胃瘤安对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能影响的研究.pdf

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1、实验研究胃瘤安对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能影响的研究王海丹朱萱萱刘沈林舒鹏（南京中医药大学附属医院、江苏省中医院，江苏南京210029）摘要目的：观察胃瘤安对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：先建立H22荷瘤小鼠模型，小鼠接种24h后随机分为空白组、环磷酰胺组、胃瘤安高剂量组和胃瘤安低剂量组。分别给药处理后进行T淋巴细胞酯酶染色试验，计算T淋巴细胞酯酶染色率；溶血素抗体生成试验，计算HC50。取肿瘤称重，计算抑瘤率，比较各组差异。二硝基氯苯（DNCB）诱导的迟发型变态反应试验，以小鼠左右耳片重量差的毫克数作为鼠耳迟发型超敏反应的强度，并计算肿胀抑制百

2、分率。结果：胃瘤安高、低剂量均可增加荷瘤小鼠T淋巴细胞酯酶染色率，促进小鼠溶血素抗体生成，与空白组比较具有显著性差异。胃瘤安高剂量对DNCB诱导的H22荷瘤小鼠迟发型超敏反应具有明显的免疫促进作用，与空白组比较有显著性差异。胃瘤安高、低剂量组小鼠的H22实体瘤也比空白组明显减小。结论：胃瘤安在抑制肿瘤的同时具有促进H22荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的作用。关键词胃瘤安H22荷瘤小鼠免疫功能实验研究中图分类号R273文献标识码A文章编号1672-397X（2013）10-0069-03胃瘤安是以我院刘沈林教授健脾养胃方为基础自制的林巴斯公司；净化工作台（SW-CJ-1F）：苏州安泰空气技术

3、有纯中药院内制剂，临床主要用于治疗与预防胃癌术后复发转限公司。移。目前普遍认为中医药在防治肿瘤方面的独特之处主要在孔雀石绿：上海标本模型厂，批号：20070319；副品红：上于改善患者的生活质量，提高患者的生存期，对放化疗解毒海三爱思试剂有限公司，批号：20061106；亚硝酸钠：太仓化增效，预防肿瘤患者术后复发转移，另外还有一个重要作用工二厂，批号：20081014；醋酸-α-萘酯：中国医药集团上海化[1]是增强患者的自身免疫功能。因此，本研究主要从免疫实验学试剂公司，批号：20080517；乙二醇甲醚：上海三爱思试剂出发探讨胃瘤安是否具有增强H22荷瘤小鼠自身免疫功能的有限公司，批

4、号：20070621；冰醋酸：南京化学试剂有限公司，作用，从而为临床预防肿瘤患者术后复发转移用药提供有力批号：10113011311；二硝基氯苯：上海医药采购供应站，批的依据。号：090321；碳酸氢钠：成都市科龙化工试剂厂，批号：1实验材料20071013；氰化钾：上海华东师范大学化工厂，批号：970721；1.1实验动物ICR小鼠，18～22g，由南通大学实验动物中高铁氰化钾：浙江温州化学用料厂，批号：980204；绵羊红细心提供，合格证号：SCXK（苏）2008-0010。胞：南京市江宁区卫生防疫站，批号：20130406。1.2实验条件室温（20±2）℃，湿度55%～65%，光

5、照适度，2实验方法通风洁净良好。2.1瘤株的制备肝癌（H22）实体瘤，由中国药科大学生理1.3实验药物胃瘤安由江苏省中医院制剂部提供，批号：教研室提供，无菌抽取传代10d的肝癌腹水型小鼠腹水，110921以无菌生理盐水按1∶4稀释，调整细胞浓度在（1～2）×106，处方组成：炙黄芪、党参、炒白术、茯苓、陈皮、法半/mL，夏、当归、白芍、三棱、莪术、炙甘草、石见穿、白花蛇舌草、木整个操作在无菌条件下进行。接种于小鼠右肢皮下，香、砂仁，药物剂量比为5∶5∶3.3∶5∶2∶3.3∶3.3∶3.3∶3.3∶3.3∶2∶10∶10∶0.2mL/只。3.3∶1。注射用环磷酰胺（CTX），江苏恒瑞医

6、药股份有限公司，2.2分组及给药小鼠接种24h后随机分为4组，每组10批号：12021026。只，分别为空白组（灌胃等量生理盐水）、环磷酰胺组（腹腔注1.4实验仪器及试剂FA1004电子分析天平：上海精科天射20mg/kg环磷酰胺）、胃瘤安高剂量组（灌胃中药37.8g/kg）、平厂；Sp-756pc型紫外可见分光光度计：上海光谱仪器有限胃瘤安低剂量组（灌胃中药18.9g/kg）。公司；恒温水浴锅：国华电器有限公司；生物显微镜：日本奥2.3各组H22荷瘤小鼠T淋巴细胞酯酶染色率检测各组基金项目：国家中医药管理局行业专项资助课题（200807022）；江苏省中西医结合优势学科项目2013年

7、总第45卷第10期69实验研究小鼠连续给药10d，末次给药后1h，小鼠从眼眶后静脉丛取表2各组H22荷瘤小鼠溶血素抗体生成情况（x±s）血0.5mL，采置到干净的载玻片上，迅速涂成均匀的血涂片，组别剂量（g/kg）HC50用电吹风吹干。将片子浸入已预热30min的孵育液37℃孵空白组-0.85±0.20育3h，取出后用流水冲洗，干后用1%孔雀绿复染，油镜下环磷酰胺组0.020.91±0.25**检查。镜检时，每片计数200个淋巴细胞，若胞浆内见