黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用及机制探讨.pdf

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1、山东医药2o14年第54卷第27期黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用及机制探讨卢科莲，喻小兰。，夏纪毅，毛熙光(1泸州市妇幼保健院，四川泸州646000；2泸州市龙马潭区妇幼保健院；3泸州医学院；4泸州医学院药物与功能性食品研究中心；5泸州医学院附属医院)摘要：目的观察黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用，并探讨其可能机制。方法体外培养的宫颈癌Hela细胞分为3组，A组加入100I~mol／L黄芩素，B组加入200m0l／L黄芩素，C组加入不含黄芩素的无血清DMEM高糖培养基，处理24h。相差显微镜观察细胞形态及数量，流式细胞技术

2、检测细胞周期，明胶酶谱法检测细胞培养基中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9活性，RT—PCR法检测MMP-2、MMP-9、大鼠肉瘤蛋白(Ras)、细胞周期素D1(CyclinD1)、整合素B1(Integrin131)mRNA，Westernblotting法检测MMP一2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrin131蛋白。结果与C组相比较，A、B组细胞数量减少，细胞形态从不规则类圆形转变为多角梭形。A、B、C组S期细胞百分比分别为24．58％、19．41％、34．05％，G．期细胞百分比分别为72．67％、79．17

3、％、64．88％，A、B组与C组比较，P均<0．05。A、B、C组培养基中MMP-2活性分别为32．651±0．571、28．987±1．033、36．127±1．184，MMP一9活性分别为33．217±0．660、29．277±0．868、39．613±0．318，A、B组与C组比较，P均<0．05。A组MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrin131mRNA表达水平分别为1．012±0．045、1．0094-0．030、0．9884-0．036、1．013±0．034、0．983±0．036，B组分别为0．84

4、9±0．026、0．914±0．027、0．626±0．029、0．8064-0．037、0．799±0．037，C组分别为1．1994-0．029、1．0874-0．024、1．4134-0．026、1．203±0．029、1．224±0．025，A、B组与C组比较，P均<0．05。A组MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、lntegrin131蛋白表达水平分别为0．6934-0．025、0．8864-0．032、1．1274-0．028、1．0614-0．028、1．159±0．031，B组分另0为0．326±0．022、0

5、．754±0．024、0．782±0．183、0．321±0．027、0．481±0．028，C组分别为1．914±0031、1．487±0．016、1．3234-0．303、1．816±0．025、1．467±0．036，A、B组与C组比较，P均<0．05。结论黄芩素可抑制宫颈癌Hela细胞增殖，其机制可能为将细胞阻滞于G期，降低细胞培养基中MMP-2、MMP-9活性，下调细胞MMP-2、MMP．9、Ras、CyclinD1、Integrin131mRNA及蛋白表达。关键词：黄芩素；宫颈癌；宫颈肿瘤；Hela细胞；基质金属蛋白酶；大鼠肉瘤

6、蛋白；细胞周期素D1；整合素B1doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2014．27．002中图分类号：R71I．74文献标志码：A文章编号：1002-266X(2014)27-00044)4lnhibitoryefectofbaicaleinonproliferationofcervicaIcarcinomaHelacellsanditsmechanismLUKe—lian，YUXiao—lan，XIAJi—yi，MAOXi—guang(1MaternalandChildHeahhCareHospitalofLuzho

7、u，Luzhou646000。China)Abstract：0bjectiveToobservetheinhibitoryeffectofbaicaleinontheproliferationofcervicalcarcinomaHelacellsandtoinvestigateitspossiblemechanism．MethodsHelacellsculturedinvitrowererandomlydividedinto3groups：groupAwhichwasadded100Ixmol／Lbmcalein，groupBwhichw

8、asadded200~mol／LbaicaleinandgroupCwhichwasaddedse—rum—freeDMEMhigh—glucoseme~umwithoutbmc