基因工程基础知识填空.doc

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1、专题一基因工程1.1DNA重组技术的基本工具一、基因工程的基本概念1.概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过_____________和___________等技术，赋予生物以新的__________，从而创造出更符合人们需要的新的__________和___________。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做_________________。«2.基本原理：______________«3.理论基础(1)不同生物的基因可以拼接的结构基础——细胞生物的遗传物质都是_______，都是以_____________为基本单位构成的双链大分子。(2)目的

2、基因转入后可以表达的基础——所有生物共用一套__________。(3)生物遗传信息的表达都遵循_________。««4.优点(1)目的性强，能_______的改造生物的性状。(2)克服________________的障碍。二、限制性核酸内切酶——分子手术刀1.简称：__________。2.来源：主要是从__________中分离纯化而来。«3.功能特点：特异性，即识别双链DNA分子某种特定__________，并且使每一条链中____________的两个核苷酸之间的_________断开。4.酶切结果：_______末端和_______末端。画出EcoRⅠ酶切后的结果：↓GAATTC

3、CTTAAG↑三、DNA连接酶——“分子缝合针”«1.作用实质：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的________。2.作用前提：两个DNA分子必须含有_________。3.种类(1)E·coliDNA连接酶①来源：___________②功能：只能连接___________(2)T4DNA连接酶①来源：____________②功能：既可以连接___________，又可以连接_________，但连接_________时效率比较低。«【拓展】比较DNA连接酶与DNA聚合酶DNA连接酶DNA聚合酶作用实质都是催化两个核苷酸之间形成_______是否需模板__

4、____________连接DNA链____链____链作用过程在两个DNA片段之间形成__________将_________加到已存在的核苷酸链上，形成____________作用结果将两个DNA片段连接成__________合成___________四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”«1.基因工程中最常用的载体——_______(1)来源：________等微生物(2)结构：裸露的、结构简单、独立于___________之外，并具有____________的___________分子。«2.基因的载体必须具备的条件(1)有______________个限制酶切割位点，供外源DN

5、A片段（基因）插入其中。(2)能在宿主细胞内_________，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行________。(3)有特殊的___________，如四环素抗性基因等，供重组DNA的鉴定和选择。(4)必须是______的，不会对受体细胞有害。(5)_______适合，以便提取和在体外进行操作。3.载体的种类：除质粒外，还有____________、__________________等。4.在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过_________的。1.2基因工程的基本操作程序«一、基因工程的基本操作程序1._____________的获取。2.

6、_____________的构建。3.将目的基因_____________。4.目的基因的_____________。二、目的基因的获取1.目的基因主要是_________的结构基因。2．获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因①基因文库概念：将含有某种生物不同基因的许多__________，导入_______的群体中储存，各个_______分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。«②基因文库分类：可分为______文库和________文库(如cDNA文库)。(2)利用PCR技术扩增目的基因①PCR技术是_____________的缩写。PCR是一项在生物体外__________

7、___的核酸合成技术。«②PCR技术的原理：DNA的_________。③PCR扩增的前提：要有一段已知目的基因的_______，以便根据这一序列合成引物。«④PCR扩增的条件：_____、_____(目的基因)，原料——_______________(即dCTP、dATP、dGTP、dTTP)，耐高温的__________酶(Taq酶)。⑤PCR扩增的过程a.变性：加热到90-95℃，DNA受热