常见植物培养基的配制配方.doc

《常见植物培养基的配制配方.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、常见植物培养基的配制配方CollectByBruce常见培养基的配制2015年04月2015-4-16常见培养基的制备LB；GAUSEl;PAD培养基[]1CollectByBruce常见培养基的配制2015年04月LB培养基LB(lysogenybroth)培养基是微生物学实验中最常用的培养基，用于培养大肠杆菌等细菌，其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的LB培养基可用丁筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。LB培养基的配制：成分：胰蛋白腺(tryptone)10g酵母提取物(yeastextract)5g氯化钠(NaCI)10g固体培养基另加琼脂粉(15-20)

2、g加双蒸水至1000mL,用5mol/LNaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121°C灭菌30mino配制方法：?称量分别称取所需量的胰化蛋白月东、酵母提取物和NaCI,置于烧杯中。?溶化加入所需水量2/3的蒸憎水于烧杯中，用玻棒搅拌，使药品全部溶化。？调pH用lmol/LNaOH溶液调pH至7.2。?定容将溶液倒入量筒中，加水至所需体积.?加琼脂加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。?分装、加塞、包扎。?高压蒸汽灭菌lOOPa灭菌20mino培养细菌：大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)天然培养基；Gause'sSyntheticAgar(高氏合成一号琼脂

3、)成分：?KNO3lg?Solublestarch（可溶性淀粉）20g?K2HPO40.5g?MgSO4.7H2O0.5g?NaCI0.5g?FeSO4O.Olg?Agar（琼脂）20g?water（水）1000ml?pH7.2-7.4方法：加入蒸憾水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管或三角瓶，121°C高压灭菌20分钟备用，性状:干燥粉末，易吸潮。CollectByBruce常见培养基的配制2015年04月PDA培养基制作PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即PotatoDextroseAgar(Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。它

4、属于固体培养基、半合成培养基。PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。PDA培养基的配方■■■■?土豆200g葡萄糖20g琼脂15-20g水1000mLpH值自然PDA培养基的配制?称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml,在加热器上加热至沸腾，维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000mlo?加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼

5、脂完全溶解后，再补充水分至所需量。?分装按实训耍求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量：固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。？加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞（或泡沫塑料塞或试管帽等），以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证冇良好的通气性能。?包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用

6、记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。棉塞制作说明：棉塞的作用：一是防止杂菌污染;二是可过滤空气，保证通气良好，并可减缓培养基水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。正确的棉塞是形状、大小，松紧应与试管口（或三角烧瓶）完全适合。过紧则妨碍空气流通，操作不便;过松时，空气会毫无障碍地进入试管（或三角烧瓶）屮，达不到灭菌的冃的。棉塞过小往往易掉进试管内，因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响。正确的棉塞头较大，加塞时，应使棉塞长度的1/3留在试管口外，2/3在试管口内。目前，有条件的实3CollectByBruce常见培养基的配制2015年04月训室已使

7、用坚固的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，制作棉塞耍选纤维较长的棉花，一般不选用脱脂棉。因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。PDA培养基配制注意事项?培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。?PDA培养基一般不需耍调pHo对于耍调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时，可用Imol/LNaOH或Imol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCI溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。?培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。？培养