确定和选择配方ppt课件.pptx

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1、第一部分微生物培养技术实验一培养基（medium,media,culturemedia）的制备1实验一培养基的制备技术1.前期准备:1）确定和选择配方-MSM;LB细菌—真菌—放线菌—2实验一培养基的制备技术培养基（medium,media,culturemedia）的制备1.前期准备:2）准备试剂,器皿和设备等；①常用试剂等材料:基本试剂:牛肉膏；蛋白胨；琼脂；NaCl；pH试纸；HCl和NaCl调整pH使用商品化干燥培养基：营养琼脂，细菌培养基等②玻璃器皿等试管；锥瓶；烧杯；培养皿；量筒；玻棒；漏斗；铁支架；自制棉塞（纱布，棉花，线）；角

2、匙；标签纸或者记号笔；牛皮纸(或者报纸)；锅（配置培养基，处理污染物等）；火柴(打火机)；接种环；③仪器等天平;电炉（电磁炉）；高压蒸汽灭菌器(锅)；电烘箱（干热灭菌箱）；培养箱（后期培养时使用）；恒温水浴箱（培养基恒温）等；3实验一培养基的制备技术2.基本流程(1)自行配置培养基按照配方称取药品↓调pHpH7.2-7.4;用NaOH↓分装按照规定量装入容器，例如试管，三角瓶，加棉塞(自己做）↓包扎牛皮纸（报纸等），线绳，橡皮筋等↓灭菌↓分装到培养皿、试管、小三角瓶↓摆斜面（试管）↓无菌检查/存放备用4实验一培养基的制备技术3灭菌1）高压蒸汽

3、灭菌器(锅)；适用范围：配置的培养基，制备无菌水等的灭菌；使用条件:恒温121.3℃，维持20min;注意事项：高压容器注意安全操作；开始检查水位和密封圈；升至100℃，关掉出气阀门。5实验一培养基的制备技术3灭菌2）干热灭菌（电烘箱）；适用范围;玻璃器皿耐热物体的灭菌;使用条件:恒温160℃，维持2hr;恒温170℃,维持1hr注意事项：高温设备，注意安全操作；6实验一培养基的制备技术4分装倒平板过程：制备固体培养基；培养基冷却到约50℃倒平板持皿法：叠皿法：7实验一培养基的制备技术4分装液体培养分装过程：制备培养基；培养基冷却到约50℃分

4、装到小三角瓶8第一部分微生物培养技术实验二接种和培养（inoculationandcultivation)9试验前液体接种液培养：3个菌种，每种1瓶，1瓶3菌种种混合。每组一瓶；（共4个组，每组5个人）培养基准备：MSM培养基。每人2个培养皿（固体培养），2个三角瓶（液培）（上个实验已经准备好的）具体工作：给液体和固体培养基接种每天测定—镜检，OD值测定产出：菌种生长曲线（细菌个数，OD值）10实验二接种和培养1、平板培养接种1）平板划线(streakplate)；使用材料和用具：培养皿、酒精灯、接种环等：11实验二接种和培养2）稀释涂布平板

5、法(spreadplate)：使用材料和用具：培养皿、酒精灯、涂布器（玻棒制作）等：12实验二接种和培养3）倒平板法用于菌浓度稀释的方法之一13实验二接种和培养2、液体培养接种1）菌块接种从平板培养中切下菌斑，放入三角瓶中2）孢子悬浮液接种14实验二接种和培养3、培养方法---impossibleisnothing.试管(斜面)-静至于冰箱；用于菌种保存培养皿（平板）-静至于一定温度；15实验二接种和培养3、培养方法---impossibleisnothing.锥瓶（液体培养基）-震荡，一定温度；16