烟田杂草内生真菌的分离鉴定及生物学特性的初步研究.pdf

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1、山地农业生物学报29(5):461~465,2010JournalofMountainAgricultureandBiology研究简报烟田杂草内生真菌的分离鉴定及*生物学特性的初步研究*张秀伟,桑维钧,谢鑫,王莉爽,桂泽文(贵州大学贵州山地农业病虫害重点实验室,贵州贵阳550025)摘要:从烟田杂草中分离筛选出对烟草病原真菌具有拮抗作用的内生真菌,通过对峙试验,对筛选出的拮抗作用较强的4种内生真菌进行了鉴定和生物学特性研究,确定了不同内生真菌生长的最适培养基、碳源、温度和pH值,为更好地利用它们提供了最佳的培养条件。关键词:烟田杂草;内生真菌;生物学特性中图分类号:S

2、476+.9文献标识码:A文章编号:1008-0457(2010)05-0461-05TheIsolationandCharacterizationofEndophyticFungifromWeedsinTobaccoField*ZHANGXiuwei,SANGWeijun,XIEXin,WANGLishuang,GUIZewen(GuizhouKeyLaboratoryforPlantPestManagementofMountainousRegion,GuizhouUniversity,GuiyangGuizhou550025,China)Abstract:En

3、dophyticfung,iwhichdemonstratedantagonismontobaccopathogenicfung,iwereseparatedfromtheweedsintobaccofields.Byconfrontationtests,thescreenedfourendophyticfung,iwhichshowedstrongantagonism,wereidentifiedandtheirbiologicalcharacteristicswerestudied.Thegrowthconditionsoftheendophyticfung,iincludi

4、ngdifferentmedium,carbonsource,temperature,andpHvalueetc.werefurtheroptmiized.Keywords:weedsintobaccofields;Endophyte;biologicalcharacteristics从植物内生真菌中寻找杀虫、抗菌天然农用活性物质为植物病虫害的生物防治拓宽了思路并提供了另一个广阔的研究领域。目前,经调查含有内生菌的植物大约有数百种,且从中发现了许多拮抗作用强的[1]内生真菌,故从中筛选抗菌活性物质具有更大的优势和几率。烟田杂草种类繁多,生命力极强。在烟草病害大面积发生时,杂

5、草仍能健康生长。本文从4种常见的烟田杂草中分离得到4株对烟草赤星病菌Alternariaalternata(Fries)Keissler、烟草根黑腐病菌Thielaviopsisbasicola(Brek.etBr.)及尖孢镰刀菌Fusariumoxysporum(Schlecht).fsp.nicotianae(Johns.)SnyderetHansen均有较强拮抗作用的内生真菌,并对4种内生真菌的生物学特性进行试验,为能更深入地研究它们奠定一定的基础。1材料和方法1.1材料烟田杂草小飞蓬Conyzacanadensis(L.)Cronq、野菊Chrysanthemumin

6、dicumL.、辣子草Galinsogaparvi收稿日期:2010-05-13;修回日期:2010-07-08基金项目:贵州大学研究生创新基金(2009009)作者简介:张秀伟(1980-),女,河北保定人,硕士研究生。研究方向:真菌学及植物真菌病害。*通讯作者:桑维钧,男,教授,硕士生导师。研究方向:真菌学及植物真菌病害。E-mai:lwjsang@163.com462山地农业生物学报2010年flora(Cav.)、曼陀罗Camelliajaponica均在贵州大学教学实验农场采得;另配备一定数量的马铃薯葡萄糖-培养基。1.2方法1.2.1内生真菌的分离用研磨法,先

7、用自来水将杂草叶片冲洗干净。用75%的乙醇处理4min,无菌水冲洗3次,再用2.5%次氯酸钠处理3min,无菌水洗涤3次。将表面消毒的材料放入无菌研钵中并加入适量无菌水研磨成匀浆,吸取0.5mL浆液于加有青霉素的PDA培养皿中,均匀涂布,25恒温培养。用最[2]后一次冲洗的无菌水作为对照。3~4d后观察,分离内生真菌,并编号保存。内生真菌的鉴定参考魏景[3]超!真菌鉴定手册∀鉴定其种类。1.2.2拮抗作用内生真菌的生物学特性研究用不同培养基(燕麦培养基、玉米培养基、查氏培养基

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