发根农杆菌侵染大豆产生发根的研究-论文.pdf

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1、第3O卷第1期上海交通大学学报(农业科学版)Vo1.3ONo.12012年2月JOURNAL0FSHANGHAIJIAOT0NGUNIVERSITY(AGRICULTURALSCIENCE)Feb.2012文章编号:16719964(2012)01—0055DOI:10.3969/J.ISSN.167l9964.2012.01.010发根农杆菌侵染大豆产生发根的研究李泉木,朱筠,曹越平(1.上海交通大学农业与生物学院,上海200240;2.辽宁省农业科学院所,沈阳110161)摘要:利用A4发根农杆菌,对不同大豆品种的无菌苗采用针刺的方法对子叶节部位进行接种,诱导毛状根产生,测定毛状

2、根中大豆苷元的含量。结果表明,以合丰35为受体材料,毛状根诱导率最高,为58,明显高于其他处理。发根中大豆苷元的含量是正常无菌苗和大田幼苗根中含量的2倍。关键词:大豆;发根农杆菌;发根;大豆苷元中图分类号:$565.1文献标识码:AHairyRootInducedbyAgrobacteriumrhizogenesinSoybeanLIQuan—mu,ZHUJun。CAOYue—ping(1.SchoolofAgricultureandBiology,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200240,China;2.LiaoningAcademyofA

3、gricultralSciences,Shenyang110161,Chnia)Abstract:12soybeanmaterialswereinfectedbyAgrobacteriumrhizogenesA4,anddaidzeincontentwasdeterminedinhairyrootswhichwereinducedbyinoculatingAgrobacteriumrhizogenesA4.“Hefeng35’’wastestedtobethebestreceptoramongthe12materials.Inoculatingbyneedleonsoybeancot

4、yledonnodewasthebestmethodforinducinghairyroots,theinducedratewas58Vo.Daidzeincontentinhairyrootswas2timesofthatinseedlingcultivatedinmediumandfield.Keywords:soybean;Agrobacteriumrhizogenes;hairyroot;daidzein大豆是重要的粮油兼用作物,其脂肪、蛋白质、的甙元约占总量的2~3。在不同器官的不同碳水化合物、粗纤维的组成比例非常接近于肉类食生长阶段,异黄酮含量有显著的差异。在成熟组织品。

5、大豆中的次生代谢产物,如大豆异黄酮中,异黄酮类表达量很低,但在遭到病毒攻击和产生(soybeanisoflavones)、大豆皂甙、植物甾醇等,在药防御激发子时,它们在所有组织中可迅速大量物及人体保健领域应用广泛l1]。累积引。大豆异黄酮具有抗癌、抗氧化、弱雌激素活性和发根农杆菌(Agrobacteriamrhizogenes)是一提供机体免疫力等作用。在大豆中,异黄酮是由种种革兰氏阴性土壤细菌,能够感染大多数双子叶植子和幼嫩生长器官产生的次生代谢产物。除了在根物。植物被发根农杆菌侵染后会产生许多生长迅速中大豆甙元有着较高的表达量,在大豆种子和生长的不定根,称为毛状根或发状根_4]。

6、目前毛状根培器官中,异黄酮类都以结合型糖苷形式存在,游离型养技术已成为利用生物技术生产次生代谢产物的有收稿日期:20110721基金项目:国家转基因重大专项(2008ZX8004001)作者简介:李泉木(1967),男,辽宁人,硕士,研究方向:作物遗传育种,E—mail:liquanmu@126.com;曹越平(1967一),为本文通讯作者,女,博士,教授,研究方向:作物遗传育种,Email:yuepingcao@Sjtu.edu.cn上海交通大学学报(农业科学版)第3O卷效途径。毛状根培养生产次生代谢产物具有合成能品;头孢噻肟钠购于哈尔滨制药三厂;标准品大豆苷力强、生长迅速、适于大

7、量培养的特点,而且其次生元(Daidzein)纯度98,购于美国Sigma公司。代谢物的含量一般比愈伤组织和悬浮培养的细胞1.2方法高,并能合成愈伤组织和悬浮培养细胞不能合成的1.2.1种子灭毒与无菌苗培养次生代谢物。毛状根培养可以生产的次生代谢产物大豆种子用氯气灭菌3h,在无菌操作台上接有生物碱类(如吲哚生物碱、喹啉生物碱、莨菪烷生种于B5固体培养基上(30蔗糖、7琼脂、pH物碱、喹嗪烷生物碱等)、甙类(如人参皂甙、甜菜甙5.8),在24~26℃光照14

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