微生物检验弧菌科及检验

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1、第二十章　弧菌科及检验本章考点：　　1.概述　　2.弧菌属：分类、生物学性状、临床意义、微生物检测方法　　3.气单胞菌属　　4.邻单胞菌属　　弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。　　弧菌科包括4个菌属，即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。前三属细菌均可引起人类感染，发光杆菌属对人无致病性。　　一、弧菌属　　弧菌属的细菌分布广泛，以水中最多。　　世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：　　①O1群霍乱弧菌；　　②不典型01群霍乱弧菌；　　③非01群霍乱

2、弧菌；　　④其他弧菌（副溶血性弧菌）。　　对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。　　（一）霍乱弧菌　　霍乱弧菌是霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。　　1.生物学特性　　（1）形态染色：本菌呈弧形或逗点状，无芽胞，有菌毛，有些菌株有荚膜。一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。　　（2）培养特性：需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。耐碱不耐酸。可在无盐环境生长。　　碱性蛋白胨水中，经35℃培养6

3、～9h，在液体表面大量繁殖形成菌膜，可达快速增菌的目的。碱性琼脂平板上，经培养18～24h，形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。　　硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）上，形成较大黄色菌落。　　含亚碲酸钾琼脂平板上，因还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。　　庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。　　（3）生化反应：能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。　　（4）抗原结构与分型：霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原

4、和不耐热的非特异性H抗原。H抗原为弧菌属所共有，特异性低。O抗原特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。　　　　（5）变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。　　（6）抵抗力：本属菌对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。但耐碱力较强。　　本章练习题：　　关于霍乱弧菌，下列哪些说法是正确的　　A.O1群有古典生物型和EI-Tor生物型之分　　B.多粘菌素B敏感试验可用于古典生物型和El-Tor生物型的鉴别　　C.部分菌对庆大霉素敏感　　D.营养要求高，在普通营养琼脂上生长不好　　E.感染途径主要是通过污染的水源或食物经口摄入　　[答疑编号1]　　『正确

5、答案』ABE　　2.微生物学检验　　（1）标本采集：标本以粪便为主，尽可能在患者用药之前采取。可用无菌棉拭子采取自然排出的新鲜粪便，亦可用直肠拭子由肛门插入直肠3～5cm处采集。一般米泔水样便采取1～3ml，成形便采取蚕豆大小。　　采集的标本应及时接种适宜培养基。不能及时接种者，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文-腊二氏保存液和卡-布运送培养基等。　　（2）检验方法及鉴定　　　　表5-20-1霍乱弧菌两个生物型的鉴别　　性状　　　　　　　　　　　古典型　　　　　　　　　EITor型　　溶血（羊红细胞）　　　　　　-　　　　　　　　　

6、　　　D　　血凝（鸡红细胞）　　　　　　-　　　　　　　　　　　　+　　VIP试验　　　　　　　　　　-　　　　　　　　　　　　+　多粘菌素B敏感试验　　　　　　+　　　　　　　　　　　　-　噬菌体IV组裂解　　　　　　　+　　　　　　　　　　　　-　　噬菌体V组裂解　　　　　　　　-　　　　　　　　　　　　+　　　　3.临床意义　　致病物质：霍乱肠毒素，鞭毛，菌毛等。　　所致疾病：霍乱。表现为剧烈的腹泻和呕吐，导致严重脱水、代谢性酸中毒、休克和死亡。　　免疫性：霍乱病后可获得牢固的免疫力，再感染者少见。小肠内有sIgA形成。　　（二）0139型霍乱弧菌　　属非01群霍乱弧

7、菌，可与0139抗血清凝集。　　治疗原则：输液，纠正电解质紊乱，选用合适的抗菌药物。　　（三）副溶血性弧菌　　副溶血性弧菌是一种嗜盐性弧菌。常存在于近海岸海水、海产品及盐渍食品中。它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。　　食未煮熟的海产品后发生暴发性食物中毒最可能由哪种细菌引起　　A.鼠伤寒沙门菌　　B.痢疾志贺菌　　C.副溶血弧菌　　D.霍乱弧菌　　E.胎儿弯曲菌　　[答疑编号2]　　『正确答案』C　　1.生物学特性　　（1）形态染色：革兰阴性菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形