细菌和酵母的粉剂培养基.doc

细菌和酵母的粉剂培养基.doc

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1、蛋白酶抑制剂分类和应用在分离蛋口时,纽织或细胞裂解液屮充满「來自溶幅体的幅,并H原來无活性的蛋口晦原被充分激火,开始消化其周用的蛋口质.为避免此因索,蛋口酶抑制剂必须被加入在缓冲液内以阻止蛋口稱对细胞组织的消化作用•來白哺乳类动物,植物,得菌或细菌的组织,蛋口酶成分是不同的,并根据机体状态的发展蛋口嗨也可以发生变化•哺乳类动物组织分离时比细菌或其它组织分离时更需要应用蛋口悔抑制剂使组织细胞受到完全的保护.因此,在各种蛋白分离时,在各种蛋白电泳时蛋白酶抑制剂的适当选用就成了很重要的因素。蛋白酶功能:涉及到许多细胞内

2、和细胞外的过程:o食物蛋白在消化道的消化O激活无活性酶原和多肽激索/神经转移介质的释放O调节血凝物质和纤维索O内源性和外源性蛋门的细胞内消化O跨膜的蛋白转移O微生物对生物体攻lli•,通过释放蛋门酶的导致毒性增加蛋白酶分类:根据催化中心结构的不同蛋M可分为4类:I.丝氨酸蛋口悔在其活性中心含有丝氨酸和组氨酸,如:糜蛋口酶,弹性蛋口悔,血纤维蛋口溶悔,凝血酶,枯草杆菌蛋白酶,胰酶Chymotrypsin,Elastase,Plasmin,Subtilisin,Thrombin,Trypsin2.半胱氨酸蛋白酶(别名

3、:硫醇或SH蛋白爾)在其催化中心含有半胱氨酸,如:Calpain.组织蛋白酶B,C和L,和木瓜蛋白酶3天(门)冬氨酸蛋白酶(竣基蛋口酶)在其活化屮心含有天(门)冬氨酸,如:组织蛋白酶D,木瓜蛋口酶,肾素4.金属蛋白旃含有金属离子,即:锌2+在其催化屮心,如氨基肽陋,竣基蛋白旃A和B,嗜热菌蛋口酶机体防止蛋白酶破坏作用几种可能性:・腮在特殊囊性小泡的分配(溶晦体,包涵体)•内源性蛋口IW抑制剂(如:Aprotinin,抗凝血晦,抗胰晦)SERVA6种蛋白酶抑制剂鸡尾酒的作用:>SERVA提供6种不同的蛋白酹抑制剂鸡

4、尾酒,用于分离纯化各种组织的蛋白,多肽的故佳选择>蛋口酚抑制剂混合物G含有5种水溶性的抑制剂用于抗丝氨酸半胱氨酸-和金属蛋口陋作用,并且是常用选择的鸡尾酒,应当避免同时使用有机体溶剂>蛋门酹抑制剂混合物HP含有4种水溶性抑制剂用于抗丝氨酸-,半胱氨酸蛋门酚作用,并H有效地用于分离和提取重组蛋白,避免金属螯合物。>蛋口酶抑制剂混合物M含有6种不同的抑制剂用于抗丝氨酸■,半胱氨酸和天(门)冬氨酸酶以及金属蛋白酶作用,并用于哺乳动物组织的蛋白分离。>蛋口悔抑制剂混合物P含羽6种不同的抑制剂用于抗丝氨酸•,半胱氨酸和天(

5、门)冬氨酸嗨以及金属蛋口酶作用。此被推荐用于从植物來源的蛋白分离>蛋匚I酹抑制剂混合物FY含有4种不同的抑制剂用于抗丝氨酸-,半胱氨酸,天(门)冬氨酸蚩和金属蛋白酶作用。用于从酵母和其它真菌來源的蛋白制备。>蛋口酶抑制剂混合物B含有5种不同的抑制剂用于抗丝氨酸•,半胱氨酸,天(门)冬氨酸和金属蛋口酹作用。尤其应用于在细菌提取蛋白。产品包装:所仃混合物为冻干粉剂•溶解在1ml水或DMSO浓度100x,足够用于100ml组织提取物每种抑制剂混合物的成分列表如下:成份混合G39101混合M39102混合P39103混合

6、FY39104混合B39105混合HP39106AEBSF++++++Aprotinin++■■■+Bestatin■++■+■E-64++++++Leupeptin+++■■+PepstatinA■++++■1,1O-Phenanthroline■-++■■EDTA・Na2-salt+■■-+■注:>AEBSF(PEFABLOCSC)和Aprotinin是丝氨酸蛋【I陆的抑制剂>苯丁抑制索(Bestatin)是氨基肽悔的抑制剂>E-64是半胱氨酸蛋白酎的抑制剂>Leupeptin是丝氨酸和半胱氨酸蛋

7、j酚的抑制

8、剂>PepstalinA是天门冬氨酸蛋白酶的抑制剂>EDTA和IJO-Phcnanthrolinc是金属蛋口酶抑制剂蛋白酶抑制剂表.以下表显示了竞争者产品与SERVA蛋白酶抑制剂在应用或成分的比校SERVA混合G39101混合M39102混合P39103混合FY39104混合B39105混合HP39106S公司P2714P8340P9599P8215P8465P8849R公司Complete■■■■CompleteEDTA-freeC公司539131539134■539136539132539137蛋白酶抑制剂特

9、征:>SERVA捉供了全面的高纯度的川于4组蛋门酶(丝氨酸■,半胱氨酸和天(门)冬氨酸蛋门酶和金属蛋门酶)抑制剂的产品线>以下应用表显示适用•丁•不同领域抑制剂特征使用>产品线正在伸展>贵门酶抑制剂的生产在制备屮>100多篇文献可查阅蛋白酶抑制剂应用范畴:>细胞调节过程的研究(如老年痴呆症/肿瘤研究)>抗体,腮在诊断系统蛋白降解的抑制(如:诊断试剂盒)>为了避免在细胞裂解

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