不同冷冻方案保存人类卵巢组织的活性比较

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1、中国组织工程研究第仃誊532013—12—31出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchDecember31，2013VoL17,No．53一cR矾。doi：10．3969~'．issn．2095—4344．2013．53．005[http：／／www．crter,org]李云秀．孙莹璞．啻莉．马艳薄不同冷冻方案保存人类鄂巢组织的活性比较．中匡组织I程研究。2013，17(53)：9125-9131不同冷冻方案保存人类卵巢组织的活性比较术☆李云秀’’2孙莹璞’，唐莉，马艳萍(’郑州大学第一附属医院生殖中心，河南省郑州市45005

2、2；云南省第一人民医院生殖遗传科，云南省昆明市650032)文章亮点：1卵巢组织冷冻保存被认为是保存女性生殖内分泌功能安全、有效的方法，但目前仍没有建立一种统一、李云秀☆，女，1973年生，稳定的卵巢组织冷冻方案。云南省宣威市人，汉族，郑州大学第一附属医院在2文章采用程序冷冻法和2种玻璃化冷冻方法对2O例人类卵巢组织进行冷冻保存，评价3种冷冻方法保读博士，现就职于云南省存卵巢组织活性的效果。结果显示，液氮直投法冷冻保存效果稳定，与程序冷冻法相似，但操作简便，只需第一人民医院生殖遗传置入冷冻保护剂内，4℃平衡6min即可投入液氮内保存。实验降低了液氮直投法主要冷冻保护剂乙二

3、醇的科，主治医师，主要从事浓度，与文献比较，冷冻效果并未明显降低。于生殖医学研究。3文章的不足之处在于观察时间较短，未观察到冷冻卵巢组织卵泡长期存活及进一步发育隋况。卵巢组105935559@qq．corn织体外培养目前仅能发育到次级卵泡阶段，卵泡在体外的成熟发育还有待更深入研究。通讯作者：孙莹璞，博士，关键词：教授，郑州大学第一附属器官移植：组织移植；人卵巢组织；程序冷冻法；玻璃化冷冻；细胞存活，死亡分析；体外培养；卵泡活性；医院生殖中心，河南省郑省级基金州市450052主题词：syp2008@vip．sina．com卵巢；低温保存；细胞存活；细胞死亡；卵泡基金资助：中

4、图分类号：R318云南省国际技合作暨科技兴贸专项计划项目(2006GH17)文献标识码：A文章编号：2095-4344(2013)53-09125-07摘要背景：卵巢组织冷冻保存被认为是保存女性生殖内分泌功能安全、有效的方法，但目前尚无统一确定的方案。修回El期：2013-10-14目的：探讨3种冷冻方案对人类卵巢组织保存冷冻效果及卵泡活性的影响。(201309024／G’W)方法：采用丙二醇慢速程序冷冻法、二甲基亚砜玻璃化冷冻法、液氮直投法对2O例人类卵巢组织进行冷冻保存，复苏后采用细胞存活，死亡荧光分析法计数有活性的细胞，体外培养测定培养液雌二醇浓度及各级卵泡计数，判

5、断3种不同冷冻方案对人类卵巢组织活性的影响。结果与结论：不同冷冻方案冻融后卵巢组织块的活性卵泡率均低于新鲜卵巢组(尸<0．05)，二甲基亚砜组最低，液氮直投法组与慢速程序冷冻法组差异无显著性意义。体外培养各冷冻组分泌的雌二醇水平比较，第4天时二甲基亚砜组低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组(P<0．os)，至第8天时各冷冻组雌二醇水平与新鲜卵巢组一致。培养14d组织学观察，各组卵巢组织内生长期卵泡比例增多，始基卵泡仍然占最主要的。新鲜卵巢组织正常卵泡的总数高于冷冻组(P<0．05)，二甲基亚砜组的正常卵泡数低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组(P<0．o5)。提示冷冻保存对卵

6、巢组织卵泡有一定的损伤，但仍能保存大部分始基卵泡的活性，经体外培养后可进一步发育并具有分泌功能，在3种冷冻方案中，慢速程序冷冻法和液氮直投法的冷冻效果优于二甲基亚砜玻璃化冷冻法，液氮直投法操作简便，冷冻效果稳定。LiYun-xiu☆．Studyingfordoctorate，Attendingphysician．ReproductiveMedicineCenter,InfluenceofdiferentcryopreservationschemesonhumanovariantissueactivityFirstAfiliatedHospitalofZhengzhouUn

7、iversity，LiYun—xiu’一SunYing—pu’TangLi，MaYan—ping(’ReproductiveMedicineCenter,FirstAfiliatedHospitalZhengzhou450052，Henan，，Province，China；Depadme~ofofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052，HenanProvince，China；DepartmentofReproductionandReproductionandGenetics．theGenetic