香樟籽乙醇提取物成分及抑菌活性探讨

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时间:2022-02-04

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1、毕业论文PPT格式建议如下:一、研究目的二、技术路线三、研究材料四、研究方法五、研究结果六、主要结论七、创新点及今后努力方向八、致谢香樟籽乙醇提取物成分及其抑菌活性研究ChemicalcompositionandAntibacterialactivityoftheEthanolextractsofCinnamomumcamphoraseed系所:生物科学系专业:生物科学学号:05124006作者姓名:杨顺指导老师:余海忠一、研究目的随着社会的发展和我国综合国力的提高,人们对生活质量的要求日益提高,对生态农业、绿色食品、持续农业、生物多样性保护及环境保

2、护的呼声越来越高。为了与我国可持续发展策略相适应,研制开发的新农药必须具有安全性高、残留低、无公害、生物活性高、选择性高、使用费用低等特性。植物性农药由于其原材料取自于天然植物,自然界有其顺畅的降解途径,具有无残留、无公害、不易产生抗药性等优点,可广泛用于农作物病虫害防治。香樟树系樟树属的常绿乔木植物,是我国亚热带绿阔叶林的主要树种之一,具有驱虫、防腐耐蛀的功能,樟树籽可提取色素、香料或樟油等物质制成植物农药,樟树籽为可再生资源,其应用前景广阔。我国很早就将樟树籽作为药物用于治病,并认为樟树籽有驱风散寒、行气止痛之功效,主要含有癸酸(C10)的樟树籽

3、脂肪油已被试制成碳酸甘油脂,用于治疗脂肪代谢紊乱病症,并能降血脂及胆固醇。那么,这种对人体起作用的香樟籽,它的乙醇提取物对绿色木霉,酵母菌,黑曲霉,木质层孔菌,枯草芽孢杆菌等微生物会不会有抑制作用呢?其作用方式又如何?因此,本研究拟就,香樟籽乙醇提取物成分和抑菌活性展开探讨。在实验中以香樟籽提取物为抑菌剂,对上述微生物生长及孢子萌发的影响进行试验,以研究其抑菌作用。香樟树籽二、技术路线三、实验材料1、供试植物香樟籽(Cinnamomumcamphoraseeds)采自湖北襄樊学院校内。2、供试微生物真菌:绿色木霉Trichodermaviride啤酒

4、酵母Saccharomycescerevisiae黑曲霉Aspergillusniger木质层孔菌Fomesligneus细菌:枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis以上五个菌株由襄樊学院化学工程与食品科学院廖雪义老师提供,实验室置冰箱中待用。1、香樟籽的粗提方法本实验利用醇浸法提取,具体步骤如下:(1)将采摘的紫色香樟籽盛在白瓷盘,置于鼓风干燥箱中烘烤(50℃),使其干燥。然后用微型植物粉碎机粉碎(或用研钵研碎),得到粉末。(2)将上述粉末分装到250ml磨口三角瓶中(0.25倍体积),然后加无水乙醇浸泡,间隔24h收集初提液,并在原瓶中加新

5、的无水乙醇浸泡,收集所有初提液,并抽滤得过滤液。(3)用旋转蒸发仪减压浓缩上述过滤液,得膏状物。四、实验方法2、气相色谱及质谱条件香樟籽无水乙醇提取物组分的测定在襄樊市产品质量监督检验所进行,所用仪器为气相色谱质谱联用仪。气相色谱条件:DB-5ms弹性石英毛细管色谱柱(0.25mm×30m,0.25μm)。升温程序:初始温度600C保持10min,以10C·min-1至800C,保持15min,以20C·min-1至2000C,以200C·min-1至2200C,保持5min。载气为氦气,流速0.8ml·min-1;进样口温度2200C。质谱条件:离

6、子源为EI,电离电压70eV,离子源温度2000C,溶剂延迟时间,7min,质谱扫描范围m/z40~400;扫描周期0.5S。3、生长速率测定法1)从试管中挑取原种接种与液体培养基中,在250C,光照条件下摇床培养。培养时间,不同的菌培养时间不同,以锥形瓶中有浑浊为宜(细小颗粒悬浮)。2)固体培养基融化后倒平板,待培养基凝固后吸取1ml菌液涂布,然后在250C,光照培养箱中培养。倒平板时,倒一半即可,摇均形成一薄层,以利于打菌饼。3)取45ml土豆滤液于100ml锥形瓶中,加入0.9g琼脂粉。同样做15瓶;取75ml土豆滤液于100ml锥形瓶中,加入

7、1.5g琼脂粉。同样做3瓶。然后于1210C灭菌30min。4)PDA固体培养基加热融化后,在恒温水浴锅中降温至500C左右。用10ml量筒(也可用移液枪)量取5ml香樟籽无水乙醇提取液,倒入装有45mlPDA培养基的锥形瓶中;用10ml量筒量取8.33ml对照液,倒入装有75mlPDA培养基的锥形瓶中,即比例为9:1。倒平板时,倒一半即可,摇均形成一薄层,以利于能平均倒3份平板。注:倒平板时,应在无菌环境中操作,但实验在酒精灯旁进行时,由于对照液(如乙醇)易挥发燃烧,靠的太近会烧着。5)在酒精灯旁进行,打孔器沾酒精后烧着灭菌,待降温至室温后再打菌饼

8、。6)接种环灭菌后挑取菌块于倒平板的培养皿中,每皿2块,菌饼反向置于培养基上,光照培养箱培养。各菌培养条件见

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