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时间:2018-05-04
《中药半枝莲对肝癌h22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、中药半枝莲对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究【摘要】 目的探讨不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法观察不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结果不同剂量半枝莲与对照组比较,具有显著性差异(P<0.05);半枝莲与顺铂(DDP)合用组与单用DDP组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论半枝莲能有效地抑制H22肿瘤生长,并能显著加强化疗药DDP的抑瘤效果。【关键词】半枝莲H22抑瘤 中药半枝莲(HerbaScutellariaeBarbatae)为唇形科(Labiatae
2、)植物半枝莲ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。半枝莲性味辛、苦、寒,归肺、肝、肾经,是中医处方和成药中的常用中药,具有清热解毒、化淤利尿的功效[1]。近代药理学研究表明半枝莲抗肿瘤、抗病原、抑菌、解热、保肝等活性。半枝莲作为一种常用的抗肿瘤中药,在临床上应用多年,对肝癌、肺癌、胃癌、直肠癌、鼻咽癌等均有一定的疗效。本实验观察了不同剂量半枝莲提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,以及生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标,来探讨半枝莲的抗肿瘤作用机制,以期为半枝莲抗肿瘤新药的开发和研制提供依据。 1材料与仪器 1.1
3、药材半枝莲HerbaScutellariaeBarbatae购自济南市建联中药店,并由山东中医药大学药学院生药系石俊英教授鉴定为唇形科(Labiatae)植物半枝莲ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。 1.2动物及瘤株昆明种小鼠,雄性,体重(20±2)g,由山东大学实验动物中心提供。 H22肝癌小鼠购自山东省医学科学院药物研究所。 1.3仪器与试剂超净工作台(北京半导体设备厂);FA2004型电子天平(上海天平仪器厂);蒸气消毒器(山东新华医疗器械厂);注射用顺铂(DDP,批号20041113,规格20mg/支)(齐鲁制药有限公司)。 2方法与结果[2,3
4、] 2.1半枝莲水提取物的制备称取半枝莲200g,加相当于药材量的5~7倍的水浸泡1~2h,煮沸30min,过滤,药渣加3~5倍药材量的水继续煎煮,煮沸30min,过滤,合并滤液,于水浴上浓缩成每毫升相当于原生药材1g的浓度,即得半枝莲水提取物。 2.2H22肝癌肿瘤细胞悬液的制备取传代后14d的H22肝癌小鼠,脱颈椎处死,固定于鼠板上,依次用碘酊、酒精消毒操作部位皮肤,置于超净工作台中,无菌条件下,剥取肿瘤,选择生长良好无坏死及液化的肿瘤组织,剔除纤维包膜,在无菌表面皿中剪碎,置组织研磨器中,加入少量4℃生理盐水轻轻研磨,制成肿瘤细胞悬液,调整细胞浓度为1×107/ml。 2.
5、3昆明种小鼠移植H22肉瘤模型的制作取体重20g左右的昆明种小鼠,每鼠0.2ml接种于右前肢腋窝皮下(肿瘤细胞数约为2×106个),24h后称重,随机分成6组,分组情况为:对照组,顺铂组,半枝莲大、中、小3个剂量组,顺铂+半枝莲中剂量组。以上共分两大组,其中一组观察存活期以计算平均生存率,另一组计算瘤体重及其他相关指标。 2.4给药与记录观察指标各组给药情况如下:对照组:移植肿瘤后,每日灌服0.4ml生理盐水;DDP组:按2.0mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次,共两次;半枝莲小剂量组:每天按10g/kg体重灌服1次,连续10d;半枝莲中剂量组:每天按20g/kg体重
6、灌服1次,连续10d;半枝莲大剂量组:每天按40g/kg体重灌服1次,连续10d;DDP+半枝莲中剂量组:除每天按20g/kg体重灌服半枝莲中剂量1次,连续10d外;按2.0mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次,共两次。 给药10d后停止给药,停药次日处死小鼠,称取小鼠体重,解剖瘤体、肝、肺、脾、胸腺,分别称重,出现提早死亡的动物则提前解剖称重纪录。计算抑瘤率、生命延长率、肝/体比、脾/体比、肺/体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标。抑瘤率=(C-T)/C×100%。 T为实验组平均瘤重,C为对照组平均瘤重。结果见表1~4。 表1不同剂量半枝莲对H22
7、荷瘤小鼠抑瘤率的影响(略) 与荷瘤对照组比较,△△P<0.01;与DDP组比较,*P<0.05,**P<0.01;n=10 3讨论 本实验通过建立H22荷瘤小鼠动物模型,观察了抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标,对半枝莲的体内抗肿瘤药理作用进行了研究,实验结果表明,半枝莲确实具有良好体内抗肿瘤作用,大、中、小剂量组的抑瘤率分别为38.01%,36.26%,31.58%,与对照组比较,具有
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