不同发根农杆菌诱导花生发根研究.pdf

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1、山东农业科学2015，47(1)：14～16ShandongAgriculturalSciencesDOI：10．14083／j．issn．1001—4942．2015．01．004不同发根农杆菌诱导花生发根研究任艳，江晨，王辉，石延茂，尹亮，李双铃，崔潇，李磊，袁美h(1．山东省花生研究所，山东青岛266100；2．青岛市农业科学研究院，山东青岛266100)摘要：利用5种发根农杆菌侵染不同花生外植体，对比其发根诱导率，分析寻找利于花生转化的外植体、花生品种及发根农杆菌。结果表明，农杆菌94022诱导发根率较其它发根农杆菌

2、高；后期继代培养中子叶诱导的发根易于培养，存活率高，生长状态好；在用培养后的子叶为外植体时，花育2O较其它品种发根诱导率高。关键词：发根农杆菌；花生；外植体；发根诱导中图分类号：$565．204．3文献标识号：A文章编号：1001—4942(2015)01—0014-03StudyonHairyRootInductionofPeanutwithDifferentAgrobacteriumrhizogenesRenYan，JiangChen，WangHui，ShiYanmao，YinLiang，LiShuangling，Cui

3、Xiao，LiLei，YuanMei(1．ShaMongPeanutResearchste，~ng&o266100，China；2Q机0AcademyofAgr／cu／tura／Sc／ences，ng扫266100，China)AbstractFivekindsofAgrobacteriumrhizogeneswereusedtoinfectpeanutexplantsandtherootinduc—tionrateswerecontrastedtofindthesuitableexplants，peanutvarietie

4、sandA．rhizogenesforpeanuttransfor—mation．TheresultsshowedthatA．rhizogenes94022hadhigherrootinductionratethantheothers．Thehairyrootsinducedfromcotyledonwereeasytocultivateinthesuccessivetransfercuhurewithhighersurvivalrateandgoodgrowthcondition．Withculturedcotyledon

5、asexplants，Huayu20hadhigherrootinductionratethanotherpeanutvarieties．KeywordsAgrobacteriumrhizogenes；Peanut；Explants；Hairyrootinduction发根农杆菌能诱导大多数双子叶植物和少数花生是世界上广泛种植的经济作物之一，是单子叶植物l1]，发根农杆菌所含Ri质粒的T—我国第二大食用植物油和蛋白质资源。同时DNA通过整合进入植物核基因组，并稳定表达引花生的根和茎等外植体中含有白藜芦醇，建立起宿主植物发根J

6、。发根起源于单个细胞，具有花生发根培养体系对寻求白藜芦醇的新资源也有生长迅速、遗传稳定、有利于高效表达克隆的筛选重要意义。本试验以5种发根农杆菌和5个花生等特点。用含改造型Ri质粒的发根农杆菌感品种及其不同部位外植体为材料，分析寻找利于染植物细胞可将目的基因导人植物组织再生出转花生转化的外植体、花生品种及发根农杆菌。基因植株』。并根据插入位点的多样性筛选出l材料与方法高效表达的发根无性系进行生产和利用，是进行次生代谢物质离体调控和大规模生产的良好体1．1试验材料系供试花生品种：鲁花9号、丰花1号、花育收稿日期：2014—08

7、—01基金项目：科技部“863”项目(2006AA100106)“优质高产多抗油菜和花生分子育种技术研究与品种创新”；科技部作物种业科技工程(2011BAD35B04)作者简介：任艳(1979一)，女，山东兰陵人，助理研究员，硕士，主要从事花生组织培养技术研究。E—mail：cangry@sohu．con$通讯作者：袁美(1972一)，女，湖北公安人，研究员，博士，主要从事花生生物技术研究。E—mail：yuanbeauty@126．con第1期任艳，等：不同发根农杆菌诱导花生发根研究l52O、鲁花11、花育22。所用发根农

8、杆菌：$22、Ar～46．84％，Ar一1最低为32．81％。说明发根农杆1、Ar一2、9402、94022。菌94022最适宜诱导花生外植体发根。1．2试剂与培养基2．2不同花生外植体的发根诱导试剂有乙酰丁香酮、头孢霉素、卡那霉素、利由表1可看出，5种花生外植体均可诱导出福平；培养基为M