—M重组蛋白72．TGEV发生抗原抗体反应。此多抗可作为鉴别诊断试剂将TGEVAK众多猪源病毒中区分出来。关键词：猪传染性胃肠炎病毒；原核表达；抗体制备；鉴别诊断中图分类号

3、：$853文献标志码：A文章编号：1005—9369(2014)04—0083～05任晓峰，邹昊，孙雪娇．猪传染性胃肠炎病毒M蛋白的表达与抗体制备[J】．东北农业大学学报，2014，45(4)：83—87．RenXiaofeng，ZouHao，SunXuejiao．Expressionandpolyclonalantibodiespreparationofporcinetransmissiblegastroen—teritisvirusMprotein[J]．JournalofNortheastAgriculturalUni

4、versity,2014，45(4)：83-87．(inChinesewithEnglishabstract)Expressionandpolyclonalantibodiespreparationofporcinetransmis—siblegastroenteritisvirusMprotein／RENXiaofeng，ZOUHao，SUNXuejiao(SchoolofVeterinaryMedicine，NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030，China)Abstra

5、ct：TheaimofthisstudywastoexpressMgeneofporcinetransmissiblegastroenteritisvirus(TGEV)aswellaspreparationofitsspecificpolyclonalantibodies．TheamplifiedMgenewasinse~edintotheBarnHI-EcoRIsiteofaprokaryoticexpressionvectorPGEX-6P一1，resultinginarecombinantplasmidPGEX-6P

6、-1-TGEV-MfollowedbyexpressioninE．colirossta．TherecombinantproteinwasexpressedintheforrT1ofinclusionbodies．whichwaspudfiedandusedasimmunogentogeneraterabbitanti-Mpolyclonalantibody．IndirectELISAanalysisshowedthatthetiterofthepolyclonalantibodywasapproximately1：26214

7、4．IndectimmunofluorescenceshowedthatthepolyclonalantibodycouldspecificallybindtoTGEV．Theantibodycouldbeusedasadifferentialdiadnosisreagents．distinguishedTGEVfr0mmanyotherpigsourcevirus．Keywords：TGEV；prokaryoticexpression；antibodyperparation；differentialdiagnosis猪传染

8、性胃肠炎(Porcinetransmissiblegastro．泻、呕吐和脱水。虽然不同年龄和不同品种猪对enteritis)是一种猪高度接触性传染性疾病，可导致本病都易感，但猪5周龄以上很少死亡，多成僵哺乳仔猪100％致死率【l】。临床症状包括急性腹猪，饲料报酬低p。病毒包含四个结构蛋白