维生素c发酵研究进展

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1、维生素C发酵研究进展摘要：生物发酵法是产生维生素C的主要途径。用常压输送流动相的方法为经典液相色谱法，这种色谱法的柱效能低、分离周期长。高效液相色谱法（highperformanceliquidchromatography），简称（HPLC）。是在经典液相色谱的基础上发展起来的一种色谱方法。与经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①应用了颗粒极细（一般为10µm以下）、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高；②采用高压输液泵输送流动相，流速快，一般试样的分析需数分钟，复杂试样分析在

2、数十分钟内即可完成；③广泛使用了高灵敏检测器，大大提高了灵敏度。目前，已经发展了多种不同的固定相，有多种不同的分离模式，使高效液相色谱法的应用范围不断扩大。下面介绍高效液相色谱法的有关知识，新的方法和技术以及在药物分析中的应用。高效液相色谱法是以液体作为流动相并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广不受分析对象挥发性和热稳定性的限制因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中可用气相色谱分析的约占20%而80%则需用高效液相色谱来分析。液相色谱根据分离机理的不同可分为

3、液液分配色谱、液固吸附色谱、离子交换色谱和排斥色谱(或凝胶渗透色谱)。目前高效色谱法在天然药物，复方药物，手性药物及临床治疗药物监测等方面应用广泛并有一定的发展前景。关键字：高效液相色谱，药物分析，应用高效液相色谱法也称高压液相色谱法。是一种高灵敏度，高效能，高选择性，快速的分离分析方法。可以用于多种不同性质的溶剂作为流动相6，且流动相队分离的选择性影响很大，因此分离选择性高。HPLC是将一定急性的单一或混合溶剂作为流动相用泵将流动相注入装有填充剂的色谱内。注入的供试液被流动相代入柱内进行分离然后分先后进入

4、检测器，用记录仪或数据处理装置记录色谱图和进行数据处理。高效液相色谱仪基本由输液系统，进样系统，分离系统，检测系统和色谱数据处理系统五部分组成。高效液相色谱法按分离机理的不同可分为以下几类：一吸附色谱法（adsorptionchromatography）以吸附剂为固定相的色谱方法称为吸附色谱法。使用最多的吸附色谱固定相是硅胶，流动相一般使用一种或多种有机溶剂的混合溶剂。在吸附色谱中，不同的组分因和固定相吸附力的不同而被分离。组分的极性越大、固定相的吸附力越强，则保留时间越长。流动相的极性越大，洗脱力越强，则

5、组分的保留时间越短。二液液分配色谱法（liquid-liquidchromatography)液液分配色谱的固定相和流动相是互不相溶的两种溶剂，分离时，组分溶入两相，不同的组分因分配系数（K)的不同而被分离。目前广泛使用的化学键合固定相是将固定液的官能团键合在载体上而制成的，使用化学键合固定相的色谱方法（简称键合相色谱法）可以用分配色谱的原理加以解释。键合相色谱法在HPLC中占有极其重要的地位，是应用最广的色谱法。按照固定相和流动相极性的不同，分配色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法两类。三．离子交换色谱法

6、(ionexchangechromatography)6离子对交换色谱法是以离子交换剂为固定相的色谱方法，组分因和离子交换剂亲和力的不同而被分离。柱填料含有极性可离子化的基团，如羧酸、磺酸或季铵离子，在合适的PH值下，这些基团将解离，吸引相反电荷的物质。由于离子型物质能与柱填料反应，所以可被分离。样品中不同的组分因离子交换平衡常数的不同而分离。离子交换色谱的流动相一般为一定PH值的缓冲溶液，有时也加入少量的有机溶剂，如乙醇、四氢呋喃、乙腈等，以增大组分在流动相中的溶解度。流动相)的PH值影响离子交换剂的交换

7、容量。对弱酸或弱碱性的被分离组分，流动相的PH值还会影响其电离状况，流动相的PH值必须使待分离组分处于离解状态，才能被分离。离子交换色谱法用于分离在测定条件下呈离解状态的组分，如具有酸性或碱性的化合物，反相离子对色谱法在药物分析中的应用非常广泛，例如生物碱、磺胺类药物、某些抗生素及维生素等的分析均可采用此方法。除此之外还有空间排阻色谱法，手性色谱法，亲和色谱法等。HPLC在药物分析中的应用由于具有高选择性、高灵敏度，并可同时用于有关物质检查与含量测定的特点，已成为医药研究的有力工具。如在中草药有效成分的分离

8、和纯度测定、人工合成药物成分的定性和定量测定、新型高效手性药物中手性对映体含量的测定以及药物代谢物的测定等方面都需要用到。天然药物分析天然药物的来源有动物、植物和矿物之分，其中以植物类为主。由于天然药物的化学成分复杂，其有效成分，可能有一个，也可以有多个，这对于控制药品质量，建立质量标准来说比较困难，BCDE可通过对天然药物的有效成分进行分离鉴定，再测定有效成分的含量吴茱萸是芸香科植物吴茱萸的干燥近成熟果实，具有