中国林蛙皮抗菌肽提取及其抗菌活性研究

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1、....中国林蛙皮抗菌肽的提取及其抗菌活性的研究王战勇1,井静1,苏婷婷2(1.辽宁石油化工大学环境与生物工程学院,辽宁抚顺113001;2.辽宁石油化工大学化学与材料学院,辽宁抚顺113001)摘要:采用甲醇提取中国林蛙皮肤中的抗菌肽。并考察了影响抗菌肽粗提物抑菌率的各个因素:如提取时间、提取温度、料液比和pH值等因素,通过正交试验确定了获取抗菌肽粗提物的最佳条件。即:提取时间为24h,提取温度为-20℃,提取料液比为1:25,提取液pH值5.0。此条件下抗菌肽粗提物抑菌率可达75.22%。抗菌肽粗提物对常见的革兰氏阴性菌和阳性菌以及真菌均有一定抑制效果。对各测试菌株的最低抑制浓度分别

2、为:金黄色葡萄球菌和链球菌为0.25mg/mL;枯草芽孢杆菌和大肠杆菌为0.5mg/mL;蜡样芽胞杆菌为1.0mg/mL;白色念珠菌、酿酒酵母和毛霉为2.0mg/mL;根霉为4.0mg/mL。关键词:中国林蛙;抗菌肽;正交试验;抑菌活性中图分类号:Q516文献标识码:ATheStudyonExtractionandAntimicrobialActivityofAntimicrobialPeptidesfromSkinofRanachensinensisWANGZhanyong1,JINGJing1,SUTingting2(1.SchoolofEnvironmentalandBiologi

3、calEngineering,LiaoningShihuaUniversity,Fushun113001,China;2.SchoolofChimicalandMaterialSciences,LiaoningShihuaUniversity,Fushun113001,China)Abstract:AntimicrobialpeptideswereisolatedfromSkinofRanachensinensisbymethanol.Somefactorofinfluenceonantimicrobialpercentageofantimicrobialpeptidescrudepro

4、ductwasreviewed,suchastime,temperature,ratioofsampleandextractionsolventandpH.Theoptimumconditionwaschosenbyorthogonalexperiment.Theoptimumconditionsareasfollows:Theratioofsampleandextractionsolventis1:25.Theextractingsolutionwasdisposedfor24hat-20℃.AndthepHofextractingsolutionis5.0.Undertheoptim

5、izeconditionsantimicrobialpercentageofantimicrobialpeptidescanreach75.22%.Antimicrobialpeptidescrudeproductcouldeffectivelyinhibitthegrowthofseriesmicroorganisms,includingGram-positivebacteria,Gram-negativebacteriaandfungus.TheMICsofthetestedmicroorganismsweretestedasfollows:TheMICofStaphylococcu

6、saureusandStreptococcusis0.25mg/mL,theMICofBacillussubtilisandEscherichiacoliis0.5mg/mL,theMICofBacilluscereusis1.0mg/mL,theMICofCandidaalbicans,SaccharomycescerevisiaandMucoris2.0mg/mL,theMICofRhizopuis4.0mg/mL.Keywords:Ranachensinensis,AntimicrobialPeptidesOrthogonalexperiment,AntimicrobialActi

7、vity两栖动物皮肤在自然进化过程中形成了防御病原微生物的三套防御系统,相应地具有与这些防御系统相适应的特定结构。皮肤抗菌肽是其中先天防御系统的主要组成部分。两栖动物皮肤抗菌肽具有高效、广谱、不易产生耐药性等特点[1,2]。这使其在耐抗生素病原菌株大量涌现的今天有望成为新一代的临床抗菌药物[3,4],并成为当前的研究热点。中国林蛙(Ranachensinensis)是我国传统的名贵药用动物,俗称哈士蟆,其应用部分主要是雌性个体的输卵

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