汉黄芩素对胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制.pdf

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1、302细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMollmmuno1)2015，3l(3·论著·文章编号：1007—8738(2015)03—0302—05汉黄芩素对胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制曾志青，刘洪(南华大学附属第一医院神经外科，湖南衡阳421001)[摘要】目的探讨汉黄芩素对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭的影响及其相关机制。方法U87细胞随机分为对照组(加入2O的培养液)、(0、50、100)~moVL汉黄芩素处理组；细胞培养48h，应用MIT法检测细胞增殖情况，通过Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力，荧光实时定量PCR测定ezrinmR

2、NA表达，Westernblot法检测ezrin、Bc1-2、Bax蛋白表达及ezrin蛋白磷酸化水平，用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果与0pjnol／L汉黄芩素组以及对照组相比，(50、100)m0L／L汉黄芩素组细胞增殖抑制率增加，且100~mol／L汉黄芩素组细胞增殖抑制率明显高于50~moVL汉黄芩素组。随着汉黄芩素浓度的增加，平均穿膜细胞数以及ezrinmRNA、ezrin蛋白、ezrin蛋白磷酸化水平、Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低，而Bax蛋白表达水平、AI逐渐增加；0p~mo

3、l／L汉黄芩素组与对照组相比，无显著性差异。结论汉黄芩素能够减少胶质瘤U87细胞增殖、侵袭，下调ezrin蛋白表达和磷酸化活性，并诱导细胞凋亡。[关键词]汉黄芩素；胶质瘤；ezrin蛋白；凋亡[中图分类号]R285．5，R739．41，R392·33，Q279[文献标志码]AInhibitoryeffectofwogoninontheproliferationandinvasionofglioblastomaU87cellsandrelatedmechanismZENGZhiqing，LIUHongDepartmentofNeurosurgery，FirstAff

4、iliatedHospital，UniversityofSouthChina，Hengyang421001，China[Abstract]ObjectiveToexploretheefectofwogoninontheproliferationandinvasionofglioblastomaU87cellsanditsrelatedmechanism．MethodsGlioblastomaU87cellswerecultured／nvitroinRPM11640mediumaddedwith1oomL／LfetaIbovineserum．Afterceladhe

5、rence，thecellswereinoculatedwith20gLculturesolution(controlgroup)，20pLwogoninsolutions(0，50andlO0)pmol／Lfor48hours，respectively．The0pmoVLwogoningroupused20pLPBSinstead．CellproliferationwasanalyzedbyM1_rassay．ThecellinvasionabilitywasdetectedusingTranswelinvasionassay．Theexpressionsofe

6、zrinmRNAwasexaminedthroughrea1．timequantitativePCR．Theexpressionsofezrin。Bcl-2andBaxproteinsaswellasphosphorylatedezrinproteinlevelweremeasuredbyWesternblotting．Apoptosisindex(AI)wasdeterminedthroughterminaldeo×ynucleotidyltransferasemediateddeoxyuridinetriphosphatenickendlabeling(TUN

7、EL)assay．ResultsTheinhibitoryrateofcelproliferationsignificantlyincreasedin50and100vmoVLwogoningroupsascomparedwith0pmol／Lwogoningroupandcontrolgroup．Moreover，thatwashigherin100iJmoVLwogoningroupthan50pmoVLwogoningroup．Incomparisonwithcontroland0i~mol／Lwogoningroups，themeancellnumbers

8、ofper