基因工程一轮复习教学案.doc

《基因工程一轮复习教学案.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、基因工程知识点1：基因工程概念理解别名基因拼接技术或DNA重组技术、转基因技术操作环境生物体外操作对象DNA（基因）操作水平分子水平原理基因重组过程－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－优点定向改造生物的遗传性状（目的性强）、克服远缘杂交不亲和的障碍【典例1】下列叙述符合基因工程概念的是(B)A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整

2、合到细菌DNA上思考：基因工程成功的原因？a、DNA相同的分子组成和空间结构b、密码的通用性，都遵寻中心法则（碱基互补配对原则）知识点2：基因工程（DNA重组技术）的基本工具1、限制性核酸内切酶（限制酶）－“分子手术刀”来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（酵母菌中也有）功能：识别双链ＤＮＡ分子中特定的核苷酸序列，并在特定位点切割结果：粘性末端或平末端（图例说明）在基因工程中何时使用：在获取目的基因时、构建基因表达载体时【典例２】下列关于限制酶的说法不正确的是（）　Ａ、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列　　Ｂ、限制酶可用于提取目的基因　Ｃ、不

3、同的限制酶切割DNA的切点一般不同　　　Ｄ、限制酶广泛存在于动植物及微生物中【典例３】已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生不同的DNA片段种类数是（C）　　A.3　　B.4　　　C.9　　　D.122、DNA连接酶－“分子缝合针”功能：恢复被限制酶切开的磷酸二酯键种类：E.coliDNA连接

4、酶－连接粘性末端T4DNA连接酶－连接平末端（效率低）注意：限制酶、DNA连接酶、DNA（水解）酶、DNA聚合酶之间的区别。【典例４】据图所示，有关工具酶功能的叙述错误的是（D）　A．限制性核酸内切酶可以切断a处　B．DNA聚合酶可以连接a处　C．解旋酶可以使b处解开　D．DNA连接酶可以连接c处3、运载体－“分子运输车”种类：质粒（最常用）、噬菌体（衍生物）、动植物病毒。具备的条件：a、能在宿主细胞内稳定存在并大量复制（不影响宿主本身）b、有１个或多个限制酶的切点c、有标记基因注：①携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制，或整

5、合到染色体DNA上，随染色体DNA同步复制。②在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒基础上进行人工改造的。【典例５】质粒之所以能做基因工程的运载体，是由于它（B）A、含有蛋白质，从而能完成生命活动B、能够自我复制，从而保持连续性C、是RNA，能够知道蛋白质合成D、具有环装结构，能够携带目的基因【典例６】下列各项中，a、b、c、d代表的结构正确的是（D）A．a——质粒RNAB．b——DNA连接酶C．c——限制性内切酶D．d——外源基因知识点３：基因工程的操作步骤1、获取目的基因目的基因是指：编码蛋白质的结构基因方法：从基因文库中

6、获取（针对序列未知的，从自然界中已有的物种中分离出来）　　　PCR技术扩增（将已有的基因进行扩增）　　　通过人工方法化学合成（有反转录法和直接化学合成法）注意：①基因组文库和cDNA文库的区别②从基因组文库中获取－用限制酶切割、分离；（此时限制酶在目的基因前后各要切割一次）2、基因表达载体的构建(核心)目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因图示区别：启动子、终止子、起始密码子、终止密码子如何构建基因表达载体？用同一种限制酶（只要形成的粘性末端相同就行

7、）切割载体（一个切口两个黏性末端）和含有目的基因的DNA分子（两个切口的目的基因）。注：限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。【典例７】下图为基因表达载体的模式图。下列有关基因工程中载体的说法错误的是（B）　A．基因工程的核心步骤是基因表达载体构建　B．任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别　C．图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位　D．抗生素基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导　　　入了目的基因3、将目的基因导入受体细胞---借鉴了细菌或病毒侵

8、染细胞的原理。转化：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。生物种类植物动物微生物常