2019年临床医学检验技师考试《微生物检验》辅导讲义 弧菌科及检验.doc

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1、弧菌科及检验•考点＞弧菌属＞气单胞菌属＞邻单胞菌属【内容讲解】共同特点：＞直或微弯的杆菌＞氧化酶阳性＞具有极端鞭毛、动力阳性＞发酵葡萄糖弧菌科细菌及其初步鉴定弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光杆菌属极端鞭毛+———甘露醇++——脂酶+1+—+/-+——+卩129敏感+—++一、弧菌属WTO腹泻病控制中心将弧菌分为四类：%101群霍乱弧菌；%1不典型01群霍乱弧菌；%1非01群霍乱弧菌；%1其他弧菌(副溶血性弧菌)。(―)霍乱弧菌霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。1.生物学特性(1)形态染色＞弧形或逗点状；无芽胞、有菌毛、有些菌株有荚膜；一端有一根粗而长的鞭

2、毛，运动活泼。＞取患者米汨水样粪便作悬滴观察,可见该菌呈穿梭样或流星状运动。＞液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。(2)培养特性＞需氧或兼性厌氧菌；营养要求低；耐碱不耐酸，可在无盐环境生长。＞碱性蛋白腺水：形成菌膜。＞碱性琼脂平板：较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。＞硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS):较大黄色菌落。＞含亚碼酸钾琼脂平板：菌落中心呈灰褐色。＞庆大霉索琼脂：菌落中心呈灰褐色。(1)生化反应＞分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。＞迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。＞氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。＞能产生靛基质

3、，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。（4）抗原结构与分型＞耐热的特异性0抗原：特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。＞不耐热的非特异性II抗原：II抗原为弧菌属所共有。分类-血清学：厂稻叶型（AC）01群霍乱弧菌」小川型（朋）■L彦岛型（ABC）与群抗血渚凝集斗-不典型01群霍乱弧菌一非01群霍乱弧菌（02〜0138）0139群霍乱弧菌分类-生物学:性状古典生物型ElTor生物型溶血（羊红细胞）—D血凝（鸡红细胞）—+V-P试验—+多粘菌素B敏感+—噬菌体IV组裂解+—噬菌体V组裂解—+（5）变异性＞形态变异＞菌落变异＞溶血性变异＞毒力变异（6）抵抗力＞对热、干燥、日光

4、、酸、消毒剂很敏感。但耐碱力较强。1.微生物学检验（1）标本采集标本以粪便为主，尽可能在患者用药之前采取。--般米汨水样便采取1-3ml,成形便采取蚕豆大小。注：采集的标本应及时接种适宜培养基。不能及时接种者，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。（2）检验方法及鉴定米泊水样便、肠拭子、呕吐物等増菌培养（碱性蛋白冻水）I分离培养（碱性琼脂或冗BS、庆大雷素琼脂）I血活、生化鉴定确诊报告快速诊断（免疫荧光球菌法、SPA协同凝集试验）直接涂片镜检、动力及制动试验初歩报告1.临床意义致病物质：＞霍乱肠毒素，鞭毛，菌毛等。所致疾病:＞霍乱。表现为剧烈的腹泻和呕吐，导致严重脱水、代谢性酸中毒、休克和死

5、亡。免疫性：＞病后获得牢固免疫力，再感染者少见。小肠内有slgA形成。（二）0139型崔乱弧菌＞属非01群霍乱弧菌，可与0139抗血清凝集。＞治疗原则：输液，纠正电解质紊乱，选用合适的抗菌药物。（三）副溶血性弧菌一种嗜盐性弧菌。它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。1.生物学特性（1）形态染色：＞杆菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态;两极浓染。＞单端单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜。（2）培养特性:＞需氧，营养要求不高；NeiCl最适浓度为35g/L,在无盐培养基中不生长。所需pH为7.0-9.5,最适pH为7.7。＞不耐热，不耐冷，不耐酸，对

6、常用消毒剂抵抗力弱。＞液体培养基：形成菌膜。＞35g/LNaCl琼脂平板上：蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起、光滑湿润，不透明。＞副溶血性弧菌专用选择培养基：形成1〜2.5mm,稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落。＞SS平板：不生长或长出1〜2mm扁平无色半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈黏丝状。＞羊血琼脂平板：形成2-3mm.圆形、隆起、湿润、灰白色菌落，某些菌株可形成B溶血或。溶血。＞TCBS琼脂：不发酵蔗糖，菌落绿色。（3）生化反应：＞在70g/LNaCl中生长，在无盐或100g/LNaCl中不生长。＞能分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖,但分解阿拉伯糖。＞靛基质、

7、甲基红试验阳性，V-P、&S、尿素酶试验阴性。＞神奈川试验：致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血，对耳红细胞不溶血，称神奈川试验阳性。2.微生物检验（1）标本采集：主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等。（2）检验方法及鉴定1）增菌培养2）分离培养：菌落湿润、混浊无黏性，呈绿色；3）初步鉴定：＞形态、染色、多形性、活泼动力等特点。＞选择培养基上的菌落特征。＞氧化酶试验阳性，在K1A±斜而不产酸，底层产酸不产气，不产生