枸杞组培快速繁殖技术研究.docx

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1、枸杞组培快速繁殖技术研究①本文通过对“宁杞2号”枸杞离体组织培养的研究,进行了从生芽诱导,试管母本的建立,嫩梢增殖,生根状况分析及其移栽等方面的探讨,进而探索了组培快速繁殖以及生产上适用的组培技术,结果表明:改良MS+BA0.2+KT0.3+NAA0.5和改良MS+BA0.75+NAA1+IBA0.1交替使用,可加快增殖速度:以较矩的根系移栽试管苗,既省工、省力,又能提高成活率,从而确立了一套较为理想的快速繁殖体系,为大规模工厂化育苗提供了可靠依据②选用“宁杞2号”离体组织进行了愈伤组织诱导和生根状况的研究.筛选出了适宜的愈

2、伤组织诱导和生根的培养基.结呆表明,最适的愈伤组织诱导培养基为I/2MS+BAI.Omg/L+NAAI.Omg/L,最适的生根培养基是;I/2N4S+NAA0.6mg/L+IBAO.2mg/L.③本试验以枸杞嫩枝及顶芽作外植体进行组织培养。结果表明,不定芽诱导用MS+6-BAI.Omg/L+NAAO.lmg/L;增殖培养基以MS+6-BAO.5mg/L+IBAI.Omg/L较佳;生根培养基为1/2MS(大量元索减半,其它成分不变)+IBAO.lmg/L+活性碳0.1%。④植物名称:宁夏枸杞(Lyciumbarbarum)材料

3、类别:多年生植株上当年萌生出的嫩枝茎尖。培养条件:基本培养基为MS。长芽培养基屮的激索成分为(毫克/升):①IAA0.5KT1,②IAA05BA1。戏糖浓度为3%。生根培养基成分为l/2MS(大最元索减半),附加Z102NAA0.4,裁糖浓度2%。培养温度25〜30°C,自然光照。@MS和MS(l/2大戢、微最元索全最)培养基均适于枸杞的培养、芽增殖和发根.在培养基的附加成分屮激索的调节是垂要的.激索以IBA浓度在0、1.1X10・6mol/L均适其培养,但以IBA的浓度为5.5XIO-7mol/L效果故住,在有机成份中VB

4、I的含量对发根有明显的促进作用.微最全最对枸杞的发根是必盂的.MS(l/2大量、微最元素全最)+VB12.96X10-5mol/L+IBA5.5XIO-7inol/L(K他有机成分常最)是枸杞芽增殖与发根同步的最佳培养基.⑥枸杞属植物(LyciumhaminifoliumMill)花粉粒发育成胚和植株的形成已有报导。本文报导枸杞叶外植体的愈伤组织诱导及其植株的再生。从未开花植株上摘取无病虫害的叶片作材料,先用流水冲洗除去尘土,然后在70%的酒粘•中浸20秒左右,再在含力分之二昇汞和5%安替福民的溶液中消毒4〜5分钟(消毒时间

5、不能过长,以免伤害叶片)。用无菌水淋洗3〜5次后,在无菌条件下将叶片横切成I厘米庄右的切段,接种在Murashige和Skoog培养基上,培养基附加激动素(K)2.0,U引味乙酸(IAA)2.0或K4.0JAA枸杞髓组织离体培养及高频率植株再生的研究*曹有龙陈放罗青曲琳摘要:枸杞髓组织在4种MS培养基上都能诱导出愈伤组织,诱导率53.7%〜100%。在培养基MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L获得的愈伤组织,呈颗粒状,分散性能好,胚性细胞多。将其转移到MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L的分化培

6、养基上获得大量绿色小芽,小芽在MS+6-BA0.2mg/L的培养基上得到快速繁殖,繁殖系数50〜150株/芽•月。丛生芽在MS+NAA0.2吨/L的培养基上形成完整植株。关键词:枸杞;髓组织;离体培养;植株再生枸杞(LyciumbarbarumL.)是重要的药用植物,多年来,国内外科技工作者十分重视枸杞的组织培养,己有用叶片、花药、下胚轴、茎端及幼嫩子房为材料进行组织培养分化出植株的(咗3),我们在此基础丄,以枸杞髓组织为试验材料进行组织培养,获得了再生植株,为枸杞细胞突变体的筛选、细胞悬浮培养、原生质分离、细胞杂交、基因转

7、移的研究提供依据。1材料和方法1.1试验材料供试材料为宁夏农科院枸杞研究所培育的高产优质枸杞新站种——宁杞1号。1.2.1愈伤组织的诱导取为年生长的明显分化成髓组织的枝条,摘除叶子、侧芽和带有分生组织的顶端100mm,把外植体的切端離熔蜡封着伤口,然后浸入70%酒精中20s,再转入0.l%HgCl2溶液中,经过8〜10min后,用无菌水冲洗3遍,最后以吸水纸吸干,从茎的两端各切除10mm,余下部分切成20晰的小段,用无菌银子夹着茎的切段,用瓶塞打孔器从切段屮取出圆柱体髓组织,并将其转移到90帧的无菌培养皿屮,用解剖刀切成2—

8、3mm厚的小圆片,接种到4种含不同激素的MS固体培养基上诱导愈伤纽织发生。1.2.2愈伤组织的继代培养在卩2培养基屮加入500mg/L的水解酪蛋片作为继代培养的培养基。挑选色泽鲜艳、生长迅速的愈伤组织进行继代培养,每次20d,2〜3次继代后,出现疏松颗粒状胚性愈伤组织,选择颗粒较细的愈伤组

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