燕山红栗茎尖组织培养及不定根发生机理研究.docx

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1、燕山红栗茎尖组织培养及不定根发生机理研究板栗(CastaneamollissimaBL.)是我国著名的经济树种。板栗适应气候、土壤条件广泛,不仅具有较好的经济价值,而且具有较高的营养价值和保健功能。但目前板栗组织培养报道较少且常伴有生根率低,并受继代次数的制约等影响,而在不定根机理研究方面国内仍是空白。因此,开展燕山红栗茎尖组织培养及不定根发生机理的研究,同时,对燕山红栗良种的扩繁具有重要的实用价值,也其它难生根木本植物具有重要的借鉴意义。本文以燕山红栗2-3月实生苗的茎尖为试验材料,对茎尖组织培养快繁体系进行了研究,并从生理生化水平上探

2、讨了不定根发生调控机理。研究结果如下:(1)以茎尖为外植体,用0.1%升汞表面灭菌8-10min后,接种在MS(1/2N03-)+6-BA0.5mg/L的培养基上,能够快速的获得无菌体系。同时,向培养基中添加100mg/LPVP能够有效的防止褐变的发生。在增殖培养中,0.5mg/L6-BA对不定芽的诱导效果最好,浓度过高易形成较多的愈伤组织,影响微枝的分化和正常生长。(2)采用二步生根法成功地诱导了燕山红栗不定根的发生。二步诱导生根法即先在1/2MS(1/2NO3-)+3.0mg/LIBA培养基上暗培养5d后,转入1/4MS(1/2NO3

3、-)空白培养基中照光培养,生根率达73.3%。继代4次后,随着继代次数的增加,生根率也逐渐的提高,第8代是生根的最佳继代周期。(3)不定根发生过程中IAA/ABA比值能从激素平衡的角度上更好的解释生根的生理过程。同时,不定根发生过程中处理微枝的IAA含量增加以及ABA和GA3含量降低有利于不定根的发生。(4)不定根发生过程中,微枝体内IAAO、POD活性的降低以及PPO活性的升高有利于不定根的发生。