杂合抗菌肽MgJ抗菌活性的初步研究.pdf

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1、第3O卷第11期吉林化工学院学报Vo1.3ONo.112013年11月JOURNALOFJILININSTITUTEOFCHEMICALTECHNOLOGYNOV.2013文章编号:1007-2853(2013)11-0007-03杂合抗菌肽MgJ抗菌活性的初步研究尹佳(吉林化工学院化工与生物技术学院,吉林吉林132022)摘要:采用琼脂孔穴扩散法和微量稀释法,对人工合成的杂合抗菌肽抗菌肽Mg.1的抗菌活性进行研究,结果表明,抗菌肽MgJ具有较强的抑制大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的活性,对金黄色葡萄球菌的最低

2、抑菌浓度(MIC)为10g/ml,对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)为5g/ml

3、关键词:杂合抗菌肽Mg.1;最低抑菌浓度;抗菌活性中图分类号:Q78文献标志码:A现今全球环境污染及食品安全问题己成为人1.2方法类最为关注的热点问题.人们对防腐剂之类的食1.2.1杂合抗菌肽M发酵过滤液的制备品添加剂在安全性能上提出了更高的要求,因此,将10mL的杂合抗菌肽M发酵液原液分装人们开始把目光投向于天然防腐剂,它已成为食到离心管中,以12000r/min离心10min,用孔径品科学领域一个重要研究课题.抗菌肽(a

4、ntimi-为0.22Ixm无菌滤膜过滤,放4℃冰箱备用.crobialpeptides,AMP)是具有抗菌活性的肽的总1.2.2供试菌的制备称⋯,其对引起食物,特别是肉类、鱼类等腐败的将供试菌E.coliATCC25922和S.aureusATCC25923接人到LB液体培养基中,37℃培常见细菌,如大肠杆菌、葡萄球菌、产碱杆菌、假单养,使其菌数达到1×10CFU/mL备用.胞菌、芽抱杆菌等均有较好的杀灭作用.研究结果1.2.3杂合抗菌肽M的活力单位表明,许多杂合抗菌肽的杀菌活性和抗菌谱都高(1)把培养

5、好的供试菌原液浓度用无菌生理于天然抗菌肽引.杂合抗菌肽作为安全、高效和盐水调至1.5×10CFU/m1.取供试菌稀释液应用范围广的食品防腐剂,其研究开发无疑是一50L与50cc的LB固体培养基混匀后铺平板,待个很有前途的重要课题,具有广阔的发展前景.其凝固后,用酒精灯外焰灭菌过的打孔器(直径本研究通过对抗菌肽Magainin一1I和Japoni-5mm)打孔.cinⅡ为基础人工合成的杂合抗菌肽MgJ的抗菌(2)将Amp倍比稀释成1000、500、200、100活性的研究,证明获得了比MagaininII和

6、Japoni.和50mL,在每个孔中分别加入10做抑菌cinⅡ生物活性更高的抗菌肽,对利用基因工程技实验,用毫米尺测量抑菌圈直径,重复3次,根据术生产抗菌肽作为安全、无毒副作用的天然食品抑菌圈直径大小表示抗菌活性.取杂合抗菌肽防腐剂具有重要意义.M发酵过滤液,用无菌生理盐水稀释成1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0Ixg/mL,各取1材料与方法10L做抑菌实验.将杂合抗菌肽M的各稀释梯度的抑菌圈大小和Amp各稀释梯度的抑菌圈1.1材料大小进行比较.氨苄青霉素(Amp)、L

7、B培养基、MH肉汤培1.2.4杂合抗菌肽最小抑菌浓度(AⅡc)的测定养基、MH平板培养基.杂合抗菌肽M、金黄色采用NCCLS的微量稀释法J.葡萄球菌(Staphylococcusaureu8ATCC29213)、大(1)将供试菌(E.coliATCC25922、S.aureus肠杆菌(EscherichiacoliATCC25922)由吉林农业ATCC25923)接种到MH肉汤内,37℃培养12—大学食品科学与工程研究室提供.18h,使细菌处于对数生长期,用无菌生理盐水稀收稿日期:2013-08—15作者

8、简介:尹佳(1983.),女,吉林省吉林市人,吉林化工学院助教,主要从事食品生物技术与功能性食品方面的研究.第11期尹佳:杂合抗菌肽MgJ抗菌活性的初步研究9表2MgJ及Magainin¨的抑菌效果提高,为研究开发理想的新型抗菌肽分子提供了新思路.参考文献:[1]冯兴军,李静,赵晓宇,等.牛乳铁蛋白素一马盖宁杂合抗菌肽的设计、合成及抑菌活性[J].东北农业大3结论学学报,2011(3):105—109.[2]陈晓平,詹冬玲,贾惠文,等.抗菌肽MagaininII基抗菌肽是生物机体在抵御病原微生物的防御因的

9、克隆及其在E.coliBLP中的融合表达[J].反应中所产生的一类抗微生物与一些恶性细胞的吉林农业大学学报,2008(6):797—800.短肽.抗菌肽的作用机制不仅仅是脂膜渗透性的崩[3]KimJB,1wamuroS,KnoopFC,eta1.AntimicrobialpeptidesfromtheskinoftheJapanesemountainbrown溃,还有其他多种方式.研究发现,有些抗菌肽通过frog,Ranaor

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