高原地区捕食线虫性真菌的分离与鉴定-论文.pdf

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1、-——222·-——江苏农业科学2014年第42卷第8期张洪波，张春霞，孙亚丽，等．高原地区捕食线虫性真菌的分离与鉴定[J]．江苏农业科学，2014，42(8)：222—224高原地区捕食线虫性真菌的分离与鉴定张洪波，张春霞，孙亚丽，多杰才旦，康明(1．青海大学农牧学院动物医学系，青海西宁810016；2．青海省畜牧兽医职业技术学院动物医学系，青海西宁812100)摘要：采用玉米琼脂粉培养基对祁连县、共和县和泽库县4个地区的不同土壤样品进行捕食线虫性真菌的分离，并利用藏绵羊马歇尔线虫第3期幼虫诱导真菌捕食器官的产生。结果表明，从祁连县土壤样

2、品中分离到1株捕食线虫性真菌，根据菌丝及捕食器官的形态特征，鉴定为少孢节丛孢菌(Arthrobotrysoligospora)。关键词：高原地区；捕食线虫性真菌；分离鉴定中图分类号：$853．32文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)08—0222—02真菌是一类具有真正细胞核、能产生孢子的微小生物，一提供基础数据，达到生物控制牛羊寄生虫病的目的。般都进行有性繁殖和无性繁殖。捕食线虫性真菌是自然界的1材料与方法宝贵资源，广泛分布于土壤、动物粪便、动植物残体、苔藓及植物根中，营腐生或寄生生活。捕食线虫性真菌在土壤中处于1．1材

3、料低代谢状态，初期营腐生生长，后期由于营养竞争进入捕食阶1．1．1设备及药品隔水式恒温培养箱；普通显微镜；搪瓷段，把线虫作为主要营养来源或作为腐生生活的补充。目前，盘；直径90mm、高60mm的玻璃培养皿。琼脂粉(北京奥博已发现杀线虫性真菌200多种，可分为3种类型：第1类是捕星生物技术责任有限公司，批号：20121308)；青霉素(华北制食线虫性真菌，这类真菌能产生捕食线虫性结构(器官)如黏药股份有限公司，批号：sl110609)；盐酸(白银良友化学试剂性菌环(收缩或不收缩)、黏性菌丝、黏性菌网、黏性菌结有限公司，批号：050315)；氢

4、氧化钠(天津市化学试剂三厂，等⋯，通过捕食性器官捕获并杀死线虫幼虫。l，其最大优点批号：850629)；氯化钠(北京化工厂，批号：821212)；新鲜玉是对人和动物安全无害。；第2类是内寄生性真菌，这类真米粉(超市购买)。菌借助分生孢子来感染线虫，在线虫体内生长形成菌体，消化1．1．2玉米粉琼脂培养基(CMA)称取新鲜玉米粉40g，吸收掉线虫；第3类是包囊体和根瘤线虫寄生性真菌，主要利加蒸馏水1000mL，微火煮沸1h，补蒸馏水至1000mL，多层用营养菌丝来进攻线虫虫卵或雌虫。捕食线虫性真菌在自然纱布过滤；取滤液5mL，加蒸馏水495mL

5、，调pH值至6．0～界中分布最广泛，其特有的捕食线虫性结构特征明显，较其他6．2，加琼脂粉20g，经0．68MPa高压灭菌20min后倾注于灭2种类型易于在培养基上进行观察、分离和培养。菌玻璃培养皿。寄生虫病严重危害着畜牧业的发展，而胃肠道线虫病又1．1．3玉米粉琼脂单抗培养基(SACMA)配制方法同玉米是其中一种主要的寄生虫病，分布广、危害大，造成的畜牧业粉琼脂培养基，经0．68MPa高压灭菌20min后，冷却至50～经济损失巨大。目前，对线虫病的防治主要依赖于化学药物。60℃，每1mL玉米粉培养基中加入青霉素200IU，混匀后再反复使用

6、同一种化学药物易产生抗药性虫株，还会造成动物倾注于灭菌玻璃培养皿中，备用。性食品的药物残留，对人身体健康带来危害，另外，药物代谢1．1．4土壤样品及绵羊粪便的采集土壤采于青海省祁连的某些有害成分排出家畜体外，也会对环境造成污染。生物县、共和县、湟源县和泽库县4个地区，共40份土样。其中，防治因其节能、环保、低毒的特点而被人们广泛研究，国内外祁连县采集1O份土样，土质湿润；湟源县采集3份土样，土质普遍重视利用杀线虫性真菌对寄生虫性线虫病的防治J。较湿润；日月山采集4份土样，土质干燥；青海大学农牧学院其中，利用线虫天敌——捕食线虫性真菌进行生物

7、防制研动物房依次在树根、圈El、墙根采集3份土样，墙根土质干燥，究是最多的。近年来，我国在动物寄生虫病的生物防治领域其他2份土质较湿润；共和县采集10份土样，土质较湿润；泽研究取得一定的进展，杨晓野等对捕食线虫性真菌的分离、鉴库县采集10份土样，土质较湿润。线虫幼虫培养物质使用采定及生物防治等进行了大量研究。。但是，对于高原地区自青海大学农牧学院试验动物房饲养的绵羊粪便，利用线虫捕食线虫性真菌的研究及生物防治尚未见报道。现对青海省幼虫培养法得到第3期幼虫备用。祁连县、共和县和泽库县3个高原地区的不同土壤样品，开展1．1．5分生孢子洗脱液取蒸

8、馏水500mL，加入4．5gNaC1捕食线虫性真菌的分离和鉴定，为青海省牛羊线虫病的防制配成生理盐水，分装于250mL盐水瓶中，经0．68MPa高压灭菌20min。收稿日期：20