模拟高住低练对大鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖能力的影响.pdf

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1、530·中国运动医学杂志2014年6月第33卷第6期ChinJSpotsMed，Jun．2014，VolI33，No．6·模拟高住低练对大鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖能力的影响龚晓明z，2郑澜瞿树林，1湖南师范大学体育学院(湖南长沙410012)2四川理工学院体育学院3湖南师范大学医学院摘要目的：模拟高住低练后，体外原代培养SD大鼠骨髓来源的内皮祖细胞，观察其生长情况，探讨低氧与运动复合刺激对其增殖能力的影响。方法：选用健康雄性SD大鼠24只，随机分为4组：常氧居住组、低氧居住组、常氧训练组和高住低练组。低氧居住组采用递减氧浓度刺激；常氧训练

2、组采用递增负荷跑台训练，每周6天。为期8周。方案结束后12h，提取大鼠后肢骨髓，运用密度梯度离心法分离得到单个核细胞，以EGM一2培养基进行体外培养诱导分化，获取内皮祖细胞，通过双荧光染色法鉴定内皮祖细胞。倒置显微镜下计数贴壁细胞数量、绘制细胞生长曲线及计算细胞增殖速率。结果：(1)细胞培养48h后呈圆形贴壁生长，第5d～7d呈梭形并出现集落，第10d集落增多，第20d细胞分枝状生长、管腔样结构出现。(2)与常氧居住组相比，其余三组贴壁细胞数量显著增加(P<0．05)；高住低练组贴壁细胞数量最多(P<0．05)；常氧训练组与低氧居住组贴壁

3、细胞数量比较无显著性差异(P>0．05)。各组细胞增殖平均速率无显著差异(P>0．05)。结论：低氧和运动都能促进骨髓源性内皮祖细胞的增殖．低氧和运动复合刺激效果更明显关键词高住低练；内皮祖细胞；骨髓；细胞培养；增殖Efectsof“LivingHigh-TrainingLow’’onProliferativeCapacityofEndothelialProgenitorCellsfromBoneMarrowofRatsGongXiaomingi。ZhengLani。QuShulin3lInstituteofP．E．HunanNormal

4、University。Changsha．China4100122InstituteofE．，SichuanUnwersityofScience&Engineering，SichuanZigong，China6430003Medicalc0，HunanNormalUniversity，Changsha，China410012CorrespondingAuthor：ZhengLan，Email：hnzhenglan@hotmail．comAbstractObjecaveToinvestigatewhetherornottheprolifera

5、tivecapacityofendothelialprogenitorcellswasassociatedwithstimulationofhypoxiaandexercise．Methods24maleSprague—Dawleyratswererandomlyandaveragelydividedinto4groups：livingatlowaltitude(LL)，livingandtrainingatlowaltitude(IIlTIt)，livingathighaltitude(LH)，andlivingathighaltitu

6、deandtrainingatlowaltitude(LHTL)．Highaltitudewassimulatedthroughstimulatingwithdecreasingoxygenconcentration．Trainingwasperformedonatreadmillwithincrementalload．6daysperweekfor8weeks．12hoursafterthe8一weekexperiment，themononuclearcellsfrombonemarrowwereobtainedbydensitygra

7、dientcentrifugationandsuspendedinEGM-2forculturinginvitrotoinducediferentiation，inwhichendothelialprogenitorcelswereidentifiedbydoublefluorescentstaining．Invertedmicroscopewasusedtoassayendothelialprogenitorcellscount，plottheirgrowthcurve，andevaluatetheaveragerateofcell收稿

8、日期：2013．11．22基金项目：国家自然科学基金项目(30671011)，中国博士后科学基金项目(20080430155)，2009年教育部留学回国人员科研启动基金项目通信作者：郑澜．Em