不同代次兔髓核细胞中ⅱ型胶原和sox9的表达

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1、190实用医学杂志2014年第30卷第2期·基础研究·不同代次兔髓核细胞中Ⅱ型胶原和SOX9的表达胡译文张伯寅文剑明王锐英摘要目的：通过培养不同代次兔髓核细胞，检测其Ⅱ型胶原和SOX9的含量变化，观察其细胞生长规律方法：取2～3个月龄新西兰大白兔8只，空气栓塞致死后取出胸、腰椎段髓核进行细胞传代培养。将原代细胞作为对照组(A组．n=8)，传代后的2、3、4、5代细胞分别为B、C、D、E组，显微镜下观察不同代次细胞的形态变化：MTF法绘制细胞生长曲线：RT—PCR和免疫组化法检测不同代次细胞Ⅱ型胶原和SOX9的表达。结果：原代细胞(A组)生长缓慢，20～30d达80％融合可传

2、代；B组生长速度最快，7～10d可传代，C、D、E组生长速度依次减慢RT—PCR和免疫组化法检测可知A组和B组的Ⅱ型胶原及SOX9的表达明显高于C、D、E三组(P<0．05)，A、B组之间差异无显著性(P>0．05)，C、D、E组之间差异无显著性(P>O．05)。结论：不同代次兔髓核细胞的生长规律、Ⅱ型胶原及SOX9含量不同，第2代兔髓核细胞生物学特性与原代细胞相似．可作为种子细胞进行实验研究关键词髓核细胞；不同代次；Ⅱ型胶原；SOX9；兔ExpressionsofcollegenIIandSOX9indifferentgenerationsofrabbitnucleusp

3、ulposuscellsHUYi—wen，ZHANGBo—yin，WENgian—ming，WANGRui—ying．TheSecondDepartmentofOrthopedics，AfiliatedHospitalofGuilinMedicalCollege，Guilin541001，ChinaCorrespondingauthor：WANGRui—yingE—mail：rywang@glmc．edu．cn【Abstract】ObjectiveToobservethegrowthlawofrabbitnucleuspulposuscells(NPCs)throughde

4、tectingtheexpressionsofcollegenⅡandSOX9inthem．Methods8NewZealandwhiterabbits(2～3monthsold)weresacrificedbyairembolism．thenthethoracicandlumbarNPCswereseparatedandcuhuredinvitro．Theoriginalgenerationalcellswereincludedascontrolgroup(GroupA，n=8)，andthesecond，third，forthandfifthgenerationalce

5、llswereincludedasGroupB，C，D，E，respectively．Cellmorphologywasobservedbymicroscopy，andthegrowthcurvewasdrawnbyMrI’．TheexpressionsofcollagenIIandSOX9wereevaluatedbyRT—PCRandimmunohistochemistry．ResllltSCellsinGroupAgrewslowlyandtook20～30daystoreach80％confluence．andthoseinGroupBgrewthefastestt

6、operformcellpassageby7—10days；thegrowthratesinGroupC，DandEsloweddowninturn．TheexpressionsofcollagenlIandSOX9inGroupAandBwereobviouslyhigherthanthoseinGroupC，DandE(P<0．05)；andwerenotsignificantlydifferentbetweenGroupAandB(P>O．05)andamongGroupC，D，E(P>0．05)．ConclusionDifferentgenerationalcell

7、spresentedvariedexpressionsofcollagen1andSOX9andgrowthlaw．Thesecondgenerationalcellsweresuitabletobeusedasseedcells．【Keywords】Nucleuspulposuscells；Differentgeneration；CollegenⅡ；SOX9；Rabbit．椎间盘退变的共同表现是髓核细胞(nucleus胞代次，为椎问盘退变的实验研究提供种子细胞。pulposuscells)的功能降低和数量减少，Ⅱ