线性范围试验课件.ppt

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1、方法学评价董雷鸣1方法学评价——通过一系列的实验，对某一实验方法作出客观的评价。2方法学评价试验——线性范围试验——批内重复试验——回收试验——干扰试验——方法比较试验——检测能力试验3评价对象——葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法）。4GOD-POD法评价之线性范围试验5光谱分析—Beer定律：——溶液的吸光度与溶液浓度成正比。6A=abc吸光度A浓度C0吸光度吸光系数液层厚度溶液浓度7AC8偏离仪器偏离化学偏离线性误差线性检查仪器线性检查方法学线性检查9仪器偏离化学偏离——杂光、有限带宽、检测器噪声、环境条件变化、波长的变化、比色杯

2、误差、辐射光的非平行性、检测器本身的非线性等——有色物质的电离、水解、缔合等原因。10线性范围试验目的：——通过进行线性范围的测定，选择线性段作为该测定方法的分析范围。11tanθ＝A1/C1＝A2/C2＝A3/C3＝……＝An/Cn＝KAC线性段θ校正常数12原理：使用不同浓度的葡萄糖标准溶液，用GOD-POD法测定各吸光度，绘制剂量-反应曲线（dose-responsescurve）。13GOD-POD法原理：葡萄糖氧化酶(GOD)葡萄糖+O2葡萄糖酸+H2O2H2O2+酚+4-氨基安替比林醌类+H2O+O2过氧化物酶(POD)（色原

3、性氧受体）14试剂：40mmol/L葡萄糖标准溶液GOD-POD法相关试剂15操作：血糖与GOD-POD试剂剂量反应曲线的制作加入物（μl）标准管012345葡萄糖标准液0246810蒸馏水1086420GOD-POD试剂150015001500150015001500混匀，置37℃水浴，15min，505nm比色。16注意事项：1、葡萄糖标准液的加量必须十分准确。2、标准管系列中每管平行做3管，取平均值。3、本方法的线性可达22.24mmol/L。17线性范围的确定——要求能覆盖临床上的参考值和常见疾病的医学决定水平，以减少标本稀释重测

4、的机会。3.89~6.11mmol/L18线性范围的评价：1、对线性范围内的浓度与对应吸光度值作直线回归分析；2、线性回归方程拟合程度的检验。3、使用高浓度和低浓度的临床标本进行实际的线性检查。19