丙型肝炎病毒多CTL表位DNA疫苗免疫学特性的初步研究.pdf

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1、第27卷第1期武汉大学学报(医学版)Vol.27No.12006年1月MedicalJournalofWuhanUniversityJan,2006丙型肝炎病毒多CTL表位DNA疫苗免疫学特性的初步研究12222安利峰胜利史霖范桂香袁育康1西北民族大学医学院兰州7300302西安交通大学医学院免疫学教研室西安710061摘要目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)疫苗研制并为抗HCV感染提供实验依据。方法:从HCVJ株基因组中,选取小鼠(H22d)CTL表位基因序列,以pcDNA3.1(+)质粒为载体,构建相应的真核表达质粒,经肌肉免疫后,取受免疫小鼠血清和脾细胞,用ELISA及MTT法检测

2、小鼠血清中IL22和IFN水平及小鼠脾细胞的增殖活性。结果:实验组小鼠血清中IL22及IFN水平明显高于对照组[IL22:(208±8.88)比(106±6.06);IFN:(179.5±2.52)比(90.5±2.52),P<0.05];实验组淋巴细胞增殖指数明显高于对照组(1.56比1.13,P<0.05)。结论:本实验构建的pcDNA3.1(+)/HCVCTL真核表达质粒,经肌肉免疫后可以使受免疫小鼠细胞免疫应答水平提高,淋巴细胞增殖活性增高。关键词丙型肝炎病毒;CTL表位;DNA疫苗;免疫中图分类号R512.6文献标识码A文章编号167128852(2006)01200172

3、03InvestigatingPotentialImmunogenicEfficacyofHCVDNAVaccinewithMultipleCTLEpitopes12222ANLifeng,SHENGLi,SHILin,FANGuixiang,YUANYukang1MedicalCollege,NorthwestNationalityUniversity,Lanzhou730030,China2Dept.ofImmunology,MedicalCollege,Xi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061,ChinaAbstractObjective:Toex

4、ploretheexperimentevidenceforfurtherresearchonhepatitisCvirus(HCV)vaccineandanti2HCVinfection.Methods:ThecandidateHCVDNAvaccinewascon2structedbyinsertingtheH22dmiceCTLepitopessequencesfromHCVJstraingenomeintoeu2karyoticexpressionplasmidpcDNA3.1(+),andBalB/cmicewereimmunitiedintra2musclewiththep

5、cDNA3.1(+)plasmid.ThemiceserawerecollectedforthetestofIL22andINFlevelsbyELISA,andspleencellswereisolatedforlymphocyteproliferationbyMTTmethod.Results:Se2rumIL22andIFNlevelsinexperimentgroupwerehigherthanthoseincontrolgroup(IL22:208±8.88versus106±6.06;IFN:179.5±2.52versus90.5±2.52;bothP<0.05);Ly

6、mphocytepro2liferationindexwashigherinexperimentgroupthanthatincontrolgroup(P<0.05).Conclusion:ThepcDNA3.1(+)/HCVCTLeukaryoticexpressionplasmidwasconstructedsuc2cessfullyinthisexperiment.Byinoculation,therecombinantplasmidpcDNA3.1(+)/HCVCTLcanenhancecell2mediatedimmuneresponseinmice,andinducely

7、mphocyteproliferationresponsetospecificantigen.KeyWordsHepatitisCVirus;CTLEpitope;DNAVaccine;Immunization作者简介:安利峰,女,19722,讲师,医学硕士生,主要从事分子免疫病理学研究18武汉大学学报(医学版)第27卷丙型肝炎的病原体是丙型肝炎病毒(hepatitisC自西安交通大学医学院实验动物中心。virus,HCV)。HCV是引起输血后慢性肝炎及肝

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