DEHP和高脂暴露对小鼠脑...酸类神经递质、神经元的影响_郑刘根

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·１４６·预防医学论坛２０２３年２月第２９卷第２期ＰｒｅｖＭｅｄＴｒｉｂ，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．２，Ｆｅｂ．２０２３·实验研究·ＤＥＨＰ和高脂暴露对小鼠脑组织氨基酸类神经递质、神经元的影响＊郑刘根１，单姗１，程东２，李慧２，姚文环２，赵秀兰１，张天亮（通信作者）３１．山东大学公共卫生学院毒理与营养学系，山东济南２５００１２；２．山东省疾病预防控制中心卫生检验检测所；３．山东省疾病预防控制中心摘要：目的观察长期低剂量邻苯二甲酸二（２－乙基己基）酯［ｄｉ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅ，ＤＥＨＰ］暴露及高脂喂养对小鼠脑组织氨基酸类神经递质和神经元的影响。方法选择体质量１６～１８ｇＳＰＦ级雌性Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠，适应性喂养１周，随机分为对照组（Ｃｏｎ组）、ＤＥＨＰ组（ＤＥＨＰ组）、高脂组（ＨＦＤ组）、ＤＥＨＰ暴露联合ＨＦＤ喂养组（ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组）。ＤＥＨＰ组和ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组小鼠经口给予５０μｇ／ｋｇＤＥＨＰ，Ｃｏｎ组、ＨＦＤ组小鼠给予等体积溶剂，Ｃｏｎ组、ＤＥＨＰ小鼠喂饲普通维持饲料，ＨＦＤ组、ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组小鼠喂饲高脂饲料。第２４周末，每组随机取８只小鼠脱臼处死，取脑组织制备匀浆，并采用高效液相色谱法检测脑组织氨基酸类神经递质水平；每组剩余４只小鼠经体内灌注固定，制备大脑冰冻切片，采用尼氏染色观察神经元的变化。结果ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组大脑皮层ＧＡＢＡ高于Ｃｏｎ组、ＤＥＨＰ组，ＨＦＤ组、ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组Ｇｌｕ／ＧＡＢＡ低于Ｃｏｎ组（Ｐ＜０．０５）；各组其他指标比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。各组中脑中氨基酸类神经递质水平比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。ＤＥＨＰ组、ＨＦＤ组、ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组小脑Ｇｌｙ均高于Ｃｏｎ组，ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组ＧＡＢＡ高于Ｃｏｎ组、ＤＥＨＰ组、ＨＦＤ组（Ｐ＜０．０５）；各组其他指标比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。与Ｃｏｎ组相比，ＤＥＨＰ组、ＨＦＤ组及ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组小鼠大脑神经元中尼氏体颜色变淡、着色颗粒稀疏，以ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组最为明显。结论ＤＥＨＰ长期暴露和高脂饮食可破坏小鼠脑内氨基酸类神经递质的内稳态，导致神经元损伤。关键词：邻苯二甲酸二乙基己酯；高脂饮食；氨基酸类神经递质；神经毒性；脑组织ＤＯＩ：１０．１６４０６／ｊ．ｐｍｔ．ｉｓｓｎ．１６７２－９１５３．２０２３．２．０１４中图分类号：Ｒ１３５．１文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－９１５３（２０２３）０２－０１４６－０６ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＤＥＨＰａｎｄｈｉｇｈ－ｆａｔｏｎａｍｉｎｏａｃｉｄｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓａｎｄｎｅｕｒｏｎｓｉｎｍｉｃｅｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｓ１，ＳＨＡＮＳｈａｎ１，ＣＨＥＮＧＤｏｎｇ２，ＬＩＨｕｉ２，ＹＡＯＷｅｎ－ｈｕａｎ２，ＺＨＡＯＸｉｕ－Ｌａｎ１，ＺＨＡＮＧＴｉａｎ－Ｌｉａｎｇ３ＺＨＥＮＧＬｉｕ－ｇｅｎ１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙａｎｄＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈ，ＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎａｎ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ２５００１２，Ｃｈｉｎａ；２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｅａｌｔｈＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎａｎｄＴｅｓｔｉｎｇ，ＳｈａｎｄｏｎｇＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ；３．ＳｈａｎｄｏｎｇＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＡｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｌｏｎｇ－ｔｅｒｍｌｏｗ－ｄｏｓｅｄｉ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅ（ＤＥＨＰ）ｅｘｐｏｓｕｒｅａｎｄｈｉｇｈ－ｆａｔｄｉｅｔ（ＨＦＤ）ｏｎａｍｉｎｏａｃｉｄｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓａｎｄｎｅｕｒｏｎｓｉｎｔｈｅｂｒａｉｎｏｆｍｉｃｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＦｅｍａｌｅＣ５７ＢＬ／６Ｊｍｉｃｅｗｅｉｇｈｉｎｇ１６－１８ｇｗｅｒｅｈｏｕｓｅｄａｔｔｈｅＳＰＦｇｒａｄｅａｎｉｍａｌｃｅｎｔｅｒｆｏｒ１ｗｅｅｋａｎｄｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｃｏｎ），ＤＥＨＰｇｒｏｕｐ（ＤＥＨＰ），ＨＦＤｇｒｏｕｐ（ＨＦＤ），ａｎｄＤＥＨＰ－ＨＦＤｃｏ－ｅｘｐｏｓｅｄｇｒｏｕｐ（ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ）．ＭｉｃｅｏｆＤＥＨＰａｎｄＨＦＤ＋ＤＥＨＰｇｒｏｕｐｗｅｒｅｏｒａｌｌｙｅｘｐｏｓｅｄｔｏ５０μｇ／ｋｇＤＥＨＰ，ｗｈｉｌｅｍｉｃｅｏｆｏｔｈｅｒｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｇａｖａｇｅｄｗｉｔｈｅｑｕａｌｖｏｌ－ｕｍｅｏｆｓｏｌｖｅｎｔ．Ａｔｔｈｅｅｎｄｏｆ２４ｔｈｗｅｅｋｓ，８ｍｉｃｅｗａｓｒａｎｄｏｍｌｙｓｅｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍｅａｃｈｇｒｏｕｐａｎｄｓａｃｒｉｆｉｃｅｄｂｙｄｉｓｌｏｃａｔｉｏｎ，ｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄ，ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄａｎｄｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｍｉｎｏａｃｉｄｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）．Ｔｈｅ４ｒｅｍａｉｎｉｎｇｍｉｃｅｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐｗｅｒｅｆｉｘｅｄｖｉａｔｒａｎｓｃａｒｄｉａｃｐｅｒｆｕｓｉｏｎｗｉｔｈ４％ｐａｒａｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ，ｔｈｅｂｒａｉｎｓｗｅｒｅｔａｋｅｎｏｕｔｆｏｒｆｒｏｚｅｎｓｅｃｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅｎ，ｔｈｅｓｌｉｃｅｓｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄＮｉｓｓｌｓｔａｉｎｉｎｇｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｎｅｕｒｏｎａｌＮｉｓｓｌｂｏｄｉｅｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｂｒａｉｎｃｏｒｔｅｘｌｅｖｅｌｓｏｆＧＡＢＡｉｎｍｉｃｅｃｏ－ｔｒｅａｔｅｄＤＥＨＰａｎｄＨＦＤｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆｍｉｃｅｉｎＣｏｎａｎｄＤＥＨＰｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅｂｒａｉｎｃｏｒｔｅｘＧｌｕ／ＧＡＢＡｒａｔｉｏｏｆｍｉｃｅｉｎｔｈｅＨＦＤａｎｄＨＦＤ＋ＤＥＨＰｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｌｏｗｅｒｔｈａｎＣｏｎｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）；ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｏｔｈｅｒｉｎｄｉｃａｔｏｒｓａｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔ＊基金项目：国家自然科学基金资助项目（８２０７３５８７，８１８７２６５４）；ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆａｌｌｔｈｅａｍｉｎｏａｃｉｄ山东省重点研发计划（重大科技创新工程）项目（２０２０ＣＸＧＣ１０６０４）ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓｋｅｐｔｕｎｃｈａｎｇｅａｂｌｅｉｎｍｉｄｂｒａｉｎｏｆｍｉｃｅａｍｏｎｇ作者简介：郑刘根（１９９６－），男，硕士，研究方向：卫生毒理学ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒｏｕｐｓ．ＴｈｅｃｅｒｅｂｅｌｌａｒｌｅｖｅｌｓｏｆＧｌｙｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ通信作者：张天亮，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｄｚｔｌ＠ｔｏｍ．ｃｏｍｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｈｅＤＥＨＰ，ＨＦＤａｎｄＨＦＤ＋ＤＥＨＰｔｒｅａｔｅｄｍｉｃｅｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｍｉｃｅ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ

1预防医学论坛２０２３年２月第２９卷第２期ＰｒｅｖＭｅｄＴｒｉｂ，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．２，Ｆｅｂ．２０２３·１４７·ＧＡＢＡｌｅｖｅｌｓｏｆｍｉｃｅｆｒｏｍＨＦＤ＋ＤＥＨＰｇｒｏｕｐｗｅｒｅｏｂｖｉｏｕｓｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆｍｉｃｅｉｎＣｏｎ，ＤＥＨＰａｎｄＨＦＤｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５）；Ｏｔｈｅｒｉｎｄｉｃａｔｏｒｓｈａｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．ＴｈｅｔｈｉｏｎｉｎｅｓｔａｉｎｉｎｇｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＨＦＤａｎｄＤＥ－ＨＰｔｒｅａｔｍｅｎｔｌｅｄｔｏｌｉｇｈｔｅｒｓｔａｉｎｉｎｇＮｉｓｓｌｂｏｄｙ，ｒｅｄｕｃｅｄｄｅｎｓｉｔｙｏｆｃｏｌｏｒｅｄｇｒａｎｕｌｅｓ，ｗｉｔｈｔｈｅＨＦＤ＋ＤＥＨＰｔｒｅａｔｅｄｍｉｃｅｂｅｉｎｇｔｈｅｍｏｓｔｐｒｏｎｏｕｎｃｅｄ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＬｏｎｇ－ｔｅｒｍｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏＤＥＨＰａｔｌｏｗｄｏｓｅａｎｄｈｉｇｈ－ｆａｔｄｉｅｔｃｏｕｌｄｄｉｓｔｕｒｂｔｈｅｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｏｆａｍｉｎｏａｃｉｄｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｂｒａｉｎｏｆｍｉｃｅａｎｄｒｅｓｕｌｔｉｎｔｈｅｎｅｕｒｏｎａｌｄａｍａｇｅａｎｄｌｏｓｓ，ｗｈｉｃｈｍｉｇｈｔｐａｒｔｌｙａｔｔｒｉｂｕｔｅｄｔｏｔｈｅｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｎｃｅｎｔｒａｌｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙｂｅｔｗｅｅｎＤＥＨＰａｎｄＨＦＤ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＤＥＨＰ；Ｈｉｇｈ－ｆａｔｄｉｅｔ；Ａｍｉｎｏａｃｉｄｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ；Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ；Ｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｓ邻苯二甲酸酯（ｐｈｔｈａｌａｔｅＥｓｔｅｒｓ，ＰＡＥｓ）是目前使染色观察脑组织神经元的变化，探索ＤＥＨＰ神经毒性用最多的增塑剂，广泛应用于装修材料、儿童玩具、化的潜在机制。妆品、食品包装及医疗用品中，其中，邻苯二甲酸二乙基己酯［ｄｉ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅ，ＤＥＨＰ］的使用量１材料与方法［１］约占ＰＡＥｓ的５０％～６０％。ＤＥＨＰ极易从塑料母１．１动物、试剂及仪器ＳＰＦ级雌性Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠体释放到环境中，可通过呼吸道、消化道和皮肤进入人４８只，体质量１６～１８ｇ，购自北京华阜康生物科技有体。研究显示，一般人群平均每日ＤＥＨＰ摄入量为３～限公司，动物生产许可证号为ＳＣＸＫ（京）２０２０－０００４。［２］３０μｇ／ｋｇ，我国规定ＤＥＨＰ的可耐受每日摄入量为普通维持饲料（Ｄ１２４５０Ｂ，脂肪供能比１０％）和高脂饲５０μｇ／ｋｇ，人类母乳、血液和尿液中均可检测到ＤＥＨＰ料（Ｄ１２４９２，脂肪供能６０％）均购自美国ＲｅｓｅａｒｃｈＤｉ－［３］及代谢产物。流行病学研究显示，儿童尿液ＤＥＨＰｅｔｓ公司。实验动物饲养于屏障环境，实验动物使用许及其代谢产物水平与智力评分及认知功能呈负相可证号为ＳＹＸＫ（鲁）２０２０００２２号，环境温度（２４±［４－５］关。采用秀丽线虫的研究显示，早期慢性ＤＥＨＰ２）℃，环境相对湿度（５０±１０）％，明／暗循环１２ｈ／１２［６－７］暴露可加重秀丽线虫因衰老导致的长期记忆下降。ｈ，可自由进食及饮水，适应性喂养７ｄ。本实验研究连续５个月通过饲料给予ＳＤ大鼠３００ｍｇ／ｋｇ的ＤＥ－符合美国国立卫生研究院（ｎａｔｉｏｎａｌｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆ［８］ＨＰ，可导致大鼠的空间学习记忆受损。ＣＤ－１雌性ｈｅａｌｔｈ，ＮＩＨ）实验动物使用的伦理和福利要求，实验小鼠孕期经口暴露２００μｇ／ｋｇ的ＤＥＨＰ，其子代小鼠方案经过山东大学公共卫生伦理学委员会审批（审批表现出情绪焦虑、空间和识别记忆下降等行为学改变，号ＬＬ２０２００４２）。ＨＰＬＣ色谱纯甲醇和乙腈购自上海伴随海马椎体神经元变性［９］。这些研究提示ＤＥＨＰ国药集团化学试剂有限公司，天冬氨酸（Ａｓｐ）、谷氨酸可能具有神经毒性，但机制尚不明确。研究显示，一些（Ｇｌｕ）、甘氨酸（Ｇｌｙ）、γ－氨基丁酸（γ－ＧＡＢＡ）和牛磺酸（Ｔａｕ）标准品购自北京索莱宝科技有限公司，所有其环境污染物通过影响脑内兴奋性和抑制性氨基酸类神他化学试剂均为市售分析纯以上。ＬＣ－２０ＡＴ型高效经递质水平及其稳态引起神经系统损伤。兴奋性氨基液相色谱仪及ＷｏｎｄａＳｉｌＣ１８－ＷＲ（４．６ｍｍ２５０ｍｍ，５酸类神经递质主要包括谷氨酸（ｇｌｕｔａｍａｔｅ，Ｇｌｕ）、天冬）色谱柱（日本岛津株式会社），生物样品匀浆仪（杭氨酸（ａｓｐａｒｔｉｃａｃｉｄ，Ａｓｐ）、抑制性氨基酸类神经递质包μｍ州奥盛仪器有限公司），数字切片扫描仪Ｐａｎｎｏｒａｍｉｃ括γ－氨基丁酸（γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ，ＧＡＢＡ）、甘氨酸ＭＩＤＩⅡ（匈牙利３ＤＨＩＳＴＥＣＨ公司）。（ｇｌｙｃｉｎｅ，Ｇｌｙ）。牛磺酸（ｔａｕｒｉｎｅ，Ｔａｕ）在大脑中广泛１．２动物分组及处理随机分为对照组（Ｃｏｎ组）、［１０］存在且对大脑具有重要的保护作用。大脑内兴奋ＤＥＨＰ组（ＤＥＨＰ组）、高脂组（ＨＦＤ组）、ＤＥＨＰ暴露性和抑制性神经递质间的平衡状态决定了神经元的兴联合ＨＦＤ喂养组（ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组），各１２只。ＤＥ－奋性，神经递质内稳态失衡与神经退行性病变、脑损伤ＨＰ组、ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组每日经口给予玉米油稀释的［１１］和认知功能损伤密切相关。目前研究显示，高脂饮ＤＥＨＰ，剂量为５０μｇ／ｋｇ、体积０．１ｍＬ／１０ｇ。Ｃｏｎ食与肥胖也被证明与中枢神经功能障碍密切相组、ＨＦＤ组给予等体积玉米油灌胃。Ｃｏｎ组、ＤＥＨＰ［１２－１３］关。已知饮食是机体内ＤＥＨＰ的主要来源，日常组喂饲普通维持饲料，ＨＦＤ组、ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组喂饲［１４］生活中ＤＥＨＰ暴露和高脂饮食多同时存在。本实高脂饲料。连续２４周。验采用Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌性小鼠，分别给予普通饲料和高１．３观察指标脂饲料喂养，同时连续２４周经灌胃给予５０μｇ／ｋｇ１．３．１脑组织中５种氨基酸类神经递质水平检测ＤＥＨＰ。部分动物脱臼处死后迅速分离脑组织，采用采用ＨＰＬＣ对脑组织中Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｔａｕ和ＧＡＢＡ高效液相色谱法（ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇ－［１５］进行测定。检测条件如表１。流动相为０．０５ｍｏｌ／ｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）检测脑内５种氨基酸酸类神经递质水Ｌ的醋酸钠缓冲溶液（ｐＨ值为６．０）与体积分数５０％平，部分动物经体内灌注固定，制备冰冻切片，经尼氏的乙腈溶液，具体梯度洗脱程序如表２。

2·１４８·预防医学论坛２０２３年２月第２９卷第２期ＰｒｅｖＭｅｄＴｒｉｂ，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．２，Ｆｅｂ．２０２３表１ＨＰＬＣ检测条件面积，建立回归方程。参数数值参数数值样品检测：实验结束后，每组随机取８只小鼠脱臼检测器光电二极阵列管检测器流量１ｍＬ／ｍｉｎ处死，迅速剥离脑组织。分别称取约５０ｍｇ的大脑皮柱温４０℃进样量１０μＬ层、中脑及小脑组织，于冰上按照１∶９（ｗ／ｖ）加入色谱柱ＷｏｎｄａＳｉｌＣ１８－ＷＲ检测波长３５０ｎｍ５０％的乙腈水溶液（乙腈：水＝１∶１）并制备匀浆，４表２梯度洗脱程序℃、１２５００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，取上清液。取３００μＬ时间（ｍｉｎ）醋酸钠缓冲液（％）５０％乙腈溶液（％）样品上清液按以上标准曲线步骤进行检测，将待测样０８８１２品各氨基酸类经递质的峰面积纳入相应回归方程，计１５６５３５算５种氨基酸类神经递质Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＧＡＢＡ、Ｇｌｙ和１４４０６０Ｔａｕ的含量。２５８８１２氨基酸类神经递质保留时间及标准曲线：含５种标准曲线制备：配制分别含有２０、５０、８０、１００、２００氨基酸的混合标准进样后，在２５ｍｉｎ内各组分能完全／ｍＬＡｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｔａｕ和ＧＡＢＡ的混合标准系分开，Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｔａｕ和ＧＡＢＡ的保留时间分别μｇ列溶液，取以上混合标准系列溶液３００μＬ，分别与２００为８．２８２、１０．１０８、１５．０９７、１６．０４８、１６．９４５ｍｉｎ，见图μＬ０．５ｍｏｌ／Ｌ的碳酸氢钠溶液和１００μＬ０．５％的２，１。根据混合标准中Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｔａｕ、ＧＡＢＡ的含４－二硝基氟苯（２，４－ｄｉｎｉｔｒｏｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ，ＤＮＦＢ）溶液量及峰面积绘制标准曲线，各神经递质的峰面积随浓充分混合，６５℃暗反应５５ｍｉｎ。反应后按照上述检测度增加呈剂量依赖性升高，决定系数均在０．９９９以上，条件进行检测，分别根据标准系列的浓度及相应的峰见图２。图１Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｔａｕ和ＧＡＢＡ保留时间１．３．２大脑组织神经元变化采用尼氏染色（硫堇因素方差分析，并用ＬＳＤ法进行组间比较。以Ｐ＜法）法。每组剩余４只小鼠经腹腔注射水合氯醛麻醉，０．０５为差异有统计学意义。采用４％的多聚甲醛经心脏进行灌注，迅速剥离大脑，２结果置于４％的多聚甲醛中后固定４８ｈ，然后置于３０％蔗糖溶液中４８ｈ至沉底。采用冷冻切片机制备３０μｍ２．１各组脑组织中５种氨基酸类神经递质水平比较的冠状切片。切片经硫堇染色液染色１０ｍｉｎ，蒸馏水２．１．１各组大脑皮层中氨基酸类神经递质水平比较洗涤，梯度乙醇脱水，二甲苯透明后，中性树脂封片，使ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组大脑皮层ＧＡＢＡ高于Ｃｏｎ组、ＤＥ－用显微镜观察（１００、２００、４００），根据大脑神经元尼氏ＨＰ组，ＨＦＤ组、ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组Ｇｌｕ／ＧＡＢＡ低于体着色的深浅及密度评价神经元损伤情况。Ｃｏｎ组（Ｐ＜０．０５）；各组其他指标比较差异无统计学１．４统计学处理采用ＳＰＳＳ２６．０统计软件。符合意义（Ｐ＞０．０５）。见表３。正态分布的计量资料以ｘ±ｓ表示，多组比较采用单

3预防医学论坛２０２３年２月第２９卷第２期ＰｒｅｖＭｅｄＴｒｉｂ，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．２，Ｆｅｂ．２０２３·１４９·注：Ａ为天冬氨酸；Ｂ为谷氨酸；Ｃ为甘氨酸；Ｄ为牛磺酸；Ｅ为γ－氨基丁酸。图２氨基酸类神经递质标准曲线２．１．２各组中脑中氨基酸类神经递质水平比较各计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表５。组中脑中氨基酸类神经递质水平比较差异无统计学意２．２各组大脑神经元变化Ｃｏｎ组大脑神经元胞质义（Ｐ＞０．０５）。见表４。中尼氏体致密，着色较深。ＤＥＨＰ组、ＨＦＤ组及ＨＦＤ２．１．３各组小脑中氨基酸类神经递质水平比较＋ＤＥＨＰ组小鼠大脑神经元中尼氏体颜色变淡、着色ＤＥＨＰ组、ＨＦＤ组、ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组小脑Ｇｌｙ均高于颗粒稀疏，部分细胞中可观察到空泡现象；ＨＦＤ＋ＤＥ－Ｃｏｎ组，ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组ＧＡＢＡ高于Ｃｏｎ组、ＤＥＨＰＨＰ组大脑神经元中尼氏体变化最为明显。见图３。组、ＨＦＤ组（Ｐ＜０．０５）；各组其他指标比较差异无统表３各组大脑皮层中氨基酸类神经递质水平比较（ｍｇ／ｇ，ｘ±ｓ）组别ｎＡｓｐＧｌｕＴａｕＧｌｙＧＡＢＡＧｌｕ／ＧＡＢＡＣｏｎ组８１．１０２±０．１４９１．４８８±０．１２４１．５１９±０．１６１０．１５２±０．０４３０．５２３±０．１６８３．１１２±１．０２５ＤＥＨＰ组８１．０３６±０．２８９１．４０６±０．３４７１．５３５±０．３５００．１８３±０．０８４０．５４８±０．０７６２．５４６±０．３９５ＨＦＤ组８０．８６７±０．１２３１．２１６±０．１８５１．２６１±０．１７５０．１９６±０．０３６０．６７０±０．２１８１．９４６±０．５６８ａＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组８０．９５１±０．２２４１．３１７±０．５０７１．２６８±０．５７９０．１９９±０．０５６０．７２６±０．０９３ａｂ１．８７３±０．８７４ａａｂ注：与Ｃｏｎ组相比，Ｐ＜０．０５；与ＤＥＨＰ组相比，Ｐ＜０．０５。Ａｓｐ为天冬氨酸，Ｇｌｕ为谷氨酸，Ｔａｕ为牛磺酸，Ｇｌｙ为甘氨酸，ＧＡＢＡ为氨基丁酸。表４各组中脑中氨基酸类神经递质水平比较（ｍｇ／ｇ，ｘ±ｓ）组别ｎＡｓｐＧｌｕＴａｕＧｌｙＧＡＢＡＧｌｕ／ＧＡＢＡＣｏｎ组８０．９３２±０．２１５１．２０７±０．１２１１．０７２±０．２１１０．２３８±０．０４１０．５３１±０．１１１２．３５６±０．５５６ＤＥＨＰ组８０．９０５±０．１１７１．１６１±０．１３５１．１７６±０．１９２０．２４２±０．１２３０．５６３±０．０７０２．１１８±０．４１２ＨＦＤ组８１．０３９±０．１８０１．２０５±０．０７１１．２７４±０．２２５０．２２５±０．０３４０．５８７±０．０８６２．０９９±０．３５４ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组８０．９０３±０．０８０１．１０８±０．１７２１．２０６±０．０９９０．２２６±０．０７４０．５３１±０．０９６２．２３４±０．３９８注：Ａｓｐ为天冬氨酸，Ｇｌｕ为谷氨酸，Ｔａｕ为牛磺酸，Ｇｌｙ为甘氨酸，ＧＡＢＡ为氨基丁酸。表５各组小脑中氨基酸类神经递质水平比较（ｍｇ／ｇ，ｘ±ｓ）组别ｎＡｓｐＧｌｕＴａｕＧｌｙＧＡＢＡＧｌｕ／ＧＡＢＡＣｏｎ组８１．２７５±０．１６５１．０４５±０．１１３０．５８６±０．０３２０．２３９±０．０１９０．４４０±０．０７８２．４１９±０．３７５ＤＥＨＰ组８０．８９２±０．１４６ａ１．１３１±０．３０００．６０３±０．０９９０．３１９±０．０５１ａ０．４７７±０．０９７２．４５０±０．７４７ＨＦＤ组８１．２１５±０．２５３１．０１４±０．２２５０．５９４±０．１２１０．３７１±０．０６６ａ０．５０６±０．０７２２．０４８±０．５６１ＨＦＤ＋ＤＥＨＰ组８１．１８２±０．２１４１．０７４±０．１１９０．６３８±０．０７３０．４０１±０．１０５ａ０．６１７±０．１２７ａｂｃ１．７９５±０．３５５ａｂｃ注：与Ｃｏｎ组相比，Ｐ＜０．０５；与ＤＥＨＰ组相比，Ｐ＜０．０５；与ＨＦＤ组相比，Ｐ＜０．０５。Ａｓｐ为天冬氨酸，Ｇｌｕ为谷氨酸，Ｔａｕ为牛磺酸，Ｇｌｙ为甘氨酸，ＧＡＢＡ为氨基丁酸。

4·１５０·预防医学论坛２０２３年２月第２９卷第２期ＰｒｅｖＭｅｄＴｒｉｂ，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．２，Ｆｅｂ．２０２３图３各组大脑神经元尼氏染色（硫堇法）３讨论暴露及ＨＦＤ喂养使小鼠大脑皮层Ｇｌｕ明显降低，但可观察到ＧＡＢＡ水平明显升高。此外，三种处理方式ＤＥＨＰ作为环境中广泛存在的污染物，因其高脂均导致小鼠大脑皮层Ｇｌｕ／ＧＡＢＡ降低。ＧＡＢＡ能够溶性的特点，使得ＤＥＨＰ进入机体后极易进入并蓄积通过抑制兴奋性神经元阻断Ｇｌｕ的兴奋毒性，Ｇｌｕ／在脑组织中。近年来，ＤＥＨＰ的神经毒性受到了广泛ＧＡＢＡ失调被认为是抑郁症和失眠的重要影响因关注。在体外培养系统中，采用０～２０μｍ的ＤＥＨＰ［２４］素。Ｇｌｙ是突触后膜谷氨酸受体Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨处理ＮＥ－４Ｃ小鼠神经干细胞，可诱导细胞发生氧化应酸（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｄ－ａｓｐａｒｔａｔｅ，ＮＭＤＡ）受体的变构调节［１６］激和细胞凋亡，且呈剂量依赖性。ＩＣＲ小鼠孕期暴［２５］物，对兴奋性氨基酸产生的效应具有调节作用。露于１ｍｇ／ｋｇ的ＤＥＨＰ，观察到新生小鼠新皮质神经Ｇｌｙ和Ｔａｕ作为甘氨酸受体（ｇｌｙｃｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧｌｙＲ）［１７］元分布异常和神经元减少。如前所述，秀丽线虫、的激动剂具有抗惊厥作用［２６］。结果也显示，ＤＥＨＰ和大鼠和小鼠暴露ＤＥＨＰ可导致神经行为学功能障碍。ＨＦＤ喂养均使小鼠大脑皮层和小脑Ｇｌｙ升高，联合处大脑正常功能的维持依赖于神经元兴奋和抑制的理组更加明显。与本研究的结果一致。Ｋａｎｇ等［２７］给动态平衡，该平衡与脑内Ｇｌｕ和ＧＡＢＡ代谢密切相予Ｃ５７ＢＬ／６雄性小鼠分别含２、２０和２００ｍｇ／ｋｇＤＥ－［１８］关。Ｇｌｕ是大脑中丰度最高的兴奋性神经递质，主ＨＰ的饲料３０ｄ，观察到小鼠表现出抑郁样行为，小鼠要存在于神经元和星形胶质细胞。以Ｇｌｕ作为递质前额叶皮层中Ｇｌｕ和Ｇｌｎ降低、谷氨酰胺合成酶活性的谷氨酸能神经元约占大脑神经元的６０％，在大脑兴降低。［１９］奋传递、突触可塑性及应激反应起关键作用。ＧＡ－神经元尼氏体是神经元胞体中的强嗜碱性物质，ＢＡ也广泛存在于脑组织中，作为脑内主要的抑制性是神经元功能状态的标志。尼氏体主要为粗面内质网递质，能降低大脑兴奋性、抑制突触传递。ＧＡＢＡ能和游离核糖体，是神经元合成蛋白质的关键结构，代谢神经元主要分布在大脑皮层、海马、下丘脑等部位，旺盛的神经元尼氏体丰富，神经元受损尼氏体减少甚ＧＡＢＡ可以参与注意力、工作记忆和情绪等认知功能至消失。本实验采用硫堇染色尼氏体显示，ＤＥＨＰ暴［２０］的调节。大脑神经元和星形胶质细胞间存在Ｇｌｕ／露及ＨＦＤ喂养，小鼠大脑皮层尼氏体着色变浅，着色ＧＡＢＡ－谷氨酰胺（ｇｌｕｔａｍｉｎｅ，Ｇｌｎ）代谢环路，是保持脑颗粒密度降低；ＤＥＨＰ和ＨＦＤ联合处理，尼氏体减少内Ｇｌｕ和ＧＡＢＡ动态平衡和正常脑功能的关键通路。更加明显，提示长期低剂量ＤＥＨＰ暴露和ＨＦＤ喂饲神经元谷氨酸脱羧酶催化Ｇｌｕ脱羧形成ＧＡＢＡ，然后均可使神经元损伤，且两者之间可能存在协同作用。经囊泡释放、与突触后膜受体结合发挥神经抑制作用，综上所述，５０μｇ／ｋｇＤＥＨＰ长期暴露和高脂饮食［２１］谷氨酸脱羧酶活性决定ＧＡＢＡ合成速率。星形胶可导致小鼠大脑皮层及小脑抑制性氨基酸类神经递质质细胞可摄取神经元释放的Ｇｌｕ，在其特有的谷氨酰水平升高，破坏脑内兴奋性氨基酸类神经递质和抑制胺合成酶作用下，转化为Ｇｌｎ并被传递至神经元，然性氨基酸类神经递质的内稳态，引起神经元损伤及丢［２２］后重新转化为Ｇｌｕ，参与神经信号传导。研究表明失，这可能是高脂和ＤＥＨＰ对中枢神经系统协同损伤Ｇｌｕ／ＧＡＢＡ比值过高或过低均会产生细胞毒性作用，的潜在机制之一。［２３］导致神经元受损。本实验中，尽管未观察到ＤＥＨＰ

5预防医学论坛２０２３年２月第２９卷第２期ＰｒｅｖＭｅｄＴｒｉｂ，Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．２，Ｆｅｂ．２０２３·１５１·参考文献［１６］ＷＵＭ，ＸＵＬ，ＴＥＮＧＣ，ｅｔａｌ．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｄｉ－［１］ＷＡＮＧＪ，ＣＨＥＮＧ，ＣＨＲＩＳＴＩＥＰ，ｅｔａｌ．Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｒｉｓｋａｓ－２－ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌｐｈｔｈａｌａｔｅ（ＤＥＨＰ）－ｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｍｏｕｓｅＮＥ－４Ｃｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｐｈｔｈａｌａｔｅｅｓｔｅｒｓ（ＰＡＥｓ）ｉｎｖｅｇｅｔａｂｌｅｓａｎｄｓｏｉｌｓｏｆｓｕｂ－ｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２０１９，７０：４１－４７．ｕｒｂａｎｐｌａｓｔｉｃｆｉｌｍｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅｓ［Ｊ］．ＳｃｉＴｏｔａｌＥｎｖｉｒｏｎ，２０１５，５２３：［１７］ＫＯＭＡＤＡＭ，ＧＥＮＤＡＩＹ，ＫＡＧＡＷＡＮ，ｅｔａｌ．Ｐｒｅｎａｔａｌｅｘｐｏｓｕｒｅ１２９－１３７．ｔｏｄｉ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅｉｍｐａｉｒｓｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｈｅｍｏｕｓｅ［２］ＨＵＢＥＲＷＷ，ＧＲＡＳＬ－ＫＲＡＵＰＰＢ，ＳＣＨＵＬＴＥ－ＨＥＲＭＡＮＮｎｅｏｃｏｒｔｅｘ［Ｊ］．ＴｏｘｉｃｏｌＬｅｔｔ，２０１６，２５９：６９－７９．Ｒ．Ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｄｉ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅｉｎ［１８］ＲＩＤＥＡＵＸＲ．ＴｅｍｐｏｒａｌｄｙｎａｍｉｃｓｏｆＧＡＢＡａｎｄｇｌｘｉｎｔｈｅｖｉｓｕａｌｒｏｄｅｎｔｓａｎｄｉｔｓｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｎｈｕｍａｎｒｉｓｋ［Ｊ］．ＣｒｉｔＲｅｖＴｏｘｉｃｏｌ，ｃｏｒｔｅｘ［Ｊ］．ｅＮｅｕｒｏ，２０２０，７（４）：２０２０．１９９６，２６（４）：３６５－４８１．［１９］ＷＡＮＧＨ，ＰＥＮＧＲ，ＺＨＡＯＬ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎ［３］ＨＯＧＢＥＲＧＪ，ＨＡＮＢＥＲＧＡ，ＢＥＲＧＬＵＮＤＭ，ｅｔａｌ．Ｐｈｔｈａｌａｔｅｄｉ－ＮＭＤＡｒｅｃｅｐｔｏｒｓａｎｄｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｍｅｍｏｒｙｉｍ－ｅｓｔｅｒｓａｎｄｔｈｅｉｒｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔｍｉｌｋ，ｂｌｏｏｄｏｒｓｅｒｕｍ，ｐａｉｒｍｅｎｔ：ａｌｏｎｇ－ｔｅｒｍｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎＷｉｓｔａｒｒａｔｓ［Ｊ］．ＩｎｔＪＲａｄｉａｔａｎｄｕｒｉｎｅａｓｂｉｏｍａｒｋｅｒｓｏｆｅｘｐｏｓｕｒｅｉｎｖｕｌｎｅｒａｂｌｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｌ，２０１５，９１（３）：２６２－２６９．ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔ，２００８，１１６（３）：３３４－３３９．［２０］ＰＡＩＮＥＴＡ，ＣＯＯＫＥＥＫ，ＬＯＷＥＳＤＣ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｈｒｏｎｉｃｉｎｈｉｂｉ－［４］ＣＨＯＳＣ，ＢＨＡＮＧＳＹ，ＨＯＮＧＹＣ，ｅｔａｌ．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｉｏｎｏｆＧＡＢＡｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｎａｔｔｅｎｔｉｏｎａｎｄｉｍｐｕｌｓｅｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．Ｐｈａ－ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｐｈｔｈａｌａｔｅｅｘｐｏｓｕｒｅａｎｄｔｈｅｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅｏｆｓｃｈｏｏｌ－ａｇｅｒｍａｃｏｌＢｉｏｃｈｅｍＢｅｈａｖ，２０１５，１３５：９７－１０４．ｃｈｉｌｄｒｅｎ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔ，２０１０，１１８（７）：１０２７－１０３２．［２１］ＰＥＨＲＳＯＮＡＬ，ＳＡＮＣＨＥＺＣ．Ａｌｔｅｒｅｄｇａｍｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ［５］ＨＵＡＮＧＨＢ，ＣＨＥＮＨＹ，ＳＵＰＨ，ｅｔａｌ．Ｆｅｔａｌａｎｄｃｈｉｌｄｈｏｏｄｅｘ－ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｉｎｍａｊｏｒｄｅｐｒｅｓｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒ：ａｃｒｉｔｉｃａｌｒｅｖｉｅｗｏｆｐｏｓｕｒｅｔｏｐｈｔｈａｌａｔｅｄｉｅｓｔｅｒｓａｎｄｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎｕｐｔｏｔｈｅｓｕｐｐｏｒｔｉｎｇｅｖｉｄｅｎｃｅａｎｄｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｓｅｒｏｔｏｎｅｒｇｉｃａｎｔｉｄｅ－１２ｙｅａｒｓｏｆａｇｅ：Ｔａｉｗａｎｅｓｅｍａｔｅｒｎａｌａｎｄｉｎｆａｎｔｃｏｈｏｒｔｓｔｕｄｙ［Ｊ］ｐｒｅｓｓａｎｔｓ［Ｊ］．ＤｒｕｇＤｅｓＤｅｖｅｌＴｈｅｒ，２０１５，９：６０３－６２４．．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１５，１０（６）：ｅ０１３１９１０．［２２］ＭＡＲＴＩＮＥＺ－ＨＥＲＮＡＮＤＥＺＡ，ＢＥＬＬＫＰ，ＮＯＲＥＮＢＥＲＧＭ［６］ＨＯＷＣＭ，ＬＩＮＴＡ，ＬＩＡＯＶＨ．Ｅａｒｌｙ－ｌｉｆｅｃｈｒｏｎｉｃｄｉ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘ－Ｄ．Ｇｌｕｔａｍｉｎｅｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ：ｇｌｉａｌｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｂｒａｉｎ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅｅｘｐｏｓｕｒｅｗｏｒｓｅｎｓａｇｅ－ｒｅｌａｔｅｄｌｏｎｇ－ｔｅｒｍａｓｓｏｃｉａｔｉｖｅ１９７７，１９５（４２８４）：１３５６－１３５８．ｍｅｍｏｒｙｄｅｃｌｉｎｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｓｕｌｉｎ／ＩＧＦ－１ｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄＣＲＨ－［２３］武春阳，李炜，张丹参，等．脑内氨基酸水平与学习记忆能力的相１／ＣＲＥＢｉｎＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓ［Ｊ］．ＪＨａｚａｒｄＭａｔｅｒ，２０２１，４１７：关性［Ｊ］．中国药理学与毒理学杂志，２０１９，３３（６）：４７１－４７２．１２６０４４．［２４］ＢＥＬＦＩＯＲＥＭ，ＣＡＲＩＡＴＩＩ，ＭＡＴＴＥＵＣＣＩＡ，ｅｔａｌ．Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｎ－［７］ＨＯＷＣＭ，ＹＥＮＰＬ，ＷＥＩＣＣ，ｅｔａｌ．Ｅａｒｌｙｌｉｆｅｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏｄｉ（２－ａｔｉｖｅｐｒｅｆｉｂｒｉｌｌａｒｏｌｉｇｏｍｅｒｓｂｕｔｎｏｔｍｏｎｏｍｅｒｓｉｎｄｕｃｅｍｅｍｂｒａｎｅｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅｃａｕｓｅｓａｇｅ－ｒｅｌａｔｅｄｄｅｃｌｉｎｅｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｉｎ－ｄａｍａｇｅｔｈａｔｔｒｉｇｇｅｒｓＮＭＤＡ－ｍｅｄｉａｔｅｄＣａ（２＋）－ｉｎｆｌｕｘ，ＬＴＰｉｍ－ｓｕｌｉｎ／ＩＧＦ－１－ｌｉｋｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙａｎｄＳＫＮ－１ｉｎＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｐａｉｒｍｅｎｔａｎｄｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ［Ｊ］．ＳｃｉＲｅｐ，２０１９，９（１）：５１４４．ｅｌｅｇａｎｓ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎＰｏｌｌｕｔ，２０１９，２５１：８７１－８７１．［２５］ＺＨＡＮＧＸ－Ｙ，ＪＩＦ，ＷＡＮＧＮ，ｅｔａｌ．Ｇｌｙｃｉｎｅｉｎｄｕｃｅｓｂｉｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ［８］ＲＡＮＤ，ＬＵＯＹ，ＧＡＮＺ，ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｔｈｅｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｉｎｎ－ｍｅｔｈｙｌ－ｄ－ａｓｐａｒｔａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄｓｙｎａｐｔｉｃｄｅｆｉｃｉｔｏｆｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｍｅｍｏｒｙｂｙｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏＤｉ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ）ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌＣＡ１Ｎｅｕｒｏｎｓ［Ｊ］．ＪＢｉｏＣｈｅｍ，２０１４，２８９ｐｈｔｈａｌａｔｅｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＥｃｏｔｏｘｉｃｏｌＥｎｖｉｒｏｎＳａｆ，２０１９，１７４：５８－６５．（４５）：３１２００－３１２１１．［９］ＢＡＲＡＫＡＴＲ，ＬＩＮＰＣ，ＰＡＲＫＣＪ，ｅｔａｌ．ＰｒｅｎａｔａｌｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏＤＥ－［２６］ＫＩＲＣＨＮＥＲＡ，ＢＲＥＵＳＴＥＤＴＪ，ＲＯＳＣＨＥＢ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔａｕ－ＨＰｉｎｄｕｃｅｓｎｅｕｒｏｎａｌｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｎｄｎｅｕｒｏｂｅｈａｖｉｏｒａｌａｂｎｏｒｍａｌｉ－ｒｉｎｅａｎｄｇｌｙｃｉｎｅｏｎｅｐｉｌｅｐｔｉｆｏｒｍａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｒｅｍｏｖａｌｏｆＭｇ２ｔｉｅｓｉｎａｄｕｌｔｍａｌｅｍｉｃｅ［Ｊ］．ＴｏｘｉｃｏｌＳｃｉ，２０１８，１６４（２）：４３９－４５２．＋ｉｎｃｏｍｂｉｎｅｄｒａｔｅｎｔｏｒｈｉｎａｌｃｏｒｔｅｘ－ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｓｌｉｃｅｓ［Ｊ］．Ｅｐｉｌｅ－［１０］ＣＡＬＥＴＴＩＧ，ＨＥＲＲＭＡＮＮＡＰ，ＰＵＬＣＩＮＥＬＬＩＲＲ，ｅｔａｌ．Ｔａｕ－ｐｓｉａ，２００３，４４（９）：１１４５－１１５２．ｒｉｎｅｃｏｕｎｔｅｒａｃｔｓｔｈｅｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｄｉ－［２７］ＫＡＮＧＪＳ，ＢＡＥＫＪＨ，ＪＵＮＧＳ，ｅｔａｌ．ＩｎｇｅｓｔｉｏｎｏｆＢｉｓ（２－ｅｔｈｙｌｈｅｘ－ａｂｅｔｅｓｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＡｍｉｎｏＡｃｉｄｓ，２０１８，５０（１）：９５－１０４．ｙｌ）ｐｈｔｈａｌａｔｅ（ＤＥＨＰ）ｄｕｒｉｎｇａｄｏｌｅｓｃｅｎｃｅｃａｕｓｅｓｄｅｐｒｅｓｓｉｖｅ－ｌｉｋｅ［１１］ＦＥＮＧＸ，ＣＨＥＮＡ，ＺＨＡＮＧＹ，ｅｔａｌ．Ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍｔｏｘ－ｂｅｈａｖｉｏｒｓｔｈｒｏｕｇｈｈｙｐｏａｃｔｉｖｅｇｌｕｔａｍａｔｅｒｇｉｃｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｔｈｅｍｅｄｉａｌｉｃｉｔｙｏｆｍｅｔａｌｌｉｃｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ［Ｊ］．ＩｎｔＪＮａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，１０：ｐｒｅｆｒｏｎｔａｌｃｏｒｔｅｘ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎＰｏｌｌｕｔ，２０２１，２８９：１１７９７８．４３２１－４３４０．［１２］ＺＡＮＩＮＩＰ，ＡＲＢＯＢＤ，ＮＩＣＨＥＳＧ，ｅｔａｌ．Ｄｉｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｏｂｅｓｉｔｙａｌ－作者贡献声明：ｔｅｒｓｍｅｍｏｒｙｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｉｏｎｉｎｆｅｍａｌｅｒａｔｓ［Ｊ］．ＰｈｙｓｉｏｌＢｅｈａｖ，２０１７，郑刘根：开展动物实验以及后续指标检测，收集、整理及分析实１８０：９１－９７．验结果，撰写论文、修订论文；［１３］ＨＯＬ，ＱＩＮＷ，ＰＯＭＰＬＰＮ，ｅｔａｌ．Ｄｉｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ单姗：参与动物实验；ｐｒｏｍｏｔｅｓａｍｙｌｏｉｄｏｓｉｓｉｎａｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓ程东：参与研究方案实施；ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＦＡＳＥＢＪ，２００４，１８（７）：９０２－９０４．李慧：参与病理指标检测及分析；［１４］ＷＯＲＭＵＴＨＭ，ＳＣＨＥＲＩＮＧＥＲＭ，ＶＯＬＬＥＮＷＥＩＤＥＲＭ，ｅｔ姚文环：参与神经递质检测及数据处理；ａｌ．Ｗｈａｔａｒｅｔｈｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏｅｉｇｈｔｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙｕｓｅｄ赵秀兰：参与研究思路设计、研究方案制订，修订论文；ｐｈｔｈａｌｉｃａｃｉｄｅｓｔｅｒｓｉｎＥｕｒｏｐｅａｎｓ［Ｊ］．ＲｉｓｋＡｎａｌ，２００６，２６（３）：８０３－张天亮：参与研究思路设计，负责研究方案落实，修订、审核８２４．［１５］ＸＵＬ，ＱＩＵＸ，ＷＡＮＧＳ，ｅｔａｌ．ＮＭＤＡＲｅｃｅｐｔｏｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔＭＫ８０１论文。收稿日期：２０２２－１２－０１本文编辑：韩磊ｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔ１－ｂｒｏｍｏｐｒｏｐａｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｃｏｇｎｉｔｉｖｅｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＮｅｕｒｏｓｃｉＢｕｌｌ，２０１９，３５（２）：３４７－３６１．