哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的作用及机制的初步探讨-论文.pdf

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1、·698·医学研究生学报2014年7月第鲞!』星rⅡ：旦上_l上论著(基础研究)哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的作用及机制的初步探讨李新萍，欧阳建，周敏【摘要】目的哇巴因是强心甾体类药物的一种，可诱导众多肿瘤细胞凋亡。观察哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡、hTERT、c．mycmRNA及蛋白表达的影响，探讨哇巴因抗肿瘤的作用机制。方法采用不同浓度和时间的哇巴因处理Jurkat细胞株，以加入等体积的1×PBS组作为对照组，分组为：对照组、哇巴因50nmol／L24h组、100nmol／L24h组及50nmol／L48h组、100nmol／

2、L48h组，以流式细胞术检测凋亡率；RT—PCR法检测hTERT、c-mycmRNA水平；Westernblot检测hTERT、c—myc蛋白的表达。结果药物作用于Jurkat细胞株24、48h后，对照组、50nmol／L24h组、100nmol／L24h组及50nmol／L48h组、100nmol／L48h组的细胞凋亡率分别为(4．23±1．o1)％、(5．67±3．71)％、(9．63±4．83)％、(19．67±4．55)％、(37．60±11．89)％，哇巴因50nmolfL48h组、100nmoX／L48h组的凋亡率与对照组相比差异有统计学意义(P<0

3、．05)；Jurkat细胞的hTERT、e—myc的mRNA水平较对照组显著下降了200％，其hTERT蛋白表达也较对照组下降了224％，c．myc蛋白表达较对照组下降400％(P<0．05)，且hTERT与c—mycmRNA及蛋白表达的降低呈正相关(P<0．05)。结论哇巴因可诱导T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡。哇巴因也可引起hTERT、e—mycmRNA及蛋白表达的下调，这可能是哇巴因可诱导Jurkat细胞株凋亡的机理之一。【关键词】哇巴因；Jurkat细胞株；凋亡；hTERT；c-myc【中图分类号】R733．7[文献标志码]A[文章编号】1008

4、-8199(2014)07-0698-04MechanismofouabaininducingtheapoptosisofTlymphoblasticleukemiaJurkatcellsLIXin—ping，OUYANGJian，ZHOUMin(DepartmentofHematology，AffiliatedGulouHospitalofNanjingUniversity，Nanjing210008，Jiangsu，China)IAbstractlobjective0uabainisacardiotonicsteroidthatcaninducetheapo

5、ptosisofmanytumorousceils．Thisstudywastoinvestigatetheanti．tumormechanismsofouabainbyobservingitseffectsontheapoptosisofTlymphoblasticleukemiaJurkatceilsandtheexpressionsofhTERTandc-mycmRNAandprotein．MethodsJurkatcellsweretreatedwithouabainattheconcentrations0f5Oand100nmol／Lfor24and4

6、8hours．andthosetreatedwith1×PBSservedasthecontro1．ThentheapoptosisrateofthecellswasdetectedbyflowcytometryafterAnnexinV／PIstaining．theexpressionsofhTERTande-mycmRNAdeterminedbyRT—PCR．andthoseofhTERTande-mycproteinbyWesternblot．ResultsTheapoptosisratesoftheJurkatcellsinthe50and100nmol

7、／Loua—baingroupswere(5．67±3．71)％and(9．63±4．83)％respectivelyat24hours，and(19．67±4．55)％and(37．60±11．89)％at48hours，significantlyhigherthan(4．23±1．01)％inthePBScontrolgroupat48hours(P<0．05)．Comparedwiththecontrol，theexpressionsofhTERTandc-mycmRNAweredecreasedby200％andthoseofhTERTandc-mycp

8、roteinby224％