发酵豆粕提取物中染料木素的分离纯化及结构鉴定-论文.pdf

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1、天然产物研究与开发NatProdResDev2012，24：8·10文章编号：1001-6880(2012)Suppl-0008-03发酵豆粕提取物中染料木素的分离纯化及结构鉴定杨学娟，陈钧，陈华，刘友彬，张春晓江苏大学食品与生物工程学院，镇江212013摘要：对发酵豆粕提取物经正丁醇处理后的甲醇可溶物，利用正相硅胶柱色谱及重结晶法从其提取物中分离出染料木素，经紫外光谱(uV)、质谱(Ms)、核磁共振(NMR)等波谱学方法鉴定证实了其结构。高效液相色谱分析表明，所提纯的染料木素纯度达到了98％以上。．关键词：发酵豆粕提取物；柱色谱；重结

2、晶；染料木素中图分类号：R151．3文献标识码：APurificationandIdentificationofGenisteininFermentedSoybeanMealExtractYANGXue-juan，CHENJun，CHENHua，LIUYou-bin，ZHANGChun-xiaoSchoolofFoodandBiologicalEngineering，JiangsuUnwenity，Zhenjiang212013，ChinaAbstract：Fermentedsoybeanmealextractwarextractedb

3、yn·butanol，therafinatephaseWasthenextractedbymetha-no1，andthemethanolsolublematerialWasconcentratedbythevacuumevaporationoforganicsolvent．GenisteinWasiso-latedfromtheextractusingsilicagelcolumnchromatographywit}lagradientelutionofdichloromethaneandmethanolandfurtherrecry

4、stallizedinmethano1．ThestructureofgenisteinWasidentifiedusingultravioletspectroscopy(UV)，ma$sspectrometry(MS)，andnuclearmagneticresonance(HNMR，”CNMR)．TheHPLCchromatogramwithUVat260amshowedthatthepufi~ofgenisteinwashigherthan98％．Keywords：fermentedsoybeanmealextract；column

5、chromatography；recrystallization；genistein低温豆粕是大豆经低温提取豆油后的一种副产异黄酮从糖苷形式转化成苷元形式，再使用硅胶柱品。含有丰富的蛋白质，是家禽饲养的主要蛋白来色谱结合重结晶技术对提取物进行分离和提纯，得源。经发酵以后的豆粕，更易于消化，同时还含有许到纯度高达98％的染料木素。多生理活性物质，具有重要的功能，如抗氧化，降血压，降血糖，降血脂，抗癌等等刮。染料木素(Genistein)为异黄酮的一种，结构见图1。它具有弱雌激素活性、抗癌、预防心血管疾病图1染料木素结构式等功能，此外，还具

6、有抗氧化、抗衰老、抗真菌、抑制Fig．1Structureofgenlstcin真菌活性及酪氨酸蛋白激酶活性的功能J。染料木素和其他异黄酮成分主要存在于大豆中，在大豆1材料与方法中的含量约为0．1％一0．5％J。对异黄酮的分离纯化技术主要有反相高效液相色谱法经典柱色谱1．1材料．法、高速逆流色谱法、固相萃取、膜分离技术等J。1．1．1菌种其中，传统柱色谱法比起其他纯化技术，虽然存在不纳豆芽孢杆菌js一1，江苏大学药学院分离鉴定可逆吸附的问题，但其可操作性强，在天然产物的分并保存。离纯化中广泛应用。1．1．2低温豆粕本文利用纳豆芽孢杆菌发

7、酵豆粕，将豆粕中的安阳漫天雪制造有限公司1．1．3仪器超净工作台(苏州亿达净化有限公司)，高压蒸收稿13期：2011-12-23接受日期：2012-02-23通讯作者Tel：86-51148780196，E-mail：syxchenjun@126．com汽灭菌锅(北京金辉盛业科技有限公司)，恒温恒湿摇床(上海福玛实验设备有限公司)，旋转蒸发仪杨学娟等：发酵豆粕提取物中染料木素的分离纯化及结构鉴定9(R-200，Switzerland)，紫外可见分光光度计(uv2结果与讨论2102，上海尤尼柯仪器公司)，高效液相色谱仪(Lc．20A—SP

8、D，日本岛津)，质谱仪(rI1le肋oCXQ，美国)，2．1UV吸收光谱核磁共振光谱仪(AVANCEII400MHz，瑞士Bruk—从该物质的uV扫描光谱(见图2)可以确定该er)，玻璃色谱柱(柱直径50m