黑鲷肠炎病原恶臭假单胞菌的分离和鉴定.pdf

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1、第31卷第3期渔业科学进展Vo1．31，NO．32O10年6月PROGRESSINFISHERYSCIENCESJun．，2010黑鲷肠炎病原恶臭假单胞菌的分离和鉴定毛芝娟王美珍。陈吉刚杨季芳(浙江万里学院生物与环境学院，宁波315IOO)(。华中农业大学水产学院，武汉430070)摘要2008年3月，浙江省象山港养殖黑鲷暴发了严重的肠炎病情，病鱼肠道肿胀，充满黄色黏液。以ZoBel12216E平板自病鱼肠道黏液分离到4株菌BB01、BB02、BB03和BB04。通过人工感染试验验证了前3株为病

2、原菌，其中BB01菌株96h的半数致死浓度ID。为4．61x10CFU／g鱼体重。3株分离菌革兰氏染色阴性，短杆状，氧化酶试验阳性，氧化葡萄糖，不产气，4。C生长，精氨酸双水解酶阳性，利用麦芽糖、柠檬酸盐，硝酸盐降解阳性，DNA酶、乙酰胺酶阴性；与已发表的恶臭假单胞菌16SrRNA序列的同源性达99以上；经形态和理化特性鉴定及16SrDNA序列测定，此3株菌同属于恶臭假单胞菌。药敏试验结果表明，菌株BB01对头孢类等多数抗生素种类敏感，而对氧氟沙星耐药。关键词黑鲷病原恶臭假单胞菌16SrDNA中

3、图分类号$941．42文献识别码A文章编号1000—7075(2010)03—0023—07IsolationandcharacterizationofPseudomonasputida，acausativeagentofgastroenteritisinblackseabream，Sparus，c，．DcpZMAOZhi—juanWANGMei—zhenCHENJi—gangYANGJi—fang(BiologicalandEnvironmentalCollege，ZhejiangWanliU

4、niversity，Ningbo315100)(。FisheryCollege，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070)ABSTRACTAnoutbreakofseriousmortalityamongtheculturedblackseabreamSparusmacrocephalus，characterizedbyaswollenintestinecontainingyellowfluid，occurredinearlyspringof2008i

5、nXiangshanBay。ZhejiangProvince．Fourstrainsofbacteria，BB01，BB02，BB03andBB04wereisolatedfromtheintestina1yellowfluidofthemoribundblackseabreamwithZobel12216Eagarand／orthiosulfatecitratebilesaltsucroseagar．Theformerthreewerei—dentifiedascausativeagentsv

6、iaartificialchallenge．The96hLD5ovalueofBB01was4．61×10CFU／gbreambodyweight．TheformerthreestrainswerecharacterizedasPseudomonasputi—dathroughmorphological，physicalandbiochemicalprofilestestsand16SrRNAsequencing．ThethreestrainswereGram—negative，short—ro

7、d-shaped，oxidaseandglucoseoxidationposi—tive，gasnegative，maltoseandcitratesutilizationpositive，argininedihydrolasepositive，ni—tratereductionpositive，DNAenzymeandacetamidasenegative．The16SrRNAsequenceofBB01sharedtheidentityofover999／6withthoseofP．puti

8、dastrains．Drugsensitivitytests宁波市科技局择优委托项目(2007C10037)资助收稿日期：2009—05—16；接受日期：2009—08—25作者简介：毛芝娟(1973)，女，博士，副教授。主要从事海水养殖动物病原与免疫研究。E—mail：zhijuanmao@tom．corn，Tel：(0574)88222679渔业科学进展第31卷showedthatthestrainBB01wassusceptibletOmostofthetestedantibioticsw