蟾毒灵镇痛作用及其作用机制探讨.pdf

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1、228武警医学2014年3月第25卷第3期MedJChinPAPF，V．No．3,March，214蟾毒灵镇痛作用及其作用机制探讨杨光，杨宇，张玉杰，曾宪阳【摘要】目的研究蟾毒灵的镇痛作用及其作用机制，为其临床应用提供理论依据。方法通过醋酸诱发小鼠扭体反应实验和小鼠热板实验，研究蟾毒灵的镇痛作用，通过Griess法和免疫印迹法研究RAW264．7细胞中NO含量和MAPK／p38／iNOS通路的变化。结果蟾毒灵(0．5mg／kg、1．0mg／kg)可以剂量依赖性地减少醋酸所致的小鼠扭体数(P<0．05)，并可显著提高热板所致疼痛小鼠痛阈值(P<0．05)。体外研究表明蟾毒灵(0．04M，0．

2、08M)可显著降低脂多糖(LPS)诱导的RAW264．7细胞的NO含量升高(P<0．05)，并可以抑制RAW264．7细胞的MAPK／p38／iNOS信号通路的激活。结论蟾毒灵具有一定的镇痛作用，其镇痛机制可能与抑制MAPK／p38／iNOS通路，继而减少NO的合成和释放有关。【关键词】蟾毒灵；镇痛；一氧化氮；MAPK通路【中国图书分类号】R971．1AstudyonanalgesicefectofbufalinanditsunderlyingmechanismsYANGGuang，YANGYu，ZHANGYujie，andZENGXianyang．DepartmentofAnesthes

3、iology，LiaoningProvincialCorpsHospi—ta1ofChinesePeople’SArmedPoliceForces．Shenyang110034．China【Abstract】0bjectiveToinvestigatetheanalgesiceffectofbufalinanditsunderlyingmechanisms．MethodsTheanalgesiceffectofbufalinwasstudiedbytheaceticacid—inducedwrithingresponseandhotplatetest．ThecontentsofNOandt

4、heactivationofMAPK／p38／iNOSpathwayinLPS—inducedRAW264．3weremeasuredbyGriessassayandWesternblotting，respectively．ResultsBufalin(0．5，1．0mg／kg)showedasignificantinhibitionofaceticacid—inducedwrithingresponseandprolongingoflickingtimeinhotplatetestatadose—dependentmanner(P<0．05)．Bufalin(0．04，0．08M)sig

5、nificantlyreducedthecontentsofNOandinhibitedtheactivationofMAPK／p38／iNOSinRAW264．7cells．ConclusionsTheanalgesicofbufalinisrelatedtosuppressingtheactivationofMAPK／p38／iNOSpathwayandsubsequentlyreducingthesynthesisandreleasesofexcessiveNO．【Keywords】bufalin；analgesia；NO；MAPKpathway蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍(Bufob

6、ufogar．Sigma公司；NO试剂盒，购自南京建成生物工程研garizansCantor)和黑眶蟾蜍(Bufomelanostictus究所。RAW264．7细胞购自中国科学院上海细胞Schneider)耳后腺的分泌物⋯。其性味甘辛、温，有库。p38、phosphorate．p38、iNOS、B-actin抗体购自美毒，具有解毒、消肿、醒神、开窍、强心和止痛等作国CellSignaling公司。昆明种小白鼠40只(体重用j。近年来对蟾酥及有效成分的研究表明，蟾毒18～20g，购自于中国医科大学实验动物中心)，随灵(Bufalin)是发挥药效的主要成分之一。本研机分为4组，每组10只，分

7、别为空白对照组(给予相究针对蟾毒灵的镇痛作用进行研究，并初步探讨了同体积的生理盐水)，阳性对照吗l哚美辛组(10mgg其可能的作用机制。kg，灌胃给药)，蟾毒灵各剂量组(0．5mg／kg、1．0mg／kg，腹腔注射)。1材料与方法1．2实验方法1．1仪器与实验动物受试药与动物分组YLS．1．2．1小鼠醋酸扭体法4组小鼠给药后1h腹6B智能热板仪(山东省医学科学院设备站)；多功腔注射0．7％醋酸溶液0．2ml／只。观察并记